WPIブログ

EVOMマニュアルの一般的な用途

WPIのEVOMシステムは、学術界や産業界の研究コミュニティで広く支持されており、細胞層の透過上皮/透過内皮電気抵抗(TEERまたはTER)を測定することで哺乳類細胞の健康評価に一般的に使用されています。 

EVOM™ Manualは、旧モデルのEVOMX、EVOM、EVOM2、EVOM3と同じEVOM™技術を搭載しています。実験をより簡単に行うための高度な機能を備えています。新しいタッチスクリーンディスプレイにより、データをMicrosoft® ExcelファイルとしてUSBフラッシュドライブに保存できるようになりました。EVOM™ Manualから記録したすべてのデータが入ったフラッシュドライブを取り外し、パソコンに接続すれば、データの閲覧やグラフ作成が簡単に行えます。そのままの簡単さです。

動画:EVOM™マニュアルのメイン表示ページの理解

WPIのEVOM™マニュアルは、安定した再現性のある経皮的電気抵抗(TEER)測定を提供するゴールドスタンダードです。EVOM™マニュアルは、細胞単層の健康状態を定性的に測定し、革新的なEVOM™技術を用いて検出される組織抵抗の増加または安定を判断することで、細胞のコンフルエンスを定量的に測定します。メインの表示ウィンドウには多くの情報が表示されます。ここで簡単に概要をご紹介します。便利な参照用にインフォグラフィックをダウンロードできます。

動画:どのEVOM™電極があなたの用途に最適ですか?

WPIのEVOM™マニュアルは、安定した再現性のある経上皮電気抵抗(TEER)測定を提供するゴールドスタンダードです。EVOM™マニュアルは最新のTEERメーターであり、細胞単層の健康状態を定性的に測定し、革新的なEVOM™技術を用いて検出される組織抵抗の増加または安定を判断することで細胞のコンフルエンスを定量的に測定します。WPIの最先端EVOM™技術は、実験測定中にリアルタイムで貴重なフィードバックを提供します。

動画:STX4電極ブレードの交換方法

新しいSTX4電極はEVOM3と連携し、ブレードは交換可能です。EVOM3は細胞培養プレートでTEER(TER)測定を行うために使用されます。ここではブレードの交換方法を簡単にご紹介します。

オルガンオンチップ、TEER、新薬開発

医薬品の創薬および開発のプロセスは非常に遅く、費用がかかります。米国FDAなどの規制当局は、薬物の安全性と有効性を推定するために、吸収、分布、代謝、排泄(ADME)をテストする動物モデルを必要としています。 

動画:研究者によるEVOM3のレビュー

EVOMは、培養細胞層や生体膜の電気的特性を測定するための特殊なボルトメーターです。培養細胞層を横断して測定するために最も一般的に使用されている市販システムです。私たちはTEER(TER)- 上皮間電気抵抗を測定しています。EVOM3は、これらの膜や培養細胞を横断する抵抗または電圧を拡大して測定することを可能にします。

動画:EVOMラインの好きなところ

EVOMは、培養中の細胞層や生体膜の電気的特性を測定するための特殊なボルトメーターです。新しいEVOM3の気に入っている点をいくつかご紹介します。

動画:研究者がEVOM3とウッシングチャンバーを比較

ウッシングチャンバーは、切除された上皮組織のバリア機能を調べる際に使用されます。同様の測定は、細胞培養ウェルでコンフルエントに成長した上皮組織に対して使用されるEVOMシリーズのTEER測定器を用いてウェルプレート上で行うことも可能です。EVOMの測定は定性的なものに限られますが、EVOM3を使うことで処理能力は大幅に向上します。EVOMは携帯可能で、ウッシングチャンバーよりもはるかに経済的です。ここでベン・デュバンスキー博士がEVOMとウッシングチャンバーの違いについて説明します。

動画:TEER測定用新型EVOM3を愛する7つの理由

新しいEVOM3 上皮ボルト/オームメーターは、従来の経上皮電気抵抗(TEER)メーターよりも作業効率が向上し、安定性が増し、より再現性の高い測定が可能です。新しいEVOM3のここが好きになる7つのポイントをご紹介します。






肺のインビトロモデルにおける経上皮/経内皮電気抵抗(TEER)測定の重要性

上皮細胞および内皮細胞は、選択的透過性のようなバリア機能で知られています。肺組織は上皮細胞層で構成されており、隣接する内皮層とともに肺と血液間の酸素と二酸化炭素の交換を可能にしています。現在、生物医学研究コミュニティの主要な焦点は、この新型コロナウイルス(2019-nCoV)や類似のウイルスによる感染の詳細を理解することにあります。この新しいウイルスは、肺の異物を除去する通常の清掃能力を妨げる可能性があり、肺の選択的透過性やバリア機能が著しく損なわれることがあります。炎症カスケードが開始されると、この悪影響は持続する可能性があります。

新しいEndOhmチャンバーを愛する7つの理由

EndOhm チャンバーは、上皮および内皮細胞培養の正確なTEER測定を行うために設計されています。この設計では、上下の電極が一定の間隔に保たれ、サンプル(細胞培養インサート)が中央に位置するようになっています。この設計により、電極の位置や間隔に関連するばらつきが最小限に抑えられ、EndOhm チャンバーはより正確で再現性のある結果を生み出すことが可能です。WPIは最近、EndOhm チャンバーのいくつかの改良を行いました。

WPIエンドオームチャンバーのギャップ調整方法

WPIのEndOhmチャンバーは、WPIのEVOM2メーターと組み合わせてTEER(経上皮電気抵抗)測定に使用されます。各EndOhmチャンバーには、2つのチャンバー電極間の隙間を校正するための「スペーサー」ディスクが付属しています。一定の隙間を保つことで、信頼性の高い測定が可能になります。ここではSubhraがチャンバーの校正方法を紹介します。

WPIエンドオームチャンバー内の再生電極

WPI EndOhm チャンバーは、WPI の EVOM2 メーターと共にTEER(経上皮電気抵抗)測定に使用されます。頻繁に使用すると、バックグラウンド抵抗の測定値が上昇し始めることがあります。電極にタンパク質、糖類、生物学的物質の蓄積があるため、表面を再研磨する必要があるかもしれません。ここでは、Subhra が EndOhm チャンバーの洗浄と再研磨の方法を実演しています。

セルカルチャーインサートに対応したエンドオームチャンバーの選び方

WPIのEndOhmチャンバーは、WPIのEVOM2メーターと共に使用され、TEER(経上皮電気抵抗)を細胞培養インサートで測定します。6ウェルプレート、12ウェルプレート、24ウェルプレート用の3つのチャンバーサイズが用意されています。ここではSubhraが、使用している細胞培養インサートに合ったEndOhmチャンバーの選び方を説明します。

よくある質問:ENDOHMの不安定な抵抗値のトラブルシューティング

よくある質問(FAQ)の一つに、EndOhmを使ったTEER測定があります。もしENDOHMの抵抗値が安定しない場合は、トラブルシューティングが必要かもしれません。

長寿命のためのエンドームメンテナンス

EndOhm シリーズのチャンバーは、WPIのEVOM2 抵抗計または Millicell ERS と組み合わせて使用することで、培養カップ内の内皮組織の抵抗を再現性高く正確に測定するよう設計されています。EndOhm で得られる抵抗値は、よく設計されたUssing チャンバーで得られる値と一致します。

培養中の上皮細胞の成長を手動で観察する

培養細胞の単層を使った実験の準備はできていますか?単層がコンフルエンスに達していない場合、単層に穴や隙間があり、有効な実験データの収集を妨げることがあります。コンフルエンスに達すると、単層全体の電気抵抗がピークに達し、その後安定します。EVOM2メーターは、この用途のために特別に設計されています。

EVOM2は、小規模な細胞培養のバッチで手動TEER測定を行う際に理想的なメーターであり、高スループットシステムを必要としない場合に最適です。

TEER測定に関するよくある質問

こちらは、TEER測定に関するよくある質問(FAQ)です。使用機器はEVOM2です。

EVOM2でのTEER測定の記録

EVOM2は、経上皮電気抵抗(TEER)測定を行うためのクラシックなハンドヘルド機器です。REMSシステムは、ロボットとデータ記録機能を追加し、自動化されたTEER測定を可能にします。ロボットがない場合でも、REMSシステムのデータ記録機能を利用したいことがあるかもしれません。少し工夫すれば、それが可能です。ここでは、標準のEVOM2にデータ記録機能を追加する方法をご紹介します。

STX100 電極によるTEER測定

高速スクリーニング(HTS)プロトコルの開発により、より迅速な創薬が可能となり、複数の主要な細胞培養インサートメーカーから新しいセルカルチャーフィルタープレートのラインが導入されました。これらのHTSプレートは通常、24または96個の個別の細胞培養インサートが「結合」されて一つのプレートとして扱われ、ロボット装置で操作可能です。これらの開発に対応して、WPIはHTSプレートを用いたTEER測定用の自動REMSシステムと手動電極、STX100を開発しました。

個別内皮細胞培養カップにおけるTEER測定

WPIのEndOhmチャンバーは、個別カップ内の内皮細胞培養のTEER測定用に設計されています。EndOhmチャンバーの特徴:

EVOM²と互換性あり 
1〜2Ωの精度向上
6mm、12mm、24mmカップおよびCostar Snapwellカップに対応
EtO、アルコール、または殺菌剤で滅菌済み

TEERリサーチ:WPIの手動およびロボットシステム

経上皮電気抵抗(TEER)測定は、in vitroでの上皮組織培養の成長を評価・監視するための最も便利で信頼性が高く、非破壊的な方法です。細胞単層のコンフルエンスは、TEERの急激な増加によって迅速に判定されます。1980年代半ばにWPIによって初めて導入されたTEER測定技術は、その後改良され、手動および自動のTEER関連機器の幅広いラインナップに拡大されました。

EVOM² - 24ウェルおよび96ウェルプレートでの上皮細胞の手動TEER測定
REMS AutoSampler - ハイスループットスクリーニング(HTS)用自動化システム

EVOMとボルトメーター:違いを明確にする

ボルトオームメーターは、膜に未知の電流の一定電圧をかけて細胞を電気的に損傷させる可能性があり、また電極に化学的不均衡を残すこともあります。WPIは2種類のボルトオームメーターで実験を行いました:

EVOM2メーターのテスト方法

World Precision Instruments(WPI)のEVOM2は、経上皮電気抵抗(TEER)測定に使用されます。初めて使用する前とその後も定期的にEVOM2の動作確認を行うことをお勧めします。メーターや電極の不具合が疑われる場合は、まずメーターの動作確認を行ってください。このビデオではメーターのテスト方法を紹介しています。