WPI-Blog

Optimierung von Barriere-Integritäts-Assays: Einführung der 24-Well SUMILON Begleitplatte

In herkömmlichen Workflows mit hängenden Einsätzen sind Medienwechsel ein langsamer, manueller Engpass. Forschende müssen jeden Einsatz – oft mit einer Pinzette – anheben, um den schmalen Spalt zwischen Einsatz und Vertiefung für Pipettieren oder Absaugen zu erreichen. Dieser arbeitsintensive Schritt verursacht nicht nur Zeitverzögerungen und Variabilität, sondern birgt auch das Risiko, empfindliche Zellschichten zu stören. Jetzt gestaltet WPI’s 24-Well Auto Exchange Zellkulturplatte diesen Workflow grundlegend neu, indem sie intelligente Vertiefungsgeometrie, integrierte Fluidik und robuste Einsatzbefestigung kombiniert, um vollautomatisierte, mehrkanalige TEER-Messungen am EVOM™ Auto zu ermöglichen – und jeden Schritt des Medienwechsels und der Probenahme zu vereinfachen, egal ob manuell oder robotergestützt. Sie ermöglicht nahtlosen Medienwechsel und mehrkanalige TEER-Messungen, ohne jemals einen Einsatz anheben zu müssen.

EVOM™ Auto GxP – Controller-Verbindungsfehler

Das EVOM™ GxP Compliance Modul ist eine 21 CFR Part 11-konforme Software, die die Anforderungen der FDA für elektronische Aufzeichnungen und Unterschriften erfüllt. Beim Betrieb des EVOM™ Auto mit dem GxP.

Wie man EVOM™ Auto GxP Elektroden chloridiert

Die EVOM™-Reihe von WPI für transepitheliale elektrische Widerstandsmessungen (TEER) verwendet Silber-Silberchlorid-Elektroden für die Messungen. Unsere neueste automatisierte TEER-Messeinheit, der EVOM™ Auto, ist mit einem optionalen GxP-Modul erhältlich, um die Einhaltung von 21 CFR Part 11 sicherzustellen. GxP steht für die Qualitätsrichtlinien, die sicherstellen, dass Standards eingehalten werden. Es wird für Protokolle wie Good Laboratory Practice, Good Pharmaceutical Practice, Good Clinical Practice, Good Manufacturing Practice und Good Research Practice verwendet.

Regelmäßige Wartung sorgt dafür, dass Ihre EVOM™ Auto GxP Elektroden optimal funktionieren. Gelegentlich müssen Sie Ihre Elektroden neu chloridieren. Folgen Sie einfach den Schritten in diesem Video.

So kalibrieren Sie die EVOM™ Auto GxP Elektroden

EVOM™ Auto mit GxP, betrieben von TotalLab, automatisiert Ihre TEER-Messungen mit der Sicherheit, dass Ihre Datensicherheit den FDA-Vorschriften 21 CFR Teil 11 entspricht.

Sie können den Elektrodenarray-Kopf mit dem internen Referenzwiderstand kalibrieren. Es erfolgt keine Bewegung des Motors.

So stellen Sie die EVOM™ Auto GxP Werkseinstellungen wieder her

Das EVOM™ Auto automatisierte TEER-Messsystem mit dem GxP-Modul, betrieben von TotalLab, stellt sicher, dass Ihre Datensicherheit den Anforderungen der FDA 21 CFR Part 11 entspricht. Wenn Sie benutzerdefinierte Parameter wie die Elektrodenplatzierung für ein Plattenprofil haben, können Sie alle Parameter auf die Werkseinstellungen zurücksetzen. Wir zeigen Ihnen, wie.

Wie man eine Projektdatei für EVOM™ Auto mit GXP erstellt

EVOM™ Auto automatisiert die TEER-Messung und ist jetzt mit einem GxP-Modul erhältlich, um die FDA-Vorschriften 21 CFR Teil 11 einzuhalten. Hier zeigen wir, wie man eine neue Projektdatei in der EVOM™ Auto GxP-Client-Software erstellt. Für die GxP-Software stehen zwei Optionen zur Verfügung, und das Erstellen eines Projekts funktioniert in beiden Versionen, Option A und Option B, auf die gleiche Weise. Allerdings können Sie nur mit der EVOM™ Auto GXP Option A-Software ein Projekt mit Dateien erstellen. Option B erlaubt nur das Speichern von EVOM™ Auto-Datendateien im Projektordner.

VIDEO: Was ist der Unterschied zwischen hängenden und stehenden Zellkultur-Inserts, die in EndOhm-Kammern verwendet werden?

WPI EndOhm-Kammern werden mit dem EVOM2-Messgerät von WPI für TEER (transepitheliale elektrische Widerstandsmessungen) verwendet. Hier zeigt Subhra den Unterschied zwischen hängenden Zellkultur-Inserts und stehenden Zellkultur-Inserts.

EVOM™ für bewährte TEER-Messung, keine Kompromisse akzeptieren

WPI hat TEER-Instrumente hergestellt, darunter das EVOM2, EVOM3, EVOM™ Manual und Millicell® ERS-2 (ein WPI OEM-Produkt), Seit über drei Jahrzehnten. Millipores Millicell® ERS 3.0 ist kürzlich verfügbar geworden und wird NICHT von WPI hergestellt, noch ist es validiert oder zertifiziert für eine genaue TEER-Messung. Von WPI hergestellte und validierte Produkte, wie das EVOM™ Manual, der bewährte Goldstandard für TEER-Messungen, gewährleisten die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit Ihrer Arbeit. Akzeptieren Sie keine Ersatzprodukte.

Was ist TEER?

Die transepitheliale/endotheliale elektrische Resistenz (TEER) misst qualitativ die Gesundheit von Zellmonolayern und bewertet quantitativ die Zellkonfluenz, indem der elektrische Widerstand über einen Zellmonolayer gemessen wird. Sie wird häufig verwendet, um die Integrität und Permeabilität von Zellbarrieren zu beurteilen, wie z. B. von epithelialen und endothelialen Zellschichten in Zellkulturplatten. Organ-on-Chip-Plattformen sind ein aufstrebender Markt für TEER-Anwendungen. Schauen wir uns an, was TEER ist und wie es verwendet wird.

Sterile Einweg-Spülstationen für EVOM™ Auto bieten Komfort

Der EVOM™ Auto automatisiert die Messung des TEER in epithelialen oder endothelialen Monolayern, die auf 24-Well- oder 96-Well-High-Throughput-Screening-(HTS)-Platten kultiviert werden, und nutzt dabei unsere innovative EVOM-Technologie. Er misst qualitativ die Gesundheit der Zellmonolayer und quantitativ die Zellkonfluenz, indem er einen Anstieg oder ein Plateau im Gewebewiderstand erreicht. Der Autosampler verfügt über eine 3-Well-Spülstation zum Reinigen und Stabilisieren der Elektroden. Jetzt sind sterile Einweg-Spülstationseinsätze für Ihre Bequemlichkeit erhältlich. Sie passen auf die 3-Well-Basis-Spülstation. Sie können die Einweg-Einsätze einfach zusammen mit den Lösungen entsorgen, wenn Sie die Platten wechseln. Dieses kurze Video zeigt, wie einfach sie zu verwenden sind.

Wie man Probleme bei der TEER-Messung behebt

Die Messung des transepithelialen/transe endotheliale elektrischen Widerstands (TEER) ist eine der am häufigsten verwendeten Methoden zur Bewertung der Zellgesundheit, wie z. B. Zellkonfluenz, Barriereintegrität oder Barrierefunktion von auf Multiwells gezüchteten Zellmonolayern. Die TEER-Messung mit dem Epithelial Voltohmmeter (EVOM) von WPI gilt als Goldstandard aufgrund ihrer zuverlässigen Messwerte und zahlreicher Literaturzitate mit verschiedenen Zelltypen. Das EVOM™ Manual und EVOM™ Auto sowie verschiedene Elektrodenoptionen (STX4, STX HTS High Throughput Screening, EndOhm-Kammern und Multielektroden-Array für EVOM™ Auto) ermöglichen es Forschern, Zellproben in 6, 12 und 24 entfernbaren Einsätzen sowie in 24- und 96-Well-HTS-Multiwellplattenformaten durchzuführen und zu analysieren. Die größten Herausforderungen, denen Forscher bei der Durchführung von Studien zur Erfassung der TEER-Messung begegnen können, umfassen:
·      Instabile Messwerte
·      Werte außerhalb des Messbereichs 
·      Inkonsistente Messwerte zwischen Probenreplikaten oder Chargen.
Berücksichtigen Sie die folgenden Faktoren, um Probleme bei der TEER-Messung zu überwinden und genaue sowie zuverlässige Messwerte zu erhalten. 

VIDEO: So richten Sie die EVOM™ Auto Interface Unit & den Autosampler ein

EVOM™ Auto ist das neueste Hochdurchsatz-Screening-TEER-Messsystem von WPI mit Messfähigkeit für 24- und 96-HTS-Transwell-Platten und bietet einfache Optionen zum Wechseln zwischen verschiedenen Platten. Ich zeige Ihnen, wie Sie es einrichten. Die Interface Unit ist der Controller, der die Kommunikation zwischen der EVOM™ Auto-Software und dem Autosampler herstellt. 

