VIDEO: Come creare un file di piastra su EVOM™ Auto
EVOM™ Auto automatizza le misurazioni della TEER nei monostrati epiteliali o endoteliali coltivati su piastre per screening ad alto rendimento a 96 pozzetti, utilizzando la nostra innovativa tecnologia EVOM™ per valutare qualitativamente la salute del monostrato cellulare e misurare quantitativamente la confluenza cellulare, determinando un aumento o un plateau della resistenza del tessuto.
Il video qui sotto mostra come creare un file della piastra su EVOM™ Auto:
1. Per creare una sequenza di misurazione, seleziona il menu Gestisci sequenza dalla schermata iniziale. Viene visualizzato un elenco delle sequenze esistenti: puoi aprire e modificare qualsiasi sequenza esistente oppure selezionare Nuova sequenza per crearne una nuova. Se selezioni Nuova sequenza, una finestra popup ti consente di assegnarle un nome.
2. Puoi scegliere se visualizzare i valori di resistenza misurati o la misurazione TEER. La TEER è un valore calcolato in base all'area superficiale del pozzetto e alla resistenza misurata.
Seleziona il menu Modalità. Le opzioni includono Resistenza e TEER.
Quando selezioni Modalità>Resistenza>Intervallo, puoi scegliere l'intervallo di resistenza per effettuare le misurazioni:
- 10K Ohm
- 50K Ohm
- 100K Ohm
L'area Stato corrente sul lato destro della finestra si aggiorna di conseguenza.
3. Quando selezioni Modalità>TEER, puoi scegliere l'intervallo di resistenza e l'area del pozzetto. L'area del pozzetto definisce l'area superficiale di un pozzetto sulla piastra.
4. Seleziona l'opzione del bianco. Questa opzione misura la resistenza della prima colonna (pozzetti A1, B1, C1...H1) e usa questo valore come riferimento per ogni riga. Ogni valore nella tabella Valore del bianco misura la resistenza della specifica coppia di elettrodi utilizzata per misurare ciascuna colonna di pozzetti contenenti solo tampone. I valori da 1 a 8 vengono sottratti dalle misurazioni della riga corrispondente per ottenere la variazione rispetto al pozzetto di riferimento.
5. Per avviare la configurazione del bianco, seleziona il menu Bianco e scegli Carica bianco, quindi Nuovo bianco per creare un contenitore per i dati di riferimento del bianco.
Dopo aver salvato la sequenza, viene creato il contenitore con un valore predefinito pari a zero. Il nome del bianco viene aggiornato nell'area Stato corrente.
6. Quindi, carica una piastra per pozzetti con terreno di coltura o tampone nella prima colonna di pozzetti e posizionala nell'area della piastra per pozzetti HTS sul campionatore automatico.
7. Per misurare i valori del bianco e caricare i dati nel contenitore, seleziona il menu Bianco e scegli Compila bianco.
Il campionatore automatico sposta quindi la matrice di elettrodi sulla colonna 1 e misura tutti e otto i valori. Man mano che vengono inseriti, i valori vengono visualizzati nell'area Bianco della finestra.
Al termine della misurazione, puoi ricampionare i valori del bianco tutte le volte che desideri, subito o in futuro, caricando questo contenitore e selezionando di nuovo l'opzione Compila bianco.
8. Imposta il tempo per pozzetto selezionando il menu Tempo per pozzetto. Il tempo per pozzetto è il numero di secondi durante i quali gli elettrodi restano immersi in ciascun pozzetto durante le misurazioni. Inserisci il tempo desiderato in secondi e premi Salva. Il valore aggiornato viene visualizzato nell'area Stato corrente della finestra.
9. Le tre stazioni di risciacquo possono essere utilizzate per risciacquare, disinfettare, stabilizzare o per qualsiasi altra funzione desiderata. Configura il programma di risciacquo selezionando Risciacquo dal menu. Puoi impostare il tempo di risciacquo e il tempo di attesa in ciascuna stazione di risciacquo usando i comandi di attivazione in ogni campo. Tre pulsanti di attivazione nella sezione Opzioni di risciacquo sul lato destro della finestra consentono di visualizzare quando vengono applicati i parametri di risciacquo e attesa. Puoi scegliere qualsiasi combinazione di queste opzioni.
10. Dopo aver impostato il programma nella finestra Tempo di risciacquo , premi Salva per salvare le modifiche, quindi torna alla finestra Sequenza.
11. Ora che la sequenza è stata definita, può essere utilizzata con una piastra. Premi il pulsante Indietro per tornare alla finestra principale.
