Pulizia avanzata delle celle capillari a guida d’onda liquida
Questo articolo descrive una nuova procedura per pulire a fondo le celle a flusso WPI, comprese le celle capillari a guida d'onda liquida (LWCC), le celle a flusso UltraPath e le cuvette ottiche.
L'immagine a destra mostra una LWCC serie 3000 con una pompa MiniStar e il sistema di iniezione LWCC posizionato sopra.
Preparazione delle sostanze chimiche
Tutti i reagenti chimici devono essere almeno di grado ACS, preferibilmente di grado HPLC. Questa procedura prevede l'uso di reagenti caustici e infiammabili. Consultare la scheda di sicurezza del produttore per conoscere le precauzioni necessarie.
Soluzione detergente #1:
Idrossido di potassio 0,5 M in etanolo al 100% (ad es.: 7 g di KOH in 250 mL di EtOH). Dopo aver mescolato accuratamente, filtrare la soluzione con un filtro con pori da 20 µm.
Soluzione detergente #2:
Metanolo al 100%, grado HPLC
Soluzione detergente #3:
Acqua ultrapura, tipo I secondo ASTM D1193-99 o equivalente
NOTA: L'acqua ultrapura di grado 1 secondo ISO 3696 differisce significativamente dalla classificazione sopra indicata.
Procedura di pulizia
Il metodo di pulizia preferito prevede l'uso di uno spettrometro (ad es. Tidas E Base) o di un sistema di rilevamento basato su fotometro in «modalità monitor» per tutta la durata del processo di pulizia. Ciò consente al tecnico di osservare il miglioramento delle prestazioni nel tempo.
L'immagine a destra mostra la vista dall'alto di una pompa MiniStar e di un sistema di iniezione LWCC. Sul retro del sistema di iniezione si trovano i contenitori per l'acqua deionizzata (DIW) e gli scarti; sul lato destro si trovano le tre soluzioni detergenti e un flacone per i campioni.
Il metodo di pulizia più semplice consiste nell'usare una pompa peristaltica (MiniStar n. ordine) per far passare ogni soluzione detergente attraverso la cella per campioni nell'ordine appropriato. Un modo pratico per eseguire questa operazione è usare il sistema di iniezione LWCC di WPI (n. ordine 89372). Si consiglia di configurare la pompa in modo che «aspiri» attraverso la cella, così da evitare possibili contaminazioni causate dal deterioramento dei tubi della pompa peristaltica. Ogni soluzione viene fatta circolare per circa 3-4 minuti, introducendo una bolla d'aria tra una soluzione e l'altra. La procedura va ripetuta finché le prestazioni della cella per campioni non mostrano più miglioramenti evidenti. È possibile invertire la direzione del flusso tra un ciclo e l'altro per garantire una pulizia accurata.
Per ridurre il tempo necessario con il metodo di pulizia sopra descritto, è possibile introdurre nella cella per campioni grandi bolle d'aria alternandole alle soluzioni detergenti. Questo metodo sfrutta un profilo di flusso laminare e la diffusione radiale per «strofinare» efficacemente l'interno della cella per campioni.
È fondamentale che la Soluzione #2 venga fatta passare subito dopo la Soluzione #1, per rimuovere i residui rimasti sui componenti ottici. In caso contrario, le prestazioni della cella a flusso saranno scarse.
Un altro possibile metodo di pulizia prevede l'uso di due siringhe di volume adeguato collegate alle porte per i liquidi della cella per campioni. Seguendo l'ordine numerico appropriato, introdurre ciascuna soluzione detergente nella cella per campioni e farla passare avanti e indietro tra le siringhe 10-12 volte. Ripetere la procedura finché le prestazioni della cella per campioni non mostrano più miglioramenti evidenti.
Procedura di risciacquo finale
Una volta individuato il punto in cui i cicli di pulizia successivi non migliorano più le prestazioni della cella a flusso, risciacquare l'unità con acqua ultrapura per almeno 15 minuti, così da assicurarsi che tutte le soluzioni detergenti siano state rimosse completamente e che non rimangano residui persistenti che potrebbero compromettere le prestazioni o la stabilità della cella a flusso.
Esempio di configurazione di misurazione LWCC con codice d'ordine
Spettrometro TIDAS E con matrice di fotodiodi UV/VIS (504718)
Sorgente luminosa a fibre ottiche deuterio/alogena (D4H)
Cella capillare a guida d'onda liquida, cammino ottico di 50 cm (LWCC-3100)
Kit di avvio LWCC (KITLWCC), che include due cavi in fibra ottica (505195), accessorio per iniettore di campioni (58006), pompa peristaltica MiniStar (MINISTAR) e kit di pulizia per guida d'onda (501609).
