Blog de WPI

NanoFil de WPI: Sistema de Inyección Hermético para Investigación Animal

NanoFil™ de WPI es un sistema de inyección microlitro hermético para investigación en pequeños animales que soporta agujas de hasta calibre 36. Su volumen muerto ultra bajo permite inyecciones directas de submicrolitros sin relleno de aceite, y una junta de silicona patentada permite un cambio rápido de aguja con mínima pérdida de muestra. Compatible con capilares GC/CE y varios tubos, ofrece agujas romas y únicas biseladas a 25° con triple superficie (26–36G) que reducen el daño tisular y mejoran la durabilidad. El sistema se usa ampliamente para inyecciones precisas en tejidos, incluidas aplicaciones oftálmicas, y cuenta con kits de aplicación y estudios revisados por pares.

NOTA DE APLICACIÓN: Comparar la Precisión de la Presión de Compensación

En cualquier laboratorio, contar con suministros clave es casi tan importante como tener el equipo principal. Elegir un proveedor confiable de estos suministros necesarios es tan importante como disponer de suministros de laboratorio de calidad cuando los necesitas. WPI quiere ser tu socio en el descubrimiento temprano de fármacos, y tenemos en stock una amplia variedad de suministros de laboratorio, muchos de los cuales pueden enviarse el mismo día hábil. Contar con una variedad de suministros listos para enviar nos convierte en un socio de investigación confiable. Aquí tienes algunos de los suministros populares que mantenemos disponibles para satisfacer tus necesidades en tu próximo experimento

NOTA DE APLICACIÓN: Aplicaciones comunes del sistema automático EVOM™

EVOM™ Auto es la última generación del sistema automatizado de WPI para la medición de resistencia eléctrica transepitelial o transendotelial (TEER). Utilizando la misma tecnología comprobada en el EVOM™ Manual y REMS, combinada con una nueva matriz de múltiples electrodos, interfaz de software y sistema de control, ofrece nuestra solución de flujo de trabajo más rápida mientras mejora la precisión en la medición de TEER:

NOTA DE APLICACIÓN: La tecnología TEER permite un flujo de trabajo in vitro optimizado para el descubrimiento de fármacos

Los modelos in vitro han empleado dos métodos comunes para cuantificar los cambios en la integridad de la barrera endotelial: la resistencia eléctrica transepitelial/transendotelial (TEER) y la permeabilidad a compuestos trazadores.1 TEER es un método no invasivo que cuantifica los cambios en la conductancia eléctrica para medir la confluencia y la integridad de la barrera. La permeabilidad a compuestos trazadores utiliza moléculas de pesos moleculares definidos para medir la capacidad de exclusión por tamaño de las barreras celulares (por ejemplo, FITC-dextran de 4 kDa o FD4).1 Usando el Manual EVOM™ (EVOM-MT-03-01) con el electrodo EndOhm TEER y soportes permeables para cultivo celular, esta nota de aplicación describe cómo evaluar de forma no invasiva la integridad de la barrera endotelial tras el tratamiento con citoquinas y proporciona un método para identificar compuestos vasoactivos que tienen el potencial de inducir daño vascular. Los estudios de permeabilidad a compuestos trazadores se combinan con la evaluación TEER para dilucidar los impactos inducidos por el tratamiento tanto en las uniones intercelulares como en el transporte paracelular (Fig. 1).

NOTA DE APLICACIÓN: Observación de la mitosis usando Celloger® Mini Plus

En el proceso del ‘ciclo celular’, las células crecen y se dividen en dos células hijas genéticamente idénticas. Está regulado por una vía de señalización compleja que mantiene la homeostasis celular regulando la división celular y la duplicación del ADN1. Por otro lado, debido a que las células cancerosas crecen y se dividen indefinidamente fuera del control del ciclo celular, se utilizan fármacos anti-mitóticos para suprimir la proliferación anormal de células cancerosas2. En particular, se sabe que el Nocodazol es un fármaco anti-mitótico representativo para el tratamiento del cáncer, y tiene la característica de alterar la dinámica de los microtúbulos durante la división citoplasmática y nuclear3,4.

NOTA DE APLICACIÓN: Análisis de la Citotoxicidad Inducida por Nocodazol Usando Celloger® Mini Plus

La citotoxicidad se refiere al grado de daño a las células causado por sustancias químicas o factores físicos. Medirla mediante un ensayo de citotoxicidad es esencial para el desarrollo de fármacos y la investigación biológica. Las células atraviesan vías de señalización complejas que provocan diversos procesos de muerte celular como apoptosis, necrosis y necroptosis. Sin embargo, la mayoría de los ensayos de citotoxicidad se miden al final del experimento, lo que dificulta estudiar la respuesta dinámica de las células a los fármacos.

 

NOTA DE APLICACIÓN: Uso de Celloger® Mini Plus para Observar Cambios Morfológicos y la Actividad Fagocítica en la Línea Celular de Macrófagos

Como los glóbulos blancos responsables de la función inmunitaria son células en suspensión que viajan por los vasos sanguíneos, los estudios de inmunología suelen utilizar diversas líneas celulares en suspensión originadas de glóbulos blancos. Trabajar con células en suspensión, a diferencia de las células adherentes, implica que un ligero movimiento de la placa al ubicarla en el microscopio hace que las células floten. Además de los problemas causados por la inestabilidad de la temperatura y el CO2, de hecho no es posible usar un microscopio tradicional para monitorear las células en tiempo real. Por lo tanto, para monitorear de manera estable las células en suspensión, es esencial un dispositivo de imagen celular en vivo como Celloger® Mini Plus que funcione dentro de una incubadora1. Además, con Celloger® Mini Plus, la cámara dentro del sistema se mueve para capturar imágenes de las células en múltiples posiciones para mantener la muestra celular en un estado estable en lugar de tener un escenario móvil con una placa encima. Cuando se monitorearon las células en suspensión tanto con Celloger® Mini Plus como con un microscopio, la imagen obtenida con Celloger® Mini Plus fue más estable en comparación con el uso del microscopio, en el que varias células estaban fuera de foco (Figura 1).

Kit de Amortiguación de Bajo Flujo para una Bomba

Se utilizó un BLPR2 calibrado en el LabTrax24T para registrar los resultados. Este es un gráfico de ambas bombas en la tubería #14 a 50 RPM hacia una aguja calibre 22. Se estima que el flujo es de 9 ml/min a 50 RPM.

Uso de un DAM50 para grabaciones EEG en roedores

Un amplificador de bajo ruido como el DAM50 es una excelente opción para la grabación de EEG en roedores. Los amplificadores de WPI fueron diseñados para el investigador biomédico. Mientras que 20-30μV de ruido es común en bioamplificadores, los amplificadores de la serie DAM de WPI generan 0.4μV RMS (valor cuadrático medio) a 0.1-100Hz. (Eso equivale a aproximadamente 2μV pico a pico). Esta configuración muestra una forma en que se podrían realizar tales grabaciones. El electrodo RC1 funciona bien para ratas, y el EP1 es más adecuado para la aplicación craneal en ratones.

Microinyección en pez cebra usando el UMP3/Micro4

Observe cómo los investigadores de la Universidad de Chicago inyectan peces cebra adultos usando una microsiringa NanoFil de 10μl controlada por un controlador Micro4 y una UltraMicroPump III (UMP3-1 incluye una bomba UMP3 y un controlador Micro4)

Técnica de Microinyección en Pez Cebra de JoVE

Chiara Cianciolo Cosentino, de la Universidad de Pittsburgh, describe cómo utiliza microinyecciones intravenosas microinyecciones en larvas de pez cebra para estudiar la lesión renal aguda en este video de JoVE. Puedes ver este video en JoVE. El equipo de WPI mostrado en este video incluye:

Instrumentos WPI presentados en video de JoVE sobre polinización cruzada

Los instrumentos quirúrgicos WPI fueron presentados recientemente en un video de JoVE que demuestra un nuevo método para la polinización cruzada de pastos.

Microinyección en otocitos de pez cebra

Investigadores de la Universidad de Michigan están utilizando el PV820 de WPI para inyectar una solución de morfolino en el lumen de la vesícula ótica de embriones de pez cebra de 1 día. Luego, usan electroporación para introducir morfolinos mif y mif-like en los tejidos en desarrollo del oído interno.

Jeringa Nanofil de Llenado Frontal

En este video, Mike Pizza demuestra cómo llenar por el frente una jeringa Nanofil usando MicroFil.

NOTA DE APLICACIÓN: Uso de un microscopio con un marco estereotáxico

Puede usar el microscopio estereoscópico PZMIV con un marco estereotáxico como se muestra en la imagen a continuación. Esta configuración muestra un PZMIV-BS. Se muestra la Placa base en forma de U (502045), pero la mayoría de los marcos estereotáxicos pueden usarse de esta manera. Elija un objetivo para microscopio estereoscópico que le permita suficiente espacio para trabajar. Por ejemplo, el objetivo 0.5X tiene una distancia de trabajo de 187 mm, o el objetivo 0.32X tiene una distancia de trabajo de 296 mm. También podría añadir un iluminador Z-LITE-Z186. Si es necesario, use un contrapeso de 5 a 10 libras en la base del soporte de brazo para evitar que el microscopio se incline.

 

NOTA DE APLICACIÓN: Configuración básica de microinyección

Cuando se trata de configurar sistemas de microinyección, las opciones parecen infinitas. Las imágenes a continuación ofrecen algunas sugerencias generales sobre cómo podrías montar tu propio sistema. Ten en cuenta que muchas piezas son intercambiables según tus necesidades o preferencias.

NOTA DE APLICACIÓN: Explicación de la Estimulación Aislada

El término estimulación se refiere a la entrega de algún tipo de energía a un tejido biológico para provocar una respuesta observable.

Aunque la energía utilizada en la estimulación puede ser química, térmica, mecánica o eléctrica, esta discusión se centrará en la estimulación eléctrica. La estimulación eléctrica de tejidos biológicos implica la entrega de corriente y voltaje al sitio de estimulación. Las dos cantidades están relacionadas por la ley de Ohm: