VIDEO: Cómo crear un archivo de placas en el EVOM™ Auto
El EVOM™ Auto automatiza las mediciones de TEER en monocapas epiteliales o endoteliales cultivadas en placas de 96 pocillos para cribado de alto rendimiento, utilizando nuestra innovadora tecnología EVOM™, midiendo cualitativamente la salud de la monocapa celular y cuantitativamente la confluencia celular al determinar un aumento o una meseta en la resistencia tisular.
El video a continuación muestra cómo crear un archivo de placa en el EVOM™ Auto:
1. Para crear una secuencia de medición, seleccione el menú Gestionar Secuencia desde la pantalla de inicio. Se mostrará una lista de las secuencias existentes, y podrá abrir y editar cualquier secuencia o seleccionar Nueva Secuencia para crear una nueva. Si selecciona Nueva Secuencia, aparecerá una ventana emergente que le permitirá nombrar la secuencia.
2. Puede elegir mostrar los valores de resistencia medidos o la medición TEER. TEER es un valor calculado basado en el área superficial del pocillo y la resistencia medida.
Seleccione el menú Modo. Las opciones incluyen Resistencia y TEER.
Al seleccionar Modo>Resistencia>Rango, puede elegir el rango de resistencia para realizar las mediciones:
- 10K Ohmios
- 50K Ohmios
- 100K Ohmios
El área de Estado Actual en el lado derecho de la ventana se actualiza en consecuencia.
3. Al seleccionar Modo>TEER, puede elegir el rango de resