Scegliere una cuvetta: vetro ottico o quarzo

L’assorbimento della luce è correlato all’energia di un fotone che viene assorbito dagli elettroni degli atomi della sostanza. L’energia elettromagnetica si trasforma in energia interna della sostanza assorbente. L’assorbanza di una sostanza quantifica quanta luce incidente viene assorbita (anziché essere riflessa o rifratta). Misurazioni precise dell’assorbanza a numerose lunghezze d’onda consentono di identificare una sostanza mediante la spettroscopia di assorbimento, in cui un campione viene illuminato da un lato e si misura l’intensità della luce che ne esce in ogni direzione (vedi Fig. 1). Alcuni esempi di spettroscopia di assorbimento sono la spettroscopia ultravioletta-visibile (UV-Vis) e la spettroscopia infrarossa (IR).

L’assorbimento della luce è correlato all’energia di un fotone assorbito dagli elettroni degli atomi della sostanza. L’energia elettromagnetica viene trasformata in energia interna della sostanza assorbente. L’assorbanza di una sostanza quantifica quanta luce incidente viene assorbita (anziché essere riflessa o rifratta). Misurazioni precise dell’assorbanza a molte lunghezze d’onda consentono di identificare una sostanza tramite la spettroscopia di assorbimento, nella quale un campione viene illuminato da un lato e si misura l’intensità della luce che esce dal campione in ogni direzione (vedi Fig. 1). Alcuni esempi di spettroscopia di assorbimento sono la spettroscopia ultravioletto-visibile (UV-Vis) e la spettroscopia infrarossa (IR).

Negli ultimi anni, l’uso di sonde fluorescenti in fisiologia cellulare si è rivelato uno strumento indispensabile per analizzare il funzionamento delle cellule. La fisica alla base della fluorescenza è illustrata dal diagramma degli stati elettronici (il cosiddetto diagramma di Jablonski, vedi Fig. 1), che mostra il processo in tre fasi che genera il segnale fluorescente (eccitazione - durata dello stato eccitato - emissione di fluorescenza) in un fluoroforo/indicatore e che è descritto in forma semplificata di seguito.

Le cuvette sono disponibili in varie forme e dimensioni, ma una delle specifiche più importanti di una cuvetta è la sua quota Z. La quota Z di uno strumento (portacuvette o spettrometro) è la distanza dal fondo della camera della cuvetta al centro del suo fascio luminoso (vedi immagine). La quota Z di una cuvetta deve corrispondere alla quota Z dello strumento con cui verrà utilizzata.