VIDEO: Calibrazione del sensore per l’analizzatore di radicali liberi TBR4100 di WPI (NO, HPO e H2S)
[by Nikki Scafa]
Quando si utilizza un analizzatore di radicali liberi TBR, per misurare accuratamente un analita è necessaria una calibrazione accurata. La calibrazione dei sensori per ossido nitrico, perossido di idrogeno e solfuro di idrogeno è simile. I sensori WPI per ossigeno e glucosio richiedono metodi diversi, che non saranno trattati qui.
Prima di iniziare:
- Assicurati di avere i seguenti elementi.
- Il sensore deve essere polarizzato per il tempo appropriato.
- Le soluzioni sono preparate come descritto nel manuale. (NOTA: prima di continuare il video, mostreremo una diapositiva con la lista di controllo degli elementi (qui sotto).)
| SENSORI | DIMENSIONI | SOLUZIONE | STANDARD | Tempo di polarizzazione | |
| Ossido nitrico | ISO-NOP | 2 mm | KI 0,1 M/ H2SO4 | 50 µM KNO2 | 12 ore |
| ISO-NOP007 | 7 mm | CuCl 0,1 M2 | 100 µM SNAP | ≥2 ore | |
| ISO-NOP3005 | 30 mm | ora | |||
| ISO-NOP3020 | 30 mm | 1 ora | |||
| ISO-NOPF200 | 200 mm | oltre 8 ore | |||
| ISO-NOPF100 | 100 mm | oltre 8 ore | |||
| ISO-NOPNM | 30 mm | 1 ora | |||
| Perossido di idrogeno | ISO-HPO-2 | 2 mm | PBS 0,1 M | 1 mM H2O2 | oltre 4 ore |
| ISO-HPO-100 | 100 mm | ≥1 ora | |||
| Solfuro di idrogeno | ISO-H2S-2 | 2 mm | PBS 0,1 M | 1 mM H2S | oltre 12 ore |
| ISO-H2S-100 | 100 mm | oltre 4 ore |
Questa dimostrazione illustra i metodi utilizzati nel laboratorio WPI. Stiamo usando un sensore ISO-HPO-100 per il perossido di idrogeno.
- Dopo che il sensore si è polarizzato, usa una pipetta per iniettare un'aliquota della soluzione di calibrazione. Abbiamo iniziato con 2 µL di perossido di idrogeno 1 mM. Poi, attendi 30 secondi mentre LabTrax registra i dati. La traccia dati raggiunge un plateau.
- Quindi, inietta il doppio del volume della prima aliquota e attendi altri 30 secondi finché la traccia dati non raggiunge nuovamente un plateau.
- Continua a raddoppiare il volume di iniezione per altre tre iniezioni, aspettando 30 secondi tra un'iniezione e l'altra.
- Al termine, dovresti avere una traccia dati con 5 plateau distinti.
- Utilizzando il software LabTrax, determina la distanza tra la lettura della linea di base e quella del plateau per ciascuna aliquota. È la distanza tra le due linee rosse e il delta è mostrato nell'angolo in alto a destra dello schermo. Utilizzando questi valori, crea una curva di calibrazione e determina la R2 valore.
- Dopo aver eseguito questa calibrazione, il sensore è pronto per l'uso.
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