ニュース：動物実験の代替法と医薬品開発の未来

免疫機能を担う白血球は血管に沿って移動する懸濁細胞であるため、免疫学の研究では白血球由来のさまざまな懸濁細胞株がよく使用されます。接着細胞とは異なり、懸濁細胞を扱う場合、顕微鏡でプレートを位置決めする際のわずかな動きで細胞が浮いてしまいます。温度やCO2の不安定さによる問題に加え、従来の顕微鏡では細胞をリアルタイムで観察することは実際には不可能です。したがって、懸濁細胞を安定して観察するには、インキュベーター内で動作するCelloger® Mini Plusのようなライブセルイメージング装置が不可欠です1。さらに、Celloger® Mini Plusでは、システム内のカメラが移動して複数の位置で細胞の画像を撮影し、プレートを載せた可動ステージの代わりに細胞サンプルを安定した状態に保ちます。懸濁細胞をCelloger® Mini Plusと顕微鏡の両方で観察したところ、Celloger® Mini Plusでの撮影の方が安定しており、顕微鏡ではいくつかの細胞がピント外れになっていました（図1）。

「細胞周期」の過程では、細胞が成長し、遺伝的に同一な2つの娘細胞に分裂します。これは、細胞分裂とDNA複製を調節する複雑なシグナル伝達経路によって細胞の恒常性を維持しています1。一方で、がん細胞は細胞周期の制御を超えて無限に増殖・分裂するため、抗有糸分裂薬ががん細胞の異常増殖を抑制するために使用されます2。特に、ノコダゾールはがん治療の代表的な抗有糸分裂薬として知られており、細胞質および核分裂中の微小管動態を乱す特徴があります3,4。

細胞毒性とは、化学物質や物理的要因によって細胞に与えられる損傷の程度を指します。細胞毒性アッセイによる測定は、医薬品開発や生物学的研究において不可欠です。細胞は複雑なシグナル伝達経路を経て、アポトーシス、ネクローシス、ネクロプトーシスなどのさまざまな細胞死プロセスを引き起こします。しかし、多くの細胞毒性アッセイはエンドポイントで測定されるため、薬剤に対する細胞の動的な反応を研究することが難しいです。

新しいEVOM Auto TEER測定システム（96ウェルHTSプレート用）を手に入れましたか？この短い動画では、セットアップがどれほど簡単かを紹介しています。

World Precision Instruments（WPI）の従来のロボティック上皮測定システム（REMS）と、新しく高度にアップグレードされたREMSのバージョンであるEVOM™ Autoは、高スループットの自動化された経上皮／経内皮電気抵抗（TEER）測定システムです。これらのロボットシステムはEVOM™技術と組み合わさり、TEER測定を迅速化します。

インビトロモデルでは、内皮バリアの一体性の変化を定量化するために、2つの一般的な方法が用いられています：経上皮／経内皮電気抵抗（TEER）とトレーサー化合物の透過性です。1 TEERは、電気伝導度の変化を定量化して細胞の密着度とバリアの一体性を測定する非侵襲的な方法です。トレーサー化合物の透過性は、分子量が定義された分子（例：4 kDa FITC-デキストランまたはFD4）を用いて細胞バリアのサイズ排除能力を測定します。1 EVOM™マニュアル（EVOM-MT-03-01）をEndOhm TEER電極および細胞培養用透過性サポートと共に使用し、このアプリケーションノートではサイトカイン処理後の内皮バリアの一体性を非侵襲的に評価する方法を説明し、血管損傷を誘発する可能性のある血管作動性化合物を特定する方法を提供します。トレーサー化合物の透過性研究はTEER評価と組み合わせて、処理による細胞間接合部および細胞間輸送への影響を解明します（図1）。