WPIブログ

一酸化窒素（NO）は重要なシグナル分子であり、中枢神経系（CNS）、心血管系、消化管、免疫系、腎臓系など多くの生理機能において重要な役割を果たすことが知られています。^1-5 しかし、非常に反応性が高いため、NOの検出と定量は非常に困難です。^6,7 それには感度が高く、NOに選択的で、校正が簡単なセンサーが必要です。

マイクロインジェクションは、ガラスのマイクロピペットや金属製のマイクロインジェクション針を使って遺伝物質を生きた細胞に移す技術です。ガラスのマイクロピペットは先端径が0.1～10µmのさまざまなサイズがあります。DNAやRNAは細胞の核に直接注入されます。マイクロインジェクションは大型のカエルの卵、哺乳類の細胞、哺乳類の胚、植物や組織で成功裏に使われています。マイクロインジェクションは高価で、時間がかかり、熟練した技術者が必要ですが、新しい技術によりさらに信頼性が高く、再現性があり、手頃な価格になりつつあります。

すべての化学試薬は最低でもACSグレード、できればHPLCグレードのものを使用してください。本手順では腐食性および可燃性の試薬を使用します。必要な安全対策については、製造元のMSDSを参照してください。

黒色コーティングされた外科用器具は、ステンレス製のものより見た目が美しいだけでなく、以下のようないくつかの利点もあります。

明るい照明の下で外科用器具を使う場合でも、顕微鏡を使用する場合でも、反射しない黒色の外科用器具は明確な利点があります。チタンコーティングは切れ味を硬化・保護するだけでなく、作業中の器具表面からの反射を最小限に抑えます。これらは耐腐食性があり、生体適合性も備えています。

MICRO-ePORE™ ピンポイント細胞貫通装置は、多様な化合物や生体分子を卵母細胞や着床前段階の哺乳類胚にマイクロインジェクションで導入するための、シンプルで多用途なシステムです。特許出願中のFlutter Electrode テクノロジーは、膜を裂いたり損傷したりすることなく、小さくて清潔で正確な膜貫通を支援します。その結果、胚の生存率が大幅に向上します。

新しいWPIのMICRO-ePORE™ ピンポイントセルペネトレーターは、卵母細胞や着床前段階の哺乳類胚に多様な化合物や生体分子を効率的にマイクロインジェクションするためのシンプルで多用途なシステムです。特許出願中のFlutter Electrode Technologyにより、膜を破ったり損傷させることなく、小さく清潔で正確な膜貫通が可能です。ここでゲイブがシステムをセットアップし、すべてのコンポーネントを接続します。

細胞内の二重または差動測定のために、WPIのDuo773は独立した負容量制御と内蔵のアクティブフィルタリングを備えており、アーティファクトのない差動測定のために時間定数を正確に調整できます。イオン特異的マイクロ電極やKCl充填電極からの信号を監視するための10¹⁵Ωおよび10¹¹Ωの2つのプローブヘッドステージが付属しています。ジムが新しいDuo773の安全な開封方法と正しいセットアップ方法を紹介します。

金属マイクロ電極に関するよくある質問（FAQ）をまとめました。質問をクリックすると回答が表示されます。

滅菌する前に外科用器具を、血液や組織、その他の有機物を取り除くためにしっかりと洗浄しておくことをおすすめします。汚れた物質が乾燥したり器具に焼き付いたりすると、微生物の不活性化を妨げ、滅菌プロセスに支障をきたす可能性があります。

WPIのEndOhmチャンバーは、WPIのEVOM2メーターと組み合わせてTEER（経上皮電気抵抗）測定に使用されます。各EndOhmチャンバーには、2つのチャンバー電極間の隙間を校正するための「スペーサー」ディスクが付属しています。一定の隙間を保つことで、信頼性の高い測定が可能になります。ここではSubhraがチャンバーの校正方法を紹介します。

サンパウロ州保健局に関連する機関であり、世界最大級の生物医学研究センターの一つであるブタンタン研究所は、12月に第4回ゼブラフィッシュ飼育・管理大学公開講座を開催し、そこでWPIのゼブラフィッシュマイクロインジェクションシステムを展示しました。

経上皮電気抵抗（TEER）は、経上皮抵抗（TER）とも呼ばれ、細胞の健康状態を監視するために使用されます。TEERは、細胞内経路（すなわち、個々の細胞による抵抗）と細胞間経路（すなわち、細胞接合部の形成による抵抗）の測定値で構成されています。TEERは一般的に細胞のコンフルエンス（密着度）を監視するために用いられます。TEER値は、細胞単層の透過性の変化を示し、脳微小血管内皮細胞や肺胞、腎臓、腸の上皮細胞などの細胞の単層バリア機能を示します。高いTEER値は一般的に、より密着した細胞単層や細胞接合部を反映します（Lewis 1996、Matter and Balda 2003、Denker and Sabath 2011）。WPIのTEER測定システムの主な利点のいくつかを以下に示します。TEER値（電気生理学的解析）は、他の解析方法と組み合わせて生物学的現象をより深く理解することができます。例えば、TEER値の低下は単層の透過性の増加を示し、これはトレーサー分子（フルオレセイン-デキストラン）を用いたアッセイでさらに確認できます。

WPIブラジルのジョナス・デ・ジェズスが、ゼブラフィッシュネットワークのマスコットの名前を募集するコンテストの優勝者を訪問しました。ジョナスは優勝者にゼブラフィッシュ研究用の手術キットを贈呈しました。

WPIのリキッド波長キャピラリーセル（LWCC）の実用的な用途は想像力次第であり、ファイバーオプティック分光法コミュニティではロングパスレングスフローセルとも呼ばれています。この吸光度測定用のファイバーオプティックサンプリングアクセサリーは、光路長の延長と少量サンプルの組み合わせにより、CDOMなどの水質分析に最適です。

迅速に最小限の侵襲で小さなサンプルを採取する必要がある場合、バイオプシーパンチは簡単な選択肢です。バイオプシーパンチは、細長い鉛筆のような形状の手持ち式器具です。軽量で、中空の円形ステンレス製切断チップが付いています。

手術用の外科用器具を選ぶ際には、以下のいくつかの重要なポイントを考慮してください

• どの手術を行うのか？発表されている研究論文では、類似の手術に他の研究者が使用した器具が示されていることが多いです。特定の手術に適した外科用器具は、その技術の結果に影響を与えます。
• 対象のサイズはどのくらいか？200～300gのラット（約22～25cmの長さ）に最適な器具が、約15gの新生マウス（約1～2.5cmの長さ）には最適でない場合があります。
• 器具はどのくらいの頻度で使用しますか？1日に100回以上切開を行う場合は、チタン製のはさみやタングステンカーバイド製のインサートが入ったはさみを検討する価値があります。これらは長く鋭さを保ちます。

このビデオでは、>Nanoliter2010のガスケットを交換する方法をご紹介します。

注意：NANOLITER2010はNANOLITER2020に置き換えられました。

細胞生理学における蛍光プローブの使用は、近年、細胞機能の解析に欠かせないツールとして重要性を増しています。蛍光の物理的原理は、電子状態図（いわゆるジャブロンスキー図、図1参照）によって示されており、蛍光色素／指示薬における蛍光信号を生成する3段階のプロセス（励起 - 励起状態の寿命 - 蛍光放出）が簡潔に説明されています。

光の吸収は、物質の原子の電子が取り込む光子のエネルギーに関連しています。電磁エネルギーは吸収物質の内部エネルギーに変換されます。物質の吸光度は、入射光のうちどれだけが反射や屈折されるのではなく吸収されるかを定量化します。多くの波長での吸光度を正確に測定することで、吸収分光法によって物質の同定が可能になります。この方法では、試料の一方から光を照射し、試料からあらゆる方向に出る光の強度を測定します（図1参照）。吸収の例としては、紫外可視（UV-Vis）分光法や赤外（IR）分光法があります。