Come scegliere gli elettrodi per effettuare misurazioni TEER

La resistenza elettrica transepiteliale (TEER), detta anche resistenza transepiteliale (TER), viene utilizzata per monitorare la salute cellulare. La TEER comprende le misurazioni della via transcellulare (ovvero la resistenza dovuta a una singola cellula) e della via paracellulare (ovvero la resistenza dovuta alla formazione delle giunzioni cellulari). La TEER viene comunemente utilizzata per monitorare la confluenza cellulare. I valori TEER possono indicare cambiamenti nella permeabilità del monostrato cellulare, evidenziando la funzione di barriera del monostrato di cellule quali quelle endoteliali (dei microvasi cerebrali) ed epiteliali (alveolari, renali e intestinali). Valori TEER elevati indicano generalmente monostrati cellulari o giunzioni cellulari più serrati (Lewis 1996, Matter e Balda 2003, Denker e Sabath 2011). Di seguito sono descritti alcuni dei principali vantaggi dei sistemi WPI per la misurazione della TEER. I valori TEER (analisi elettrofisiologica) possono essere combinati con altri metodi di analisi per comprendere meglio un fenomeno biologico. Ad esempio, una diminuzione del valore TEER può indicare un aumento della permeabilità del monostrato, che può essere confermato ulteriormente mediante un test con una molecola tracciante (fluoresceina-destrano). Se un ricercatore desidera capire se un farmaco ha effetti sulle cellule, la misurazione della TEER può essere utilizzata nello screening preliminare per verificare se il farmaco può influire sulla salute cellulare o sulla permeabilità del monostrato cellulare. I sistemi WPI per la misurazione della TEER applicano una corrente molto bassa (10 µA) e consigliamo di applicarla per un breve periodo (al massimo circa 1-2 minuti) durante ogni misurazione. Con questa configurazione, poiché durante l’acquisizione dei dati non si prevedono cambiamenti fisiologici (o se ne prevedono di trascurabili), i nostri sistemi di misurazione della TEER possono essere considerati non invasivi. Un campione specifico analizzato per la misurazione della TEER può essere successivamente utilizzato per altri esperimenti, come la determinazione dei livelli proteici o della vitalità cellulare. La tecnica di misurazione della TEER è stata adottata da molti ricercatori, perché i valori TEER possono indicare diversi fenomeni biologici, che possono essere approfonditi o confermati con altre tecniche. La misurazione della TEER richiede un approccio sperimentale semplice.

Denker, B. M. e E. Sabath (2011). "La biologia delle giunzioni serrate delle cellule epiteliali nel rene." Journal of the American Society of Nephrology 22(4): 622-625. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21415157

Matter, K. e M. S. Balda (2003). "Analisi funzionale delle giunzioni serrate." Methods 30(3): 228-234. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12798137

Lewis, S. A. (1996). Elettrofisiologia epiteliale. Epithelial Transport, Springer: 93-117. https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-94-009-1495-7_5

In questi due video presentiamo le opzioni di elettrodi offerte da WPI. La scelta dell’elettrodo dipenderà principalmente dal sistema utilizzato (ad es. dalle dimensioni dell’inserto per colture cellulari o della piastra multi-pozzetto). Nel corso degli anni abbiamo progettato diversi elettrodi per renderli compatibili con sistemi diversi e migliorare l’acquisizione di dati coerenti, riducendo al minimo gli errori umani durante gli esperimenti di laboratorio.