WPI-Blog

WPIs NanoFil: Gasdichtes Injektionssystem in der Tierforschung

WPI’s NanoFil™ ist ein gasdichtes Mikroliter-Injektionssystem für die Forschung an Kleintieren, das Nadeln bis zu einer Stärke von 36 Gauge unterstützt. Sein ultra-niedriges Totvolumen ermöglicht direkte Sub-Mikroliter-Injektionen ohne Öl-Rückfüllung, und eine patentierte Silikondichtung erlaubt einen schnellen Nadelwechsel mit minimalem Probenverlust. Kompatibel mit GC/CE-Kapillaren und verschiedenen Schläuchen, bietet es stumpfe und einzigartige 25°-tri-surface abgeschrägte Nadeln (26–36G), die Gewebeschäden reduzieren und die Haltbarkeit verbessern. Das System wird häufig für präzise Gewebeinjektionen, einschließlich ophthalmologischer Anwendungen, verwendet und wird durch Anwendungskits und begutachtete Studien unterstützt.

ANWENDUNGSHINWEIS: Vergleich der Genauigkeit des Kompensationsdrucks

In jedem Labor ist es fast genauso wichtig, über wichtige Labormaterialien zu verfügen wie über die Hauptgeräte. Die Wahl eines seriösen Lieferanten für diese notwendigen Materialien ist ebenso wichtig wie die Verfügbarkeit hochwertiger Labormaterialien, wenn Sie sie benötigen. WPI möchte Ihr Partner in der frühen Wirkstoffforschung sein und führt eine große Auswahl an Labormaterialien, von denen viele noch am selben Werktag versendet werden können. Eine Vielzahl von Labormaterialien vorrätig zu haben, macht uns zu einem verlässlichen Forschungspartner. Hier sind einige der beliebten Materialien, die wir vorrätig halten, um Ihre Bedürfnisse für Ihr bevorstehendes Experiment zu erfüllen.

ANWENDUNGSHINWEIS: Häufige Einsatzbereiche des EVOM™ Auto Systems

EVOM™ Auto ist die neueste Generation des automatisierten transepithelialen oder transendothelialen elektrischen Widerstandsmesssystems (TEER) von WPI. Es verwendet die bewährte Technologie aus dem EVOM™ Manual und REMS, kombiniert mit einer neuen Multi-Elektroden-Anordnung, einer Software-Schnittstelle und einem Steuerungssystem, und bietet unsere schnellste Workflow-Lösung bei gleichzeitig verbesserter TEER-Messgenauigkeit:

ANWENDUNGSHINWEIS: TEER-Technologie ermöglicht einen optimierten in-vitro-Arbeitsablauf für die Wirkstoffforschung

In-vitro-Modelle verwenden zwei gängige Methoden, um Veränderungen der Integrität der endothelialen Barriere zu quantifizieren: transepitheliale/transeendotheliale elektrische Widerstandsmessung (TEER) und Permeabilität von Tracermolekülen.1 TEER ist eine nicht-invasive Methode, die Veränderungen der elektrischen Leitfähigkeit misst, um Konfluenz und Barriereintegrität zu bestimmen. Die Permeabilität von Tracermolekülen nutzt Moleküle mit definierten Molekulargewichten, um die Ausschlusskapazität von Zellbarrieren zu messen (z. B. 4 kDa FITC-Dextran oder FD4).1 Mit dem EVOM™ Manual (EVOM-MT-03-01) in Kombination mit der EndOhm TEER-Elektrode und permeablen Zellkulturträgern beschreibt diese Anwendungshinweis, wie die Integrität der endothelialen Barriere nach Zytokinbehandlung nicht-invasiv bewertet werden kann, und bietet eine Methode zur Identifizierung vasoaktiver Verbindungen, die potenziell vaskuläre Schäden verursachen können. Studien zur Permeabilität von Tracermolekülen werden mit der TEER-Bewertung kombiniert, um die durch die Behandlung induzierten Auswirkungen sowohl auf interzelluläre Verbindungen als auch auf den parazellulären Transport zu erläutern (Abb. 1).

ANWENDUNGSHINWEIS: Beobachtung der Mitose mit Celloger® Mini Plus

Im Prozess des „Zellzyklus“ wachsen Zellen und teilen sich in zwei genetisch identische Tochterzellen. Er wird durch einen komplexen Signalweg reguliert, der die Zellhomöostase durch Steuerung der Zellteilung und DNA-Verdopplung aufrechterhält1. Andererseits werden Anti-Mitose-Medikamente eingesetzt, um das abnormale Wachstum von Krebszellen zu unterdrücken, da Krebszellen unkontrolliert und unbegrenzt außerhalb des Zellzyklus wachsen und sich teilen2. Insbesondere ist Nocodazol als ein repräsentatives Anti-Mitose-Medikament für die Krebsbehandlung bekannt und zeichnet sich dadurch aus, dass es die Dynamik der Mikrotubuli während der zytoplasmatischen und nuklearen Teilung stört3,4.

ANWENDUNGSHINWEIS: Analyse der durch Nocodazol induzierten Zytotoxizität mit Celloger® Mini Plus

Zytotoxizität bezieht sich auf das Ausmaß der Schädigung von Zellen, verursacht durch chemische Substanzen oder physikalische Faktoren. Die Messung mittels Zytotoxizitäts-Assay ist entscheidend für die Arzneimittelentwicklung und biologische Forschung. Zellen durchlaufen komplexe Signalwege, die verschiedene Zellsterbeprozesse wie Apoptose, Nekrose und Nekroptose auslösen. Die meisten Zytotoxizitäts-Assays werden jedoch am Endpunkt gemessen, was es schwierig macht, die dynamische Reaktion der Zellen auf Medikamente zu untersuchen.

 

ANWENDUNGSHINWEIS: Einsatz von Celloger® Mini Plus zur Beobachtung morphologischer Veränderungen und phagozytärer Aktivität in der Makrophagen-Zelllinie

Da weiße Blutkörperchen, die für die Immunfunktion verantwortlich sind, Suspensionzellen sind, die entlang der Blutgefäße wandern, verwenden immunologische Studien häufig verschiedene Suspensionzelllinien, die von weißen Blutkörperchen stammen. Im Umgang mit Suspensionzellen, im Gegensatz zu adhärenten Zellen, führt eine leichte Bewegung einer Platte beim Positionieren unter dem Mikroskop dazu, dass die Zellen schweben. Abgesehen von den Problemen, die durch Temperatur- und CO2-Instabilität verursacht werden, ist es tatsächlich nicht möglich, ein herkömmliches Mikroskop zur Echtzeitüberwachung der Zellen zu verwenden. Daher ist für eine stabile Überwachung von Suspensionzellen ein Live-Cell-Imaging-Gerät wie das Celloger® Mini Plus, das innerhalb eines Inkubators arbeitet, unerlässlich1. Darüber hinaus bewegt bei Celloger® Mini Plus die Kamera im System, um Bilder der Zellen an mehreren Positionen aufzunehmen und die Zellprobe in einem stabilen Zustand zu halten, anstatt eine bewegliche Bühne mit einer darauf befindlichen Platte zu verwenden. Als die Suspensionzellen sowohl mit Celloger® Mini Plus als auch mit einem Mikroskop überwacht wurden, war die Bildgebung mit Celloger® Mini Plus stabiler im Vergleich zur Verwendung eines Mikroskops, bei dem mehrere Zellen unscharf waren (Abbildung 1).

Niedrigdurchfluss-Dämpfungskit für eine Pumpe

Ein kalibrierter BLPR2 am LabTrax24T wurde verwendet, um die Ergebnisse aufzuzeichnen. Dies ist eine Darstellung beider Pumpen auf dem #14 Schlauch bei 50 U/min in eine 22-Gauge-Nadel. Der Durchfluss wird bei 50 U/min auf etwa 9 ml/min geschätzt.

Verwendung eines DAM50 für EEG-Aufnahmen bei Nagetieren

Ein rauscharmes Verstärkergerät wie der DAM50 ist eine ausgezeichnete Wahl für EEG-Aufnahmen bei Nagetieren. Die Verstärker von WPI wurden für biomedizinische Forscher entwickelt. Während 20-30μV Rauschen bei Bio-Verstärkern üblich sind, erzeugen die Verstärker der DAM-Serie von WPI 0,4μV RMS (Root Mean Square) bei 0,1-100Hz. (Das entspricht etwa 2μV Spitze-Spitze.) Diese Einrichtung zeigt eine Möglichkeit, wie solche Aufnahmen gemacht werden können. Die RC1-Elektrode eignet sich gut für Ratten, und die EP1 ist besser für die Anwendung am Maus-Schädel geeignet.

Mikroinjektion bei Zebrafischen mit dem UMP3/Micro4

Sehen Sie, wie Forscher der University of Chicago erwachsene Zebrafische mit einer 10μl NanoFil Mikrospritze injizieren, die von einem Micro4 Steuergerät und der UltraMicroPump III (UMP3-1 umfasst eine UMP3-Pumpe und einen Micro4-Controller) gesteuert wird

Mikroinjektionstechnik bei Zebrafischen von JoVE

Chiara Cianciolo Cosentino von der Universität Pittsburgh beschreibt, wie sie intravenöse Mikroinjektionen bei Zebrafischlarven verwendet, um akute Nierenschädigungen in diesem JoVE-Video zu untersuchen. Sie können dieses Video auf JoVE ansehen. In diesem Video gezeigte WPI-Ausrüstung umfasst:

WPI Instruments im JoVE-Video zur Kreuzbestäubung vorgestellt

WPI-Chirurgieinstrumente wurden kürzlich in einem JoVE-Video vorgestellt, das eine neue Methode zur Kreuzbestäubung von Gräsern demonstriert.

Mikroinjektion in Zebrafisch-Otozyten

Forscher der University of Michigan verwenden das PV820 von WPI, um eine Morpholino-Lösung in das Lumen des otischen Vesikels von ein Tag alten Zebrafischembryonen zu injizieren. Anschließend nutzen sie Elektroporation, um mif und mif-like Morpholinos in die sich entwickelnden Innenohrgewebe einzubringen.

Frontfüllende Nanofil-Spritze

In diesem Video zeigt Mike Pizza, wie man eine Nanofil-Spritze mit MicroFil von vorne befüllt.

ANWENDUNGSHINWEIS: Verwendung eines Mikroskops mit einem Stereotaxie-Rahmen

Sie können das PZMIV-Stereomikroskop mit einem stereotaktischen Rahmen wie im Bild unten gezeigt verwenden. Diese Einrichtung zeigt ein PZMIV-BS. Die U-Rahmen-Grundplatte (502045) ist abgebildet, aber die meisten stereotaktischen Rahmen können auf diese Weise verwendet werden. Wählen Sie ein Stereomikroskop-Objektiv, das Ihnen viel Arbeitsraum bietet. Zum Beispiel hat das 0,5X-Objektiv eine Arbeitsdistanz von 187 mm, oder das 0,32X-Objektiv eine Arbeitsdistanz von 296 mm. Sie könnten auch eine Z-LITE-Z186 Beleuchtung hinzufügen. Falls nötig, verwenden Sie ein Gegengewicht von 2,5 bis 4,5 kg an der Basis des Auslegers, um ein Kippen des Mikroskops zu verhindern.

 

ANWENDUNGSHINWEIS: Grundlagen der Mikroinjektions-Einrichtung

Wenn es darum geht, Mikoinjektionssysteme einzurichten, scheinen die Möglichkeiten endlos zu sein. Die untenstehenden Bilder geben einige allgemeine Vorschläge, wie Sie Ihr eigenes System aufbauen können. Bedenken Sie, dass viele Teile je nach Ihren Bedürfnissen oder Vorlieben austauschbar sind.

ANWENDUNGSHINWEIS: Isolierte Stimulation erklärt

Der Begriff Stimulation bezieht sich auf die Zuführung von Energie irgendeiner Art zu einem biologischen Gewebe, um eine beobachtbare Reaktion hervorzurufen.

Obwohl die bei der Stimulation verwendete Energie chemisch, thermisch, mechanisch oder elektrisch sein kann, konzentriert sich diese Darstellung auf die elektrische Stimulation. Die elektrische Stimulation biologischer Gewebe umfasst die Zuführung von Strom und Spannung an die Stimulationsstelle. Die beiden Größen stehen in Beziehung durch das Ohmsche Gesetz: