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Vuoi fare il prossimo passo nei tuoi progetti CRISPR-CAS9 e rendere più efficiente l’iniezione di biomolecole nelle tue linee cellulari? Ora puoi aumentare la vitalità degli embrioni iniettati con MICRO-ePORE di WPI, che offre maggiore ripetibilità e funzionalità per una penetrazione cellulare precisa, ideale per microiniezioni mirate nella transgenesi.

Il PUL-1000 è un puller orizzontale a quattro fasi controllato da microprocessore, usato per realizzare micropipette o microelettrodi di vetro. Ecco come eseguire un programma per produrre due microelettrodi identici.

Il PUL-1000 è un estrattore orizzontale a quattro stadi, controllato da microprocessore, per produrre micropipette o microelettrodi in vetro. Ecco una breve panoramica per iniziare qui

Il PUL-1000 è un estrattore orizzontale a quattro stadi controllato da microprocessore, utilizzato per realizzare micropipette di vetro o microelettrodi. Qui vedremo come caricare un pezzo di vetro nel carrello.

Il PUL-1000 è un estrattore orizzontale a quattro stadi controllato da microprocessore, progettato per realizzare micropipette o microelettrodi in vetro. Ti mostreremo come eseguire un test di rammollimento del vetro.

Diamo un’occhiata al PUL-1000, un estrattore orizzontale a quattro stadi controllato da microprocessore, per la produzione di micropipette di vetro o microelettrodi. Qui esamineremo il design dell’unità.

Le pipette WPI pre-aspirate (MicroTips) sono una scelta popolare per le aziende farmaceutiche che eseguono test CCIT (verifica dell’integrità dei contenitori chiusi). Ogni MicroTip è testata e ispezionata singolarmente e può essere spedita con un certificato di conformità.

Il sistema illustrato include componenti spesso apprezzati dai ricercatori:

1. MICRO-ePUMP PicoPump pneumatico con MICRO-ePORE™ Cell Penetrator integrato per facilitare le microiniezioni
2. SU-P1000 Estrattore di micropipette
3. M4C Supporto
4. M3301R Micromanipolatore
5. PZMTIII Microscopio con base illuminata opzionale con specchio orientabile e videocamera PRO-300 HDS e schermo di visualizzazione opzionali
6. E2XX Contenitore per la conservazione delle micropipette
7. Z-MOLDS Stampi per microiniezione e trapianto
8. 14003-G Forbici a molla Vannas
9. Capillari di vetro
10. 77020 Pinzette per vetro
11. FluoroDish Piastre per colture con fondo in vetro di grado ottico

World Precision Instruments (WPI) offre un’ampia gamma di strumenti di ricerca per lo studio del pesce zebra (Danio Rerio), dalla modifica genetica dell’organismo al monitoraggio degli effetti fisiologici di tale modifica. Che i ricercatori eseguano microiniezioni o effettuino misurazioni cardiovascolari, la linea di prodotti WPI comprende strumenti per la ricerca su ovociti, embrioni, larve e pesci zebra adulti.

Il microiniettore PV850 è progettato per semplificare l’iniezione intracellulare e una varietà di altre attività di microiniezione. Il PV850 utilizza una pressione dell’aria regolata per iniettare liquidi nelle cellule. I volumi iniettati variano da picolitri a nanolitri. La porta fornisce una pressione positiva per l’espulsione ad alta pressione, fino a un massimo di 87 PSI.

Il microiniettore PV850 è progettato per semplificare l’iniezione intracellulare e una varietà di altre attività di microiniezione. Il PV850 utilizza aria a pressione regolata per iniettare fluidi nelle cellule. I volumi iniettati vanno dai picolitri ai nanolitri. La porta fornisce una pressione positiva per l’espulsione ad alta pressione, fino a un massimo di 8 7PSI.

Progettati per semplificare l’iniezione intracellulare e una varietà di altre attività di microiniezione, i PicoPump di WPI (PV830 e PV820) utilizzano pressioni regolate con precisione per immobilizzare le cellule e iniettarvi fluidi. I volumi iniettati variano da picolitri a nanolitri. Porte separate forniscono pressione positiva e negativa: pressione positiva per l’espulsione ad alta pressione e aspirazione per sostenere la cellula o riempire la pipetta dalla punta. In questa breve serie puoi vedere come configurare un PicoPump.

La UltraMicroPump UMP3 è facile da configurare tramite l’interfaccia SMARTouch. È preprogrammata per le microsiringhe più diffuse e consente anche di definire i parametri delle siringhe. Questo garantisce una compatibilità pressoché universale. È possibile controllare fino a due pompe, contemporaneamente o in modo indipendente, e l’interruttore a pedale opzionale consente di lavorare a mani libere. È possibile verificare subito il volume di iniezione effettivo sul display grafico. Si può persino usare il touchscreen indossando i guanti.

Le piastre per colture cellulari FluoroDish™ di WPI offrono una qualità d’immagine eccezionale per numerose applicazioni che richiedono l’uso di microscopi invertiti, come l’analisi delle immagini ad alta risoluzione, la microiniezione e la registrazione elettrofisiologica di cellule marcate con fluorofori. Sono disponibili una piastra con diametro di 50 mm e due tipi di piastre con diametro di 35 mm.

UltraMicroPump3 è una pompa per microiniezione UltraMicroPump3 versatile, pompa a siringa per microiniezione, progettata per soddisfare le esigenze di un laboratorio molto attivo. Il microiniettore UMP3 è adatto alla somministrazione di fluidi da nanolitri a millilitri. L’interfaccia utente e la progettazione del sistema dell’iniettore UMP3 consentono di eseguire iniezioni estremamente accurate e ripetibili. Scelta da migliaia di ricercatori, è ampiamente citata negli articoli scientifici.

Dal primo studio approvato di terapia genica umana nel 1989¹ (Rosenberg et al.), la terapia genica ha fatto molta strada nella medicina moderna e si sta affermando nelle cliniche e sul mercato in generale.^2,3 Il 2017 è stato un anno importante per la terapia genica: la FDA (Food and Drug Administration degli Stati Uniti) ha approvato Luxurna, il primo farmaco di terapia genica umana per una distrofia retinica ereditaria.

La microiniezione è il processo di trasferimento di materiale genetico in una cellula vivente usando micropipette di vetro o aghi metallici per microiniezione. Le micropipette di vetro possono avere dimensioni diverse, con diametri della punta compresi tra 0,1 e 10 µm. Il DNA o l’RNA viene iniettato direttamente nel nucleo cellulare. La microiniezione è stata usata con successo con grandi uova di rana, cellule e embrioni di mammifero, piante e tessuti. La microiniezione è stata costosa, può essere un processo lento e richiede personale qualificato, ma le nuove tecnologie la stanno rendendo ancora più affidabile, ripetibile e accessibile.

MICRO-ePORE™ penetratore cellulare di precisione è un sistema semplice e versatile che può essere utilizzato per facilitare la microiniezione di un'ampia varietà di composti e biomolecole negli ovociti e negli embrioni di mammiferi allo stadio preimpianto. La tecnologia brevettata in attesa di Flutter Electrode consente una penetrazione della membrana precisa, pulita e di piccole dimensioni, senza lacerarla né danneggiarla. Ciò aumenta notevolmente la vitalità degli embrioni.

Il nuovo MICRO-ePORE™ Pinpoint Cell Penetrator di WPI è un sistema semplice e versatile, utilizzabile per effettuare efficacemente la microiniezione di un'ampia varietà di composti e biomolecole in ovociti ed embrioni di mammifero allo stadio preimpianto. La tecnologia Flutter Electrode, in attesa di brevetto, consente una penetrazione della membrana piccola, pulita e precisa, senza lacerarla né danneggiarla. Qui Gabe prepara il sistema e collega tutti i componenti.

In questo video vedrai come sostituire la guarnizione in un >Nanoliter2010. 

NOTA: NANOLITER2010 è stato sostituito da NANOLITER2020

I kit di applicazione sono progettati appositamente per la ricerca oculistica, per l’iniezione dell’epitelio pigmentato retinico (RPE) e per le iniezioni intraoculari (IO). Inoltre, questi kit possono essere utilizzati per iniezioni cerebrali nei topi. Per ottenere iniezioni accurate, ripetibili e senza olio nell’intervallo submicrolitrico, devono essere utilizzati con una siringa NanoFil e UMPIII.

Per prima cosa, consideriamo i volumi.

• Un millilitro (mL) è un millesimo del volume di un litro (L), ovvero 10^-3L
• Un microlitro (µL) è un millesimo del volume di un mL (10^-6L)
• Un nanolitro (nL) è un millesimo del volume di un µL (10^-9L)
• Un picolitro (pL) è un millesimo del volume di un nL (10^-12L)

Questi volumi sono rappresentati graficamente a destra. Si noti che il mL è un bilione di volte più grande del picolitro. La tabella (a destra) mostra che il lato di un cubo con un volume di 1mL è lungo 1cm. Analogamente, il lato di un cubo con un volume di 1pL è lungo 10µm. Per confronto, mostra che il diametro di una sfera con un volume di 1mL è di 1,24cm e che il diametro di una sfera con un volume di 1pL è di 12,4µm.

Il PUL-1000 di World Precision Instruments è un puller orizzontale a quattro stadi controllato da microprocessore, progettato per realizzare micropipette in vetro o microelettrodi utilizzati per registrazioni intracellulari, microperfusione e microiniezione. Offre sequenze programmabili fino a quattro fasi, con controllo completo di riscaldamento, forza, movimento e tempo di raffreddamento. Consente così di eseguire cicli graduati per diverse applicazioni. Il PUL-1000 può produrre pipette con diametri della punta da meno di 0,1 µm a oltre 10 µm.

La pompa per microiniezione Nanoliter 2010 di WPI è ideale per molte applicazioni, tra cui zebrafish, ovociti di Xenopus e Drosophila. MICRO4, un controller opzionale basato su microprocessore, offre un’interfaccia «intelligente» e facile da usare per un massimo di quattro iniettori Nanoliter. I parametri di funzionamento si impostano tramite la tastiera a membrana e il display LCD.