Rilevamento dell'assorbanza
Rilevamento di composti organici nell’analisi dell’acqua
L’assorbimento della luce è correlato all’energia di un fotone assorbito dagli elettroni degli atomi della sostanza. L’energia elettromagnetica si trasforma in energia interna della sostanza assorbente. L’assorbanza di una sostanza quantifica la quantità di luce incidente che viene assorbita (anziché essere riflessa o rifratta). Misurazioni precise dell’assorbanza a molte lunghezze d’onda consentono di identificare una sostanza mediante la spettroscopia di assorbimento: il campione viene illuminato da un lato e si misura l’intensità della luce che ne esce in ogni direzione (vedere Fig. 1). Alcuni esempi di spettroscopia di assorbimento sono la spettroscopia ultravioletta-visibile (UV-Vis) e quella infrarossa (IR).
Fig. 1. Principio della spettroscopia di assorbanza: la luce bianca e i componenti ottici filtrano la luce di una specifica lunghezza d’onda, che interagisce con le molecole nella soluzione. L’assorbanza delle molecole nella soluzione a questa specifica lunghezza d’onda viene rilevata come una diminuzione dell’intensità luminosa (spettrofotometro - fonte: http://chemwiki.ucdavis.edu/).
L’assorbimento è la quantità di luce che una sostanza assorbe e non lascia passare. Gli spettrofotometri misurano in realtà la trasmissione, ovvero la quantità di luce che attraversa un campione, ma la convertono in assorbimento confrontando la luce emessa dalla lampadina con quella che ha attraversato il campione. Le sorgenti luminose utilizzabili per la spettroscopia di assorbanza dipendono fortemente dalla sostanza impiegata per contrassegnare una specifica molecola e possono coprire l’intero spettro elettromagnetico della luce.
Le applicazioni industriali che coprono lo spettro UV per il rilevamento delle proteine sono associate all’analisi degli alimenti (per esempio, alla classificazione dell’olio d’oliva come extravergine, vergine ecc., secondo quanto stabilito dalle normative europee) o al controllo qualità nell’industria farmaceutica. Inoltre, le applicazioni industriali della spettrofotometria di assorbanza comprendono la caratterizzazione della purezza dell’acqua e l’analisi delle acque reflue, nonché la determinazione di specifiche molecole organiche come nitrati, nitriti o fosforo. Quest’ultima applicazione è interessante quando si utilizza lo spettro della luce visibile (Vis).
Le applicazioni biologiche comprendono anche la misurazione della diffusione della luce a 600 nm per monitorare il tasso di crescita di una popolazione batterica in coltura e individuarne la concentrazione massima.
La spettrofotometria di assorbanza Vis con sorgenti luminose monocromatiche, come i LED ad alta potenza, viene utilizzata nello spettrofotometro LEDSpec di WPI, disponibile in configurazione a 2 o 4 canali e con un massimo di sette lunghezze d’onda. LEDSpec offre misurazioni dell’assorbanza molto sensibili e stabili, con caratteristiche di basso rumore, a una specifica lunghezza d’onda. Inoltre, i LED ad alta potenza forniscono una sorgente luminosa stabile, non richiedono tempi di riscaldamento, hanno un costo contenuto e una lunga durata.
Per qualsiasi domanda, contatta WPI al numero 941.371.1003 o scrivi a technicalsupport@wpiinc.com.
