Blog de WPI

En los flujos de trabajo tradicionales con insertos colgantes, el cambio de medios es un cuello de botella lento y manual. Los investigadores deben levantar cada inserto, a menudo con pinzas, para acceder al estrecho espacio entre el inserto y el pocillo para pipetear o aspirar. Este paso laborioso no solo añade tiempo y variabilidad, sino que también corre el riesgo de alterar capas celulares delicadas. Ahora, la Placa de Cultivo Celular de Intercambio Automático para 24 Pocillos de WPI redefine fundamentalmente este flujo de trabajo al combinar una geometría inteligente de los pocillos, fluidos integrados y un asiento robusto para los insertos, permitiendo una medición TEER multicanal totalmente automatizada en el EVOM™ Auto, y simplificando cada paso del intercambio de medios y muestreo, ya sea manual o robótico. Permite un intercambio de medios fluido y mediciones TEER multicanal sin necesidad de levantar nunca un inserto.

El módulo de cumplimiento EVOM™ GxP es un software conforme a 21 CFR Parte 11 que cumple con los requisitos de la FDA para registros y firmas electrónicas. Al ejecutar el EVOM™ Auto con el GxP.

La línea EVOM™ de WPI de sistemas de medición de resistencia eléctrica transepitelial (TEER) utiliza electrodos de plata-cloruro de plata para realizar las mediciones. Nuestra unidad más nueva de medición TEER automatizada, el EVOM™ Auto, está disponible con un módulo GxP opcional para garantizar el cumplimiento de 21 CFR Parte 11. GxP representa las directrices de calidad establecidas para asegurar que se cumplan los estándares. Se utiliza para protocolos como Buenas Prácticas de Laboratorio, Buenas Prácticas Farmacéuticas, Buenas Prácticas Clínicas, Buenas Prácticas de Manufactura y Buenas Prácticas de Investigación.

El mantenimiento regular mantiene sus electrodos EVOM™ Auto GxP funcionando de manera óptima. Periódicamente, necesitará re-clorurar sus electrodos. Simplemente siga los pasos mostrados en este video.

EVOM™ Auto con GxP impulsado por TotalLab automatiza sus mediciones de TEER con la confianza de que la seguridad de sus datos cumple con las regulaciones 21 CFR Parte 11 de la FDA.

Puede calibrar la cabeza del conjunto de electrodos usando la resistencia de referencia interna. No ocurre ningún movimiento del motor.

El sistema automatizado de medición TEER EVOM™ Auto con el módulo GxP impulsado por TotalLab garantiza que la seguridad de sus datos cumpla con los requisitos de la FDA 21 CFR Parte 11. Si tiene parámetros personalizados como la colocación de electrodos para un perfil de placa, puede restablecer todos los parámetros a su configuración predeterminada de fábrica. Le mostraremos cómo.

EVOM™ Auto automatiza la medición TEER y ahora está disponible con un módulo GxP para cumplir con las regulaciones de cumplimiento 21 CFR Parte 11 de la FDA. Aquí veremos cómo crear un nuevo archivo de proyecto en el software cliente EVOM™ Auto GxP. Hay dos opciones disponibles para el software GxP, y crear un proyecto funciona de la misma manera en las versiones Opción A y Opción B. Sin embargo, solo puede crear un proyecto con archivos en el software EVOM™ Auto GXP Opción A. La Opción B solo permite almacenar archivos de datos EVOM™ Auto en la carpeta del proyecto.

Las cámaras WPI EndOhm se utilizan con el medidor EVOM2 de WPI para realizar mediciones TEER (resistencia eléctrica transepitelial). Aquí Subhra muestra la diferencia entre insertos de cultivo celular colgantes y insertos de cultivo celular en posición vertical.

WPI ha fabricado instrumentación para TEER, incluyendo el EVOM2, EVOM3, EVOM™ Manual y Millicell® ERS-2 (un producto OEM de WPI), Durante más de tres décadas. El Millicell® ERS 3.0 de Millipore se lanzó recientemente y NO es fabricado por WPI, ni validado o certificado para ser preciso en la medición de TEER. Los productos fabricados y validados por WPI, como el EVOM™ Manual, el estándar de oro comprobado para la medición de TEER, garantizan la precisión y reproducibilidad de su trabajo. No acepte sustitutos.

La Resistencia Eléctrica Transepithelial/Endotelial (TEER) mide cualitativamente la salud del monocapa celular y evalúa cuantitativamente la confluencia celular midiendo la resistencia eléctrica a través de un monocapa celular. Se utiliza comúnmente para evaluar la integridad y permeabilidad de las barreras celulares, como las capas de células epiteliales y endoteliales en placas de cultivo celular. Las plataformas Organ-on-Chip son un mercado emergente para las aplicaciones de TEER. Veamos qué es TEER y cómo se utiliza.

El EVOM™ Auto automatiza las mediciones de TEER en monocapas epiteliales o endoteliales cultivadas en placas de cribado de alto rendimiento (HTS) de 24 o 96 pocillos utilizando nuestra innovadora tecnología EVOM, midiendo cualitativamente la salud de la monocapa celular y cuantitativamente la confluencia celular al alcanzar un aumento o una meseta en la resistencia tisular. El autosampler cuenta con una estación de enjuague de 3 pocillos para limpiar y estabilizar los electrodos. Ahora, están disponibles insertos desechables estériles para la estación de enjuague para su conveniencia. Se ajustan sobre la base de la estación de enjuague de 3 pocillos. Simplemente puede desechar los insertos desechables con las soluciones cuando cambie las placas. Este video corto muestra lo fácil que son de usar.

La medición de la resistencia eléctrica transepitelial/transendotelial (TEER) es una de las prácticas más utilizadas para evaluar la salud celular, como la confluencia celular, la integridad de la barrera o la función de barrera de monocapas celulares cultivadas en multiwell. La medición de TEER usando el Voltohmmeter Epitelial (EVOM) de WPI se considera el estándar de oro debido a sus mediciones confiables y numerosas citas en la literatura utilizando varios tipos de células. El Manual EVOM™ y EVOM™ Auto junto con diferentes opciones de electrodos (STX4, STX HTS para cribado de alto rendimiento, cámaras EndOhm y matriz multielectrodo para EVOM™ Auto) permiten a los investigadores realizar y analizar muestras celulares en insertos removibles de 6, 12 y 24 y formatos de placas multiwell HTS de 24 y 96 pocillos. Los principales desafíos que los investigadores pueden encontrar al realizar estudios para capturar la medición de TEER incluyen:
·      Lecturas inestables
·      Valores fuera de rango 
·      Mediciones inconsistentes entre réplicas o lotes de muestras.
Considere los siguientes factores para superar cualquier problema en la medición de TEER y obtener mediciones precisas y confiables. 

EVOM™ Auto es el último sistema de medición TEER de alto rendimiento de WPI con capacidad para placas transwell HTS de 24 y 96 pocillos, y ofrece opciones fáciles para cambiar entre diferentes placas. Te mostraré cómo configurarlo. La Unidad de Interfaz es el controlador que establece la comunicación entre el software EVOM™ Auto y el autosampler. 

El sistema EVOM™ Auto de Medición de Resistencia Eléctrica Transepitelial (TEER) de Alto Rendimiento (HTS) con capacidad para 24 y 96 transwells puede cambiar entre diferentes placas HTS de 24 y 96 transwells usando matrices de electrodos y posicionadores de placas compatibles. Aquí demostramos cómo instalar una placa de pocillos. 

El sistema EVOM™ Auto de Medición de Resistencia Eléctrica Transepitelial (TEER) de Alto Rendimiento (HTS) con capacidad para 24 y 96 transwells tiene una cabeza de matriz de electrodos removible. Diferentes matrices de electrodos pueden usarse con el mismo sistema para analizar una variedad de placas HTS de 24 y 96 transwells. 

El sistema EVOM™ de medición de resistencia eléctrica transepitelial (TEER) de alto rendimiento automático (HTS) con capacidad para 24 y 96 transwells puede cambiar entre diferentes placas HTS de 24 y 96 pocillos utilizando matrices de electrodos y posicionadores de placas compatibles. Aquí demostramos cómo cambiar a una placa de 24 transwells después de usar una placa de 96 transwells. 

La base de muchos laboratorios de investigación es la capacidad de realizar estudios in vitro, que dependen de la habilidad para cultivar células en el laboratorio. Las tecnologías de cultivo celular han avanzado significativamente, permitiendo a los investigadores cultivar con éxito muchos tipos de líneas celulares.

La familia EVOM™ de medidores de resistencia eléctrica trans-epitelial (TEER) ha sido citada en más de 16,000 artículos científicos revisados por pares. El EVOM™ Manual ha sido diseñado para mejorar la eficiencia del flujo de trabajo, aumentar la estabilidad y proporcionar mediciones más repetibles que los medidores TEER más antiguos, incluyendo el Millipore MilliCell® ERS-2, Millipore MilliCell ERS y World Precision Instruments EVOM2, EVOM y EVOMX. Aquí hay un resumen rápido de los beneficios del EVOM™ Manual frente al voltímetro MilliCell ERS.

Las jeringas tienen una amplia gama de aplicaciones en un entorno de laboratorio debido a su capacidad para medir y dispensar líquidos con precisión. Los usos comunes en laboratorio incluyen transferir volúmenes precisos de muestras líquidas de un recipiente a otro para dilución, mezcla, preparación de reactivos y extracción de muestras. Puede que las esté utilizando para técnicas analíticas, como cromatografía (como cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) o cromatografía de gases), espectrofotometría y titulación. Las jeringas se utilizan a menudo para la dosificación precisa y la administración de reactivos durante reacciones químicas y procesos de síntesis, o en la investigación en ciencias de la vida para aspirar medios, añadir factores de crecimiento o nutrientes, y transferir células. En la investigación médica y veterinaria, las jeringas se usan para la inyección o infusión de medicamentos, vacunas o agentes de contraste en modelos animales o cultivos celulares. Los investigadores pueden usar jeringas de laboratorio para recolectar muestras líquidas, especialmente en el monitoreo ambiental, análisis de calidad del agua o recolección de muestras biológicas. En aplicaciones microfluídicas y sistemas lab-on-a-chip, las jeringas son perfectas para el control preciso de volúmenes de fluido y tasas de flujo.

La tecnología EVOM™ de WPI es un método bien establecido y no invasivo para verificar la integridad del tejido o la función de barrera, la confluencia y las propiedades del tejido en formatos 2-D y 3-D. Para obtener los mejores resultados en la medición de TEER con la tecnología EVOM de WPI, debe seleccionar electrodos adecuados según su aplicación. 

Aquí hay algunos criterios a considerar al seleccionar un electrodo para la medición de TEER.

En 2022, la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) aprobó 37 nuevos medicamentos, de los cuales 20 fueron entidades químicas y 17 fueron biológicos. En 2023, el descubrimiento de medicamentos sigue siendo fuerte con muchos avances nuevos como resultado de los cambios en los tipos de medicamentos que se están desarrollando y los nuevos e innovadores ensayos que se están lanzando para evaluar medicamentos en la fase preclínica. El desarrollo terapéutico sigue estando muy enfocado en enfermedades que afectan a grandes poblaciones para las cuales no existen tratamientos efectivos, y se espera que los lanzamientos de medicamentos más anticipados de 2023 sean en áreas de cáncer, enfermedad de Alzheimer, enfermedades cardiovasculares y colitis ulcerosa.

En 2022, la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) aprobó 37 nuevos medicamentos, de los cuales 20 fueron entidades químicas y 17 fueron biológicos. En 2023, el descubrimiento de fármacos sigue siendo fuerte con muchos avances nuevos como resultado de los cambios en los tipos de medicamentos que se están desarrollando y los nuevos e innovadores ensayos que se están lanzando para evaluar los medicamentos de forma preclínica. El desarrollo terapéutico sigue estando muy enfocado en enfermedades que afectan a grandes poblaciones para las cuales no existen tratamientos efectivos, y se espera que los lanzamientos de medicamentos más anticipados de 2023 sean en áreas de cáncer, enfermedad de Alzheimer, enfermedades cardiovasculares y colitis ulcerosa.

Si el software EVOM™ Auto cambia de modo Resistencia a TEER mientras selecciona opciones del menú, aquí tiene un consejo rápido:

Tenga cuidado al seleccionar el modo Resistencia, no toque la ventana de fondo ni haga clic en las flechas laterales.

Tocar la ventana de fondo cambiará al modo TEER.

En su lugar, toque una opción en la ventana cuadrada del frente para permanecer en modo Resistencia.

EVOM™ Manual es el instrumento más reciente de WPI para medir la Resistencia Eléctrica Transepitelial (TEER). Veamos qué incluye el sistema y lo fácil que es configurarlo.

El sistema EVOM de WPI es popular en la comunidad investigadora, tanto en el ámbito académico como en la industria, y se utiliza comúnmente para la evaluación de la salud celular de mamíferos midiendo la resistencia eléctrica transepitelial/transendotelial (TEER o TER) de capas celulares. 

El EVOM™ Manual funciona con la misma tecnología EVOM™ que los modelos anteriores EVOM (EVOMX, EVOM, EVOM2 y EVOM3). Cuenta con funciones avanzadas para realizar experimentos de manera más sencilla. Con la nueva pantalla táctil, ahora puedes almacenar datos como archivos de Microsoft® Excel en una unidad flash USB. Simplemente retira la unidad flash con todos tus datos registrados del EVOM™ Manual y conéctala a una computadora para acceder y graficar tus datos. Es tan simple como suena.