Blog WPI

Optimisation des tests d'intégrité des barrières : présentation de la plaque compagnon SUMILON à 24 puits

Dans les flux de travail traditionnels avec insert suspendu, les changements de milieu sont un goulot d’étranglement lent et manuel. Les chercheurs doivent soulever chaque insert—souvent avec une pince—pour accéder à l’étroite fente entre l’insert et le puits afin de pipeter ou d’aspirer. Cette étape laborieuse ajoute non seulement du temps et de la variabilité, mais risque aussi de perturber les couches cellulaires délicates. Désormais, la plaque de culture cellulaire à échange automatique 24 puits de WPI révolutionne ce flux de travail en combinant une géométrie de puits intelligente, une fluidique intégrée et un positionnement robuste des inserts pour permettre une mesure TEER multicanal entièrement automatisée sur l’EVOM™ Auto—et pour simplifier chaque étape de l’échange de milieu et de l’échantillonnage, qu’ils soient réalisés manuellement ou par robot. Elle permet un échange de milieu fluide et des mesures TEER multicanal sans jamais soulever un insert.

EVOM™ Auto GxP - Erreurs de connexion du contrôleur

Le module de conformité EVOM™ GxP est un logiciel conforme à la 21 CFR Partie 11 qui répond aux exigences de la FDA pour les dossiers et signatures électroniques. Lors de l'utilisation de l'EVOM™ Auto avec le GxP.

Comment chlorurer les électrodes EVOM™ Auto GxP

La gamme EVOM™ de WPI, composée de systèmes de mesure de la résistance électrique transepitheliale (TEER), utilise des électrodes argent-chlorure d'argent pour effectuer les mesures. Notre nouvelle unité automatisée de mesure TEER, l'EVOM™ Auto, est disponible avec un module GxP optionnel pour garantir la conformité au 21 CFR Partie 11. GxP représente les directives qualité en place pour assurer le respect des normes. Il est utilisé pour des protocoles tels que les Bonnes Pratiques de Laboratoire, les Bonnes Pratiques Pharmaceutiques, les Bonnes Pratiques Cliniques, les Bonnes Pratiques de Fabrication et les Bonnes Pratiques de Recherche.

Un entretien régulier permet à vos électrodes EVOM™ Auto GxP de fonctionner de manière optimale. Périodiquement, vous devrez re-chlorurer vos électrodes. Il vous suffit de suivre les étapes montrées dans cette vidéo.

Comment calibrer les électrodes EVOM™ Auto GxP

EVOM™ Auto avec GxP propulsé par TotalLab automatise vos mesures TEER avec la certitude que la sécurité de vos données est conforme aux réglementations 21 CFR Partie 11 de la FDA.

Vous pouvez calibrer la tête du réseau d'électrodes en utilisant la résistance de référence interne. Aucun mouvement du moteur n'a lieu.

Comment restaurer les paramètres d'usine par défaut EVOM™ Auto GxP

Le système automatisé de mesure TEER EVOM™ Auto avec le module GxP alimenté par TotalLab garantit que la sécurité de vos données est conforme aux exigences FDA 21 CFR Partie 11. Si vous avez des paramètres personnalisés comme le placement des électrodes pour un profil de plaque, vous pouvez réinitialiser tous les paramètres à leurs réglages d'usine par défaut. Nous vous montrerons comment.

Comment créer un fichier de projet pour EVOM™ Auto avec GXP

EVOM™ Auto automatise la mesure TEER, et il est désormais disponible avec un module GxP pour répondre aux réglementations de conformité 21 CFR Part 11 de la FDA. Ici, nous verrons comment créer un nouveau fichier de projet dans le logiciel client EVOM™ Auto GxP. Deux options sont disponibles pour le logiciel GxP, et la création d’un projet fonctionne de la même manière dans les versions Option A et Option B. Cependant, vous ne pouvez créer un projet qu’avec des fichiers dans le logiciel EVOM™ Auto GXP Option A. L’Option B permet uniquement de stocker les fichiers de données EVOM™ Auto dans le dossier du projet.

VIDÉO : Quelle est la différence entre les inserts de culture cellulaire suspendus et debout utilisés dans les chambres EndOhm

Les chambres WPI EndOhm sont utilisées avec le compteur EVOM2 de WPI pour effectuer des mesures TEER (résistance électrique transepitheliale). Ici, Subhra montre la différence entre les inserts de culture cellulaire suspendus et les inserts de culture cellulaire debout.

EVOM™ pour une mesure TEER éprouvée, n’acceptez aucun substitut

WPI a fabriqué des instruments TEER, y compris l’EVOM2, l’EVOM3, l’EVOM™ Manuel, et le Millicell® ERS-2 (un produit OEM WPI), depuis plus de trois décennies. Le Millicell® ERS 3.0 de Millipore est récemment devenu disponible et n’est PAS fabriqué par WPI, ni validé ou certifié pour être précis dans la mesure TEER. Les produits fabriqués et validés par WPI, comme l’EVOM™ Manuel, la référence éprouvée pour la mesure TEER, garantissent la précision et la reproductibilité de votre travail. N’acceptez aucun substitut.

Qu'est-ce que le TEER ?

La résistance électrique transepitheliale/endothéliale (TEER) mesure qualitativement la santé du monocouche cellulaire et évalue quantitativement la confluence cellulaire en mesurant la résistance électrique à travers une monocouche de cellules. Elle est couramment utilisée pour évaluer l'intégrité et la perméabilité des barrières cellulaires, telles que les couches de cellules épithéliales et endothéliales dans les plaques de culture cellulaire. Les plateformes Organ-on-Chip représentent un marché émergent pour les applications TEER. Voyons ce qu'est la TEER et comment elle est utilisée.

Stations de rinçage jetables stériles pour EVOM™ Auto offrant commodité

L'EVOM™ Auto automatise les mesures de TEER dans des monocouches épithéliales ou endothéliales cultivées sur des plaques de criblage à haut débit (HTS) de 24 ou 96 puits en utilisant notre technologie innovante EVOM, mesurant qualitativement la santé de la monocouche cellulaire et quantitativement la confluence cellulaire en atteignant une augmentation ou un plateau de la résistance tissulaire. L'automate d'échantillonnage dispose d'une station de rinçage à 3 puits pour nettoyer et stabiliser les électrodes. Désormais, des inserts de station de rinçage jetables stériles sont disponibles pour votre confort. Ils s'adaptent sur la station de rinçage de base à 3 puits. Vous pouvez simplement jeter les inserts jetables avec les solutions lorsque vous changez de plaques. Cette courte vidéo montre à quel point ils sont faciles à utiliser.

Comment résoudre les problèmes de mesure TEER

La mesure de la résistance électrique transepitheliale/transendothéliale (TEER) est l'une des pratiques les plus utilisées pour évaluer la santé cellulaire, telle que la confluence cellulaire, l'intégrité de la barrière ou la fonction de barrière des monocouches cellulaires cultivées sur des multi-puits. La mesure TEER utilisant l'Epithelial Voltohmmeter (EVOM) de WPI est considérée comme la référence en raison de ses mesures fiables et de nombreuses citations dans la littérature utilisant divers types cellulaires. Le manuel EVOM™ et l'EVOM™ Auto, ainsi que différents choix d'électrodes (STX4, STX HTS pour le criblage à haut débit, chambres EndOhm, et réseau multiélectrodes pour EVOM™ Auto) permettent aux chercheurs de réaliser et d'analyser des échantillons cellulaires dans des inserts amovibles de 6, 12 et 24 puits ainsi que dans des plaques multi-puits HTS de formats 24 et 96. Les principaux défis que les chercheurs peuvent rencontrer lors de la réalisation d'études pour capturer la mesure TEER incluent :
·      Lectures instables
·      Valeurs hors plage 
·      Mesures incohérentes entre les réplicats ou lots d'échantillons.
Prenez en compte les facteurs suivants pour surmonter tout problème de mesure TEER et obtenir des mesures précises et fiables. 

VIDÉO : Comment configurer l'unité d'interface automatique EVOM™ et l'automate d'échantillonnage

EVOM™ Auto est le dernier système de mesure TEER à haut débit de WPI, capable de mesurer des plaques transwell HTS de 24 et 96 puits, et il offre des options faciles pour passer d’un type de plaque à un autre. Je vais vous montrer comment le configurer. L’Interface Unit est le contrôleur qui établit la communication entre le logiciel EVOM™ Auto et l’automate d’échantillonnage. 

VIDÉO : Comment installer la plaque Transwell automatique EVOM™

Le système EVOM™ de mesure automatique à haut débit (HTS) de la résistance électrique transepitheliale (TEER) avec capacité 24 et 96 transwell peut basculer entre différentes plaques HTS 24 et 96 transwell en utilisant des réseaux d'électrodes correspondants et un positionneur de plaque. Ici, nous montrons comment installer une plaque de puits. 

VIDÉO : Comment retirer la matrice d'électrodes automatique EVOM™

Le système EVOM™ Auto de mesure de la résistance électrique transepitheliale (TEER) à haut débit (HTS) avec capacité pour 24 et 96 transwells dispose d'une tête de matrice d'électrodes amovible. Différentes matrices d'électrodes peuvent être utilisées avec le même système pour analyser une variété de plaques HTS de 24 et 96 transwells. 

VIDÉO : Comment changer la matrice d'électrodes automatique EVOM

Le système EVOM™ de mesure de la résistance électrique transepitheliale (TEER) à haut débit automatique (HTS) avec capacité 24 et 96 transwells peut basculer entre différentes plaques HTS 24 et 96 puits en utilisant des réseaux d'électrodes et des positionneurs de plaques correspondants. Ici, nous montrons comment passer à une plaque 24 transwells après avoir utilisé une plaque 96 transwells. 

Différents types de cellules cultivées en laboratoire

La base de nombreux laboratoires de recherche est la capacité à réaliser des études in vitro, qui reposent sur la capacité à cultiver des cellules en laboratoire. Les technologies de culture cellulaire ont considérablement progressé, permettant aux chercheurs de cultiver avec succès de nombreux types de lignées cellulaires.

Avantages du manuel EVOM™ par rapport au Millipore MilliCell ERS-2

La famille EVOM™ de compteurs de mesure TEER a été citée dans plus de 16 000 articles scientifiques évalués par des pairs. Le manuel EVOM™ a été conçu pour améliorer l'efficacité du flux de travail, augmenter la stabilité et fournir des mesures plus reproductibles que les anciens compteurs de résistance électrique transépithéliale (TEER), y compris le Millipore MilliCell® ERS-2, le Millipore MilliCell ERS et le World Precision Instruments EVOM2, EVOM et EVOMX. Voici un résumé rapide des avantages du manuel EVOM™ par rapport au voltmètre MilliCell ERS.

Conseils de sécurité pour l'utilisation des seringues de laboratoire

Les seringues ont une large gamme d'applications en laboratoire grâce à leur capacité à mesurer et distribuer avec précision des liquides. Les usages courants en laboratoire incluent le transfert de volumes précis d'échantillons liquides d'un récipient à un autre pour la dilution, le mélange, la préparation de réactifs et l'extraction d'échantillons. Vous pouvez les utiliser pour des techniques analytiques, comme la chromatographie (telle que la chromatographie liquide à haute performance (CLHP) ou la chromatographie en phase gazeuse), spectrophotométrie et titrage. Les seringues sont souvent utilisées pour le dosage précis et la distribution de réactifs lors de réactions chimiques et de processus de synthèse, ou en recherche en sciences de la vie pour aspirer des milieux, ajouter des facteurs de croissance ou des nutriments, et transférer des cellules. En recherche médicale et vétérinaire, les seringues sont utilisées pour l'injection ou la perfusion de médicaments, vaccins ou agents de contraste dans des modèles animaux ou des cultures cellulaires. Les chercheurs peuvent utiliser des seringues de laboratoire pour collecter des échantillons liquides, notamment dans la surveillance environnementale, l'analyse de la qualité de l'eau ou la collecte d'échantillons biologiques. Dans les applications microfluidiques et les systèmes lab-on-a-chip, les seringues sont parfaites pour le contrôle précis des volumes de fluide et des débits.

Conseils pour choisir des électrodes pour la mesure TEER

La technologie EVOM™ de WPI est une méthode bien établie et non invasive pour vérifier l'intégrité tissulaire ou la fonction de barrière, la confluence et les propriétés des tissus en formats 2D et 3D. Pour obtenir les meilleurs résultats de mesure TEER avec la technologie EVOM de WPI, vous devez choisir des électrodes adaptées à votre application. 

Voici quelques critères à considérer lors de la sélection d'une électrode de mesure TEER.

VIDÉO : Pourquoi améliorer votre EVOM2 ?

En 2022, la Food and Drug Administration (FDA) des États-Unis a approuvé 37 nouveaux médicaments, dont 20 étaient des entités chimiques et 17 des produits biologiques. En 2023, la découverte de médicaments reste dynamique avec de nombreuses avancées résultant des évolutions dans les types de médicaments développés ainsi que des nouveaux essais innovants lancés pour évaluer les médicaments en phase préclinique. Le développement thérapeutique reste fortement axé sur les maladies touchant de larges populations pour lesquelles il existe un manque de traitements efficaces, les lancements de médicaments les plus attendus en 2023 étant prévus dans les domaines du cancer, de la maladie d’Alzheimer, des maladies cardiovasculaires et de la colite ulcéreuse.

Applications de la mesure TEER dans la découverte de médicaments

En 2022, la Food and Drug Administration (FDA) des États-Unis a approuvé 37 nouveaux médicaments, dont 20 étaient des entités chimiques et 17 des produits biologiques. En 2023, la découverte de médicaments reste dynamique avec de nombreuses avancées résultant des évolutions dans les types de médicaments développés ainsi que des nouveaux essais innovants lancés pour évaluer les médicaments en phase préclinique. Le développement thérapeutique reste fortement axé sur les maladies touchant de larges populations pour lesquelles il existe un manque de traitements efficaces, les lancements de médicaments les plus attendus en 2023 étant prévus dans les domaines du cancer, de la maladie d’Alzheimer, des maladies cardiovasculaires et de la colite ulcéreuse.

EVOM™ Auto : Corriger les modes de commutation logicielle

Si le logiciel EVOM™ Auto passe du mode Résistance au mode TEER pendant que vous sélectionnez des options de menu, voici un conseil rapide :

Faites attention lors de la sélection du mode Résistance, ne touchez pas la fenêtre d'arrière-plan et ne cliquez pas sur les flèches latérales.

Toucher la fenêtre d'arrière-plan vous basculera en mode TEER.

Au lieu de cela, touchez une option sur la fenêtre carrée au premier plan pour rester en mode Résistance.

VIDÉO : Déballage du compteur manuel EVOM™ TEER

EVOM™ Manual est le tout nouvel instrument de WPI pour mesurer la Résistance Électrique Trans-Épithéliale (TEER). Voyons ce qui est inclus avec le système et à quel point il est facile à configurer.

Applications courantes pour le manuel EVOM

Le système EVOM de WPI est populaire dans la communauté de recherche, tant dans le milieu universitaire que dans l'industrie, et il est couramment utilisé pour l'évaluation de la santé cellulaire des mammifères en mesurant la résistance électrique transepitheliale/transendothéliale (TEER ou TER) des couches cellulaires. 

Le manuel EVOM™ est alimenté par la même technologie EVOM™ que les anciens modèles EVOM (EVOMX, EVOM, EVOM2 et EVOM3). Il dispose de fonctionnalités avancées pour réaliser des expériences plus facilement. Avec le nouvel écran tactile, vous pouvez désormais stocker les données sous forme de fichiers Microsoft® Excel sur une clé USB. Il suffit de retirer la clé USB contenant toutes vos données enregistrées du manuel EVOM™ et de la brancher sur un ordinateur pour accéder à vos données et les tracer. C'est aussi simple que cela.