VIDEO: So installieren Sie die EVOM™ Auto Transwell-Platte

Das EVOM™ Auto High Throughput (HTS) Transepitheliale Elektrische Widerstandsmesssystem (TEER) mit 24- und 96-Transwell-Fähigkeit kann durch Verwendung passender Elektrodenarrays und Plattenpositionierer zwischen verschiedenen 24- und 96-HTS-Transwell-Platten wechseln. Hier zeigen wir, wie man eine Wellplatte installiert. 

VIDEO: So entfernen Sie das EVOM™ Auto-Elektroden-Array

Das EVOM™ Auto High Throughput (HTS) Transepitheliale Elektrische Widerstandsmesssystem (TEER) mit 24- und 96-Transwell-Fähigkeit verfügt über einen abnehmbaren Elektrodenarray-Kopf. Verschiedene Elektrodenarrays können mit demselben System verwendet werden, um eine Vielzahl von 24- und 96-Transwell-HTS-Platten zu analysieren. 

VIDEO: Wie man das EVOM Auto Elektroden-Array wechselt

EVOM™ Auto High Throughput (HTS) Transepitheliale Elektrische Widerstandsmessung (TEER) System mit 24- und 96-Transwell-Kapazität kann durch Verwendung passender Elektrodenarrays und Plattenpositionierer zwischen verschiedenen 24- und 96-HTS-Wellplatten wechseln. Hier zeigen wir, wie man nach der Verwendung einer 96-Transwell-Platte auf eine 24-Transwell-Platte umschaltet. 

Verschiedene Zelltypen, die im Labor kultiviert werden

Die Grundlage vieler Forschungslabore ist die Fähigkeit, In-vitro-Studien durchzuführen, die auf der Möglichkeit basieren, Zellen im Labor zu kultivieren. Zellkulturtechnologien haben sich erheblich weiterentwickelt, sodass Forscher erfolgreich viele Arten von Zelllinien kultivieren können.

Vorteile des EVOM™-Manuellen im Vergleich zum Millipore MilliCell ERS-2

Die EVOM™-Familie der TEER-Messgeräte wurde in über 16.000 begutachteten wissenschaftlichen Fachartikeln zitiert. Das EVOM™ Manual wurde entwickelt, um die Arbeitsabläufe effizienter zu gestalten, die Stabilität zu erhöhen und reproduzierbarere Messungen zu liefern als ältere Trans Epithelial Electrical Resistance (TEER)-Messgeräte, einschließlich des Millipore MilliCell® ERS-2, Millipore MilliCell ERS und World Precision Instruments EVOM2, EVOM und EVOMX. Hier ist eine kurze Zusammenfassung der Vorteile des EVOM™ Manual gegenüber dem MilliCell ERS-Voltohmmeter.

Sicherheitshinweise für die Verwendung von Laborspritzen

Spritzen haben aufgrund ihrer Fähigkeit, Flüssigkeiten genau zu messen und abzugeben, ein breites Anwendungsspektrum im Labor. Häufige Laboreinsätze umfassen das Übertragen präziser Flüssigkeitsvolumina von einem Behälter in einen anderen zum Verdünnen, Mischen, zur Reagenzienvorbereitung und Probenentnahme. Sie können für analytische Techniken wie Chromatographie (z. B. Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) oder Gaschromatographie) verwendet werden, Spektralphotometrie und Titration. Spritzen werden häufig für die präzise Dosierung und Abgabe von Reagenzien während chemischer Reaktionen und Syntheseprozesse oder in der Lebenswissenschaftsforschung zum Aspirieren von Medien, Hinzufügen von Wachstumsfaktoren oder Nährstoffen und Übertragen von Zellen verwendet. In der medizinischen und veterinärmedizinischen Forschung werden Spritzen für die Injektion oder Infusion von Medikamenten, Impfstoffen oder Kontrastmitteln in Tiermodelle oder Zellkulturen eingesetzt. Forscher können Laborspritzen verwenden, um Flüssigkeitsproben zu sammeln, insbesondere bei der Umweltüberwachung, Wasserqualitätsanalyse oder biologischen Probenentnahme. In mikrofluidischen Anwendungen und Lab-on-a-Chip-Systemen sind Spritzen ideal für die präzise Steuerung von Flüssigkeitsvolumen und Flussraten.

Tipps zur Auswahl von Elektroden für die TEER-Messung

Die EVOM™-Technologie von WPI ist eine bewährte, nicht-invasive Methode zur Überprüfung der Gewebeintegrität oder Barrierefunktion, Konfluenz und Gewebeigenschaften in 2-D- und 3-D-Formaten. Um die besten TEER-Messergebnisse mit der EVOM-Technologie von WPI zu erzielen, müssen Sie geeignete Elektroden basierend auf Ihrer Anwendung auswählen. 

Hier sind einige Kriterien, die Sie bei der Auswahl einer TEER-Messelektrode berücksichtigen sollten.

VIDEO: Warum sollten Sie Ihr EVOM2 aufrüsten?

Im Jahr 2022 hat die US-amerikanische Food and Drug Administration (FDA) 37 neue Medikamente zugelassen, davon 20 chemische Wirkstoffe und 17 Biologika. Im Jahr 2023 bleibt die Wirkstoffforschung stark, mit vielen neuen Fortschritten, die auf veränderte Rahmenbedingungen sowohl bei den Arten der entwickelten Medikamente als auch bei den neuen und innovativen Assays zurückzuführen sind, die zur präklinischen Bewertung von Medikamenten eingeführt werden. Die therapeutische Entwicklung konzentriert sich weiterhin stark auf Krankheiten, die große Bevölkerungsgruppen betreffen und für die es an wirksamen Behandlungen mangelt. Die am meisten erwarteten Markteinführungen von Medikamenten im Jahr 2023 werden voraussichtlich in den Bereichen Krebs, Alzheimer-Krankheit, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Colitis ulcerosa liegen.

Anwendungen der TEER-Messung in der Wirkstoffforschung

Im Jahr 2022 hat die US-amerikanische Food and Drug Administration (FDA) 37 neue Medikamente zugelassen, davon 20 chemische Wirkstoffe und 17 Biologika. Im Jahr 2023 bleibt die Wirkstoffforschung stark, mit vielen neuen Fortschritten, die auf veränderte Rahmenbedingungen sowohl bei den Arten der entwickelten Medikamente als auch bei den neuen und innovativen Assays zurückzuführen sind, die zur präklinischen Bewertung von Medikamenten eingeführt werden. Die therapeutische Entwicklung konzentriert sich weiterhin stark auf Krankheiten, die große Bevölkerungsgruppen betreffen und für die es an wirksamen Behandlungen mangelt. Die am meisten erwarteten Markteinführungen von Medikamenten im Jahr 2023 werden voraussichtlich in den Bereichen Krebs, Alzheimer-Krankheit, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Colitis ulcerosa liegen.

EVOM™ Auto: Software-Umschaltmodi fixieren

Wenn die EVOM™ Auto-Software während der Auswahl von Menüoptionen vom Widerstands- in den TEER-Modus wechselt, hier ein kurzer Tipp:

Seien Sie vorsichtig bei der Auswahl des Widerstandsmodus, tippen Sie nicht auf das Hintergrundfenster und klicken Sie nicht auf die seitlichen Pfeile.

Ein Tippen auf das Hintergrundfenster wechselt Sie in den TEER-Modus.

Tippen Sie stattdessen auf eine Option im vorderen quadratischen Fenster, um im Widerstandsmodus zu bleiben.

VIDEO: Auspacken des EVOM™ manuellen TEER-Messgeräts

EVOM™ Manual ist das neueste Instrument von WPI zur Messung des Trans Epithelialen Elektrischen Widerstands (TEER). Schauen wir uns an, was im System enthalten ist und wie einfach die Einrichtung ist.

Häufige Anwendungen für das EVOM-Handbuch

Das EVOM-System von WPI ist in der Forschungsgemeinschaft, sowohl in der Wissenschaft als auch in der Industrie, sehr beliebt und wird häufig zur Bewertung der Gesundheit von Säugetierzellen durch Messung des transepithelialen/transendothelialen elektrischen Widerstands (TEER oder TER) von Zellschichten verwendet. 

Das EVOM™ Manual basiert auf derselben EVOM™-Technologie wie ältere EVOM-Modelle (EVOMX, EVOM, EVOM2 und EVOM3). Es verfügt über erweiterte Funktionen, die Experimente erleichtern. Mit dem neuen Touchscreen-Display können Sie jetzt Daten als Microsoft® Excel-Dateien auf einem USB-Stick speichern. Entfernen Sie einfach den USB-Stick mit allen aufgezeichneten Daten aus dem EVOM™ Manual und stecken Sie ihn in einen Computer, um auf Ihre Daten zuzugreifen und sie zu visualisieren. So einfach, wie es klingt.