WPIのNanoFil:動物研究におけるガス密閉注入システム
WPIのNanoFil™は、小動物研究向けのガス密閉型マイクロリットル注入システムで、36ゲージまでの針に対応しています。超低デッドボリュームにより、オイルの逆流なしで直接サブマイクロリットル注入が可能で、特許取得済みのシリコーンガスケットにより、サンプルの損失を最小限に抑えた迅速な針の交換が可能です。GC/CEキャピラリーやさまざまなチューブに対応し、鈍針および独自の25°三面面取り針(26〜36G)を備え、組織損傷を軽減し耐久性を向上させます。このシステムは、眼科用途を含む精密な組織注入に広く使用されており、アプリケーションキットや査読済みの研究によってサポートされています。
アプリノート:補償圧力の精度比較
どの研究室でも、主要な機器と同じくらい重要なのが基本的な実験用品です。これらの必要な用品を信頼できる供給業者から選ぶことは、必要なときに高品質な実験用品を手に入れるのと同じくらい重要です。WPIは初期の創薬研究におけるパートナーでありたいと考えており、幅広い実験用品を在庫しており、多くは同営業日内に発送可能です。さまざまな実験用品をすぐに発送できることが、私たちを信頼できる研究パートナーにしています。ここでは、今後の実験に必要な人気の用品の一部をご紹介します。
アプリノート:EVOM™オートシステムの一般的な用途
EVOM™ Autoは、WPIの自動化されたトランスエピセリアルまたはトランスエンドセリアル電気抵抗(TEER)測定システムの最新世代です。EVOM™ ManualおよびREMSで実証された同じ技術に、新しいマルチ電極アレイ、ソフトウェアインターフェース、制御システムを組み合わせることで、TEER測定の精度を向上させながら、最速の作業フローソリューションを提供します:
アプリケーションノート:TEER技術が創薬のための最適化されたin vitroワークフローを実現
インビトロモデルでは、内皮バリアの一体性の変化を定量化するために、2つの一般的な方法が用いられています:経上皮/経内皮電気抵抗(TEER)とトレーサー化合物の透過性です。1 TEERは、電気伝導度の変化を定量化して細胞の密着度とバリアの一体性を測定する非侵襲的な方法です。トレーサー化合物の透過性は、分子量が定義された分子(例:4 kDa FITC-デキストランまたはFD4)を用いて細胞バリアのサイズ排除能力を測定します。1 EVOM™マニュアル(EVOM-MT-03-01)をEndOhm TEER電極および細胞培養用透過性サポートと共に使用し、このアプリケーションノートではサイトカイン処理後の内皮バリアの一体性を非侵襲的に評価する方法を説明し、血管損傷を誘発する可能性のある血管作動性化合物を特定する方法を提供します。トレーサー化合物の透過性研究はTEER評価と組み合わせて、処理による細胞間接合部および細胞間輸送への影響を解明します(図1)。
アプリノート:Celloger® Mini Plusを用いた有糸分裂の観察
「細胞周期」の過程では、細胞が成長し、遺伝的に同一な2つの娘細胞に分裂します。これは、細胞分裂とDNA複製を調節する複雑なシグナル伝達経路によって細胞の恒常性を維持しています1。一方で、がん細胞は細胞周期の制御を超えて無限に増殖・分裂するため、抗有糸分裂薬ががん細胞の異常増殖を抑制するために使用されます2。特に、ノコダゾールはがん治療の代表的な抗有糸分裂薬として知られており、細胞質および核分裂中の微小管動態を乱す特徴があります3,4。
アプリノート:Celloger® Mini Plusを用いたノコダゾール誘発細胞毒性の解析
細胞毒性とは、化学物質や物理的要因によって細胞に与えられる損傷の程度を指します。細胞毒性アッセイによる測定は、医薬品開発や生物学的研究において不可欠です。細胞は複雑なシグナル伝達経路を経て、アポトーシス、ネクローシス、ネクロプトーシスなどのさまざまな細胞死プロセスを引き起こします。しかし、多くの細胞毒性アッセイはエンドポイントで測定されるため、薬剤に対する細胞の動的な反応を研究することが難しいです。
アプリケーションノート:Celloger® Mini Plusを用いたマクロファージ細胞株の形態変化および貪食活性の観察
免疫機能を担う白血球は血管に沿って移動する懸濁細胞であるため、免疫学の研究では白血球由来のさまざまな懸濁細胞株がよく使用されます。接着細胞とは異なり、懸濁細胞を扱う場合、顕微鏡でプレートを位置決めする際のわずかな動きで細胞が浮いてしまいます。温度やCO2の不安定さによる問題に加え、従来の顕微鏡では細胞をリアルタイムで観察することは実際には不可能です。したがって、懸濁細胞を安定して観察するには、インキュベーター内で動作するCelloger® Mini Plusのようなライブセルイメージング装置が不可欠です1。さらに、Celloger® Mini Plusでは、システム内のカメラが移動して複数の位置で細胞の画像を撮影し、プレートを載せた可動ステージの代わりに細胞サンプルを安定した状態に保ちます。懸濁細胞をCelloger® Mini Plusと顕微鏡の両方で観察したところ、Celloger® Mini Plusでの撮影の方が安定しており、顕微鏡ではいくつかの細胞がピント外れになっていました(図1)。
ポンプ用低流量ダンピングキット
LabTrax24Tに取り付けられた校正済みのBLPR2を使用して結果を記録しました。これは、#14チューブの両方のポンプを50 RPMで22ゲージの針に流した際のグラフです。流量は50 RPMで約9 ml/分と推定されます。
UMP3/Micro4を用いたゼブラフィッシュのマイクロインジェクション
シカゴ大学の研究者が、10μl NanoFilマイクロシリンジを使って成魚のゼブラフィッシュに注射する様子をご覧ください。このシリンジはMicro4コントローラーとUltraMicroPump III(UMP3-1は1台のUMP3ポンプとMicro4コントローラーを含みます)で制御されています。
JoVEによるゼブラフィッシュのマイクロインジェクション技術
ピッツバーグ大学のキアラ・チアンチョロ・コセンティーノは、このJoVEビデオでゼブラフィッシュの幼生に対する静脈内マイクロインジェクションを用いて急性腎障害を研究する方法を説明しています。このビデオはJoVEでご覧いただけます。このビデオに登場するWPIの機器は以下の通りです:
ゼブラフィッシュの卵母細胞へのマイクロインジェクション
ミシガン大学の研究者たちは、WPIのPV820を使って、生後1日のゼブラフィッシュ胚の耳胞の内腔にモルホリノ溶液を注入しています。その後、エレクトロポレーションを用いて、発達中の内耳組織にmifおよびmif-likeモルホリノを導入しています。
アプリケーションノート:ステレオタクシックフレームと顕微鏡の使用方法
以下の画像のように、PZMIVステレオ顕微鏡をステレオタクシックフレームと一緒に使用できます。このセットアップはPZMIV-BSを示しています。Uフレームベースプレート(502045)が表示されていますが、ほとんどのステレオタクシックフレームはこの方法で使用可能です。作業スペースに十分な余裕があるステレオ顕微鏡の対物レンズを選んでください。例えば、0.5X対物レンズは作業距離が187mm、0.32X対物レンズは作業距離が296mmです。また、必要に応じてZ-LITE-Z186照明装置を追加することもできます。顕微鏡が倒れないように、ブームスタンドのベースに5~10ポンドのカウンターウェイトを使用してください。
アプリノート:マイクロインジェクションの基本設定
マイクロインジェクションシステムの設置に関しては、選択肢が非常に多くあります。以下の写真は、ご自身のシステムをどのように構築するかの大まかな提案を示しています。ニーズや好みに応じて多くの部品が交換可能であることを念頭に置いてください。
アプリケーションノート:絶縁刺激の解説
刺激という用語は、生物組織に何らかのエネルギーを与えて観察可能な反応を引き起こすことを指します。
刺激に使用されるエネルギーは化学的、熱的、機械的、または電気的なものがありますが、ここでは電気刺激に焦点を当てます。生物組織の電気刺激は、刺激部位に電流と電圧を供給することを含みます。この二つの量はオームの法則によって関連付けられています: