ACTUALITÉS : Alternatives aux tests sur les animaux, avenir de la découverte de médicaments

Comme les globules blancs responsables de la fonction immunitaire sont des cellules en suspension qui circulent dans les vaisseaux sanguins, les études en immunologie utilisent souvent diverses lignées cellulaires en suspension provenant de globules blancs. Contrairement aux cellules adhérentes, le moindre mouvement d'une plaque lors de sa localisation au microscope fait flotter les cellules en suspension. En plus des problèmes causés par l'instabilité de la température et du CO2, il est en fait impossible d'utiliser un microscope traditionnel pour surveiller les cellules en temps réel. Par conséquent, pour surveiller de manière stable les cellules en suspension, un dispositif d'imagerie cellulaire en direct tel que Celloger® Mini Plus, qui fonctionne à l'intérieur d'un incubateur, est essentiel1. De plus, avec Celloger® Mini Plus, la caméra à l'intérieur du système se déplace pour capturer les images des cellules à plusieurs positions afin de maintenir l'échantillon cellulaire dans un état stable, au lieu d'avoir une platine mobile avec une plaque dessus. Lorsque les cellules en suspension ont été surveillées à la fois par Celloger® Mini Plus et par microscope, l'imagerie avec Celloger® Mini Plus était plus stable comparée à l'utilisation d'un microscope où plusieurs cellules étaient hors de mise au point (Figure 1).

Dans le processus du « cycle cellulaire », les cellules croissent et se divisent en deux cellules filles génétiquement identiques. Il est régulé par une voie de signalisation complexe qui maintient l'homéostasie cellulaire en régulant la division cellulaire et la duplication de l'ADN1. D'autre part, parce que les cellules cancéreuses croissent et se divisent indéfiniment hors du contrôle du cycle cellulaire, des médicaments anti-mitotiques sont utilisés pour supprimer la prolifération anormale des cellules cancéreuses2. En particulier, le Nocodazole est connu comme un médicament anti-mitotique représentatif pour le traitement du cancer, et il a la caractéristique de perturber la dynamique des microtubules pendant la division cytoplasmique et nucléaire3,4.

La cytotoxicité fait référence au degré de dommage aux cellules causé par des substances chimiques ou des facteurs physiques. La mesurer par un test de cytotoxicité est essentiel pour le développement de médicaments et la recherche biologique. Les cellules subissent des voies de signalisation complexes qui provoquent divers processus de mort cellulaire tels que l'apoptose, la nécrose et la nécroptose. Cependant, la plupart des tests de cytotoxicité sont mesurés à un point final, ce qui rend difficile l'étude de la réponse dynamique des cellules aux médicaments.

Avez-vous le nouveau système de mesure EVOM Auto TEER pour plaques HTS à 96 puits ? Cette courte vidéo montre à quel point il est facile à configurer.

Le système de mesure épithéliale robotisé (REMS) historique de World Precision Instruments (WPI) et la nouvelle version avancée et améliorée de REMS, EVOM™ Auto, sont des systèmes automatisés à haut débit pour la mesure de la résistance électrique transepitheliale/transendothéliale (TEER). Ces systèmes robotiques, combinés à la technologie EVOM™, accélèrent les mesures TEER.

Les modèles in vitro ont utilisé deux méthodes courantes pour quantifier les changements dans l'intégrité de la barrière endothéliale : la résistance électrique transepitheliale/transendothéliale (TEER) et la perméabilité aux composés traceurs.1 La TEER est une méthode non invasive qui quantifie les variations de conductance électrique pour mesurer la confluence et l'intégrité de la barrière. La perméabilité aux composés traceurs utilise des molécules de poids moléculaire défini pour mesurer la capacité d'exclusion dimensionnelle des barrières cellulaires (par exemple, FITC-dextran 4 kDa ou FD4).1 En utilisant le Manuel EVOM™ (EVOM-MT-03-01) avec l'électrode EndOhm TEER et des supports perméables pour culture cellulaire, cette note d'application décrit comment évaluer de manière non invasive l'intégrité de la barrière endothéliale après un traitement aux cytokines et fournit une méthode pour identifier des composés vasoactifs susceptibles d'induire des lésions vasculaires. Les études de perméabilité aux composés traceurs sont combinées à l'évaluation TEER pour élucider les impacts induits par le traitement sur les jonctions intercellulaires et le transport paracellulaire (Fig. 1).