TECNOLOGÍA EVOM™
IMPULSANDO 40 AÑOS DE
MEDICIÓN DE TEER
Has confiado en nuestra línea de medición TEER durante casi 40 años como el innovador y fabricante líder de medidores EVOM™, REMS y Millicell ERS2. Aprende más sobre el estándar de oro en tecnología EVOM™ que ha sido citado en más de 10,500 artículos de investigación publicados.
Resistencia Eléctrica Transepithelial/Endotelial (TEER) mide cualitativamente la salud del monocapa celular y evalúa cuantitativamente la confluencia celular midiendo la resistencia eléctrica a través de un monocapa celular. Se utiliza comúnmente para evaluar la integridad y permeabilidad de las barreras celulares, como las capas de células epiteliales y endoteliales cultivadas en insertos de membrana permeable para cultivo celular o placas transwell. TEER puede usarse como parámetro de análisis de calidad (QA) y control de calidad (QC) para estudios celulares, como la terapia celular. La medición de TEER, al ser muy simple y rápida, la convierte en una herramienta adecuada para el cribado en el descubrimiento de fármacos. El uso de la medición TEER para verificar la formación de barreras y la función tisular ha ido creciendo en los campos emergentes de modelos tisulares 3D in vitro, organoides y Organ-on-Chips. ¿Qué es TEER?.
La TEER se mide típicamente utilizando una sonda con dos pares de electrodos colocados a cada lado de la monocapa celular, un par en el compartimento apical (sobre las células) y el otro par en el compartimento basolateral (debajo de las células). Un instrumento electrónico, como el EVOM™ Auto automatizado o el EVOM™ Manual portátil, aplica una corriente eléctrica fija de muy baja magnitud (≤10 µA) con polaridad alternante a través de los electrodos y mide el cambio resultante en el voltaje. El valor de resistencia es calculado por el instrumento usando la Ley de Ohm (R = V/I), donde R es la resistencia, V es el voltaje e I es la corriente. La TEER es la resistencia multiplicada por el área de crecimiento celular, y los valores de TEER se presentan con las unidades de ohmios por centímetro cuadrado (Ω-cm²).
Dado que la tecnología EVOM™ utiliza una corriente eléctrica de pequeña magnitud con polaridad alternante, la medición de TEER no provoca ninguna carga en la muestra ni tiene un efecto fisiológico significativo. Además, la medición de TEER no requiere ningún marcado químico o biológico. TEER puede medirse en soluciones biológicas conductoras, como medios de cultivo celular o tampones. Por lo tanto, la medición de TEER mediante EVOM™ es una evaluación sin marcadores y no invasiva de muestras celulares. Las mismas muestras pueden utilizarse para otros estudios biológicos, como inmunocitoquímica y western blots. Los estudios de medición de TEER suelen complementarse con estudios adicionales de permeabilidad con moléculas trazadoras como lucifer yellow y FITC-dextran para verificar el cambio en la función de la barrera epitelial y endotelial.
La resistencia eléctrica (es decir, TEER) de una capa celular es la presentación inversa de la conductancia eléctrica a través de la capa celular. Un valor alto de TEER en la capa celular indica un monocapa celular intacta y sugiere una permeabilidad baja o restringida de iones y moléculas (es decir, baja conductancia). De manera similar, una disminución en el valor de TEER sugiere una función de barrera comprometida e indica una mayor permeabilidad. Los estudios de permeabilidad tisular requieren una capa celular confluyente, y la medición de TEER se utiliza generalmente para confirmar la formación de un monocapa confluyente.
Inicialmente, 24 horas después de la siembra celular en el transwell, los valores de TEER suelen ser bajos, porque la corriente puede pasar fácilmente entre las células. Con el tiempo, las células se multiplican y comienzan a cubrir los espacios. Finalmente, se forma una monocapa celular confluente. En ese momento, la membrana permeable está completamente cubierta de células y no permite el paso fácil de la corriente eléctrica. Esto resulta en un valor alto de TEER.
Los valores de TEER de monocapas celulares confluyentes pueden variar según el tipo de célula. Las monocapas de ciertos tipos celulares (por ejemplo, tipo celular A), que normalmente muestran valores bajos de TEER, generalmente tienen uniones estrechas relativamente permeables. Las monocapas de otros tipos celulares (por ejemplo, tipo celular B) muestran valores altos de TEER, y se sabe que estos tipos celulares tienen uniones estrechas. Se sabe que los iones y las moléculas atraviesan con mayor facilidad las capas celulares permeables en comparación con las capas celulares más compactas. La presencia de más canales iónicos transcelulares en las células puede permitir además un flujo más fácil de iones o corriente eléctrica a través de la vía transcelular, lo que puede reducir aún más los valores de TEER.
El tipo de célula A permite que pasen mayores cantidades de corriente e iones entre las células y produce un valor bajo de TEER. Con sus uniones más estrechas, los monocapas de células tipo B mostrarán un valor de TEER más alto. Aunque ambos monocapas están confluyentes, los valores de resistencia TEER pueden ser marcadamente diferentes según la naturaleza de las propias células.
TEER es un valor normalizado de resistencia por 1 centímetro cuadrado de área unitaria. Para calcular el TEER, multiplique la resistencia medida por el área de superficie que se indica a continuación.
Por ejemplo, un inserto de 6.6 mm mide 1707 Ω, el TEER es 1707 Ω * 0.331 o 505 Ω.
• Placa de 6 pocillos (inserciones de 24 mm) 4.53 cm2
• Placa de 12 pocillos (inserciones de 12 mm) 1.13 cm2
• Placa de 24 pocillos (inserciones de 6.5 mm) 0.3316 cm2
• Placa de 96 pocillos (inserciones de 4.3 mm) 0.145 cm2
Sistema compacto automatizado para la medición de TEER con control y registro de datos por cable e inalámbrico en placas de 96 pocillos.
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PLATAFORMAS DE MEDICIÓN
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Sistema compacto automatizado para medición TEER con control y registro de datos por cable e inalámbrico en placa de 24 pocillos.
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Medidor portátil para medición manual de TEER y registro de datos.
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Sistema automatizado de medición TEER con módulo de cumplimiento GxP que cuenta con software conforme a 21 CFR Parte 11.
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TEER permite a los investigadores evaluar la integridad y funcionalidad de las barreras endoteliales y epiteliales, como las barreras gastrointestinal, respiratoria y hematoencefálica. Al medir eléctricamente la resistencia a través de estas barreras, TEER proporciona datos cuantitativos sobre la hermeticidad y permeabilidad de estas barreras. Esta información es crucial para comprender la absorción de fármacos, los mecanismos de transporte y los efectos de diversos compuestos en la función de la barrera.
Automatización y optimización de un modelo 3D de la barrera hematoencefálica
Los organoides son modelos tridimensionales y en miniatura de órganos y tejidos que se cultivan in vitro a partir de células madre u otras células progenitoras con la capacidad de diferenciarse en un tipo celular presente en un órgano o tejido determinado. Imitan de cerca la estructura y función de los órganos humanos, lo que los convierte en herramientas valiosas para estudiar el desarrollo humano, la modelización de enfermedades, la evaluación de fármacos, la biología del desarrollo, la medicina de precisión, los mecanismos de enfermedad y la fisiopatología.
TEER se utiliza ampliamente en estudios de absorción de fármacos para evaluar la permeabilidad de los medicamentos a través de las barreras tisulares. Al medir TEER antes y después de la exposición al fármaco, los investigadores pueden determinar el impacto de los medicamentos en la integridad de la barrera y evaluar su potencial de absorción en un tejido determinado. Esta información ayuda en la formulación, optimización y predicción de la biodisponibilidad del fármaco.
Mediciones automatizadas de TEER para un cribado rápido de perfiles de toxicidad gastrointestinal
TEER es una herramienta valiosa en la ingeniería de tejidos y los estudios de cultivo celular. Ayuda a los investigadores a evaluar la formación y funcionalidad de las capas de células epiteliales, imitando las condiciones in vivo. Las mediciones de TEER pueden guiar la optimización de las condiciones de cultivo, el diseño de andamios y los protocolos de diferenciación celular. Además, TEER puede usarse para monitorear la función de barrera de los constructos de tejidos diseñados a lo largo del tiempo, proporcionando información sobre su viabilidad y funcionalidad a largo plazo.
TEER es una herramienta invaluable para el modelado de enfermedades, especialmente para estudiar trastornos que afectan los tejidos de barreras endoteliales y epiteliales. Los investigadores pueden usar TEER para investigar el impacto de enfermedades, patógenos o toxinas en la integridad y función de la barrera. Esto permite una mejor comprensión de los mecanismos de la enfermedad, la identificación de posibles objetivos terapéuticos y la evaluación de la eficacia de medicamentos en modelos de enfermedad.
TEER sirve como una medida de control de calidad en ensayos celulares que involucran células endoteliales y epiteliales. Garantiza la consistencia y fiabilidad de los resultados experimentales al confirmar la formación de uniones estrechas y barreras epiteliales funcionales. Las mediciones de TEER pueden ayudar a identificar posibles problemas con las condiciones del cultivo celular, la calidad celular o los protocolos experimentales, asegurando la validez de los hallazgos de la investigación. Además, TEER se está implementando ahora como una medida cuantitativa de control de calidad para ciertas terapias celulares.
Las mediciones de TEER se utilizan a menudo para establecer los parámetros base de un sistema OoC antes de un experimento. Al monitorear regularmente los valores de TEER en varias etapas de la producción, los fabricantes pueden evaluar la consistencia y reproducibilidad de las propiedades de la barrera celular en múltiples dispositivos OoC. El TEER puede medir la porosidad de una membrana dentro de un sistema OoC y también puede determinar cuándo las células sembradas han formado una barrera madura y están listas para las pruebas. A medida que las aplicaciones OoC se amplían y estandarizan, la importancia de implementar el control de calidad en el proceso de fabricación se vuelve aún más crítica, y el TEER es una forma sencilla y rentable de asegurar que los sistemas OoC se fabriquen correctamente y cumplan con las especificaciones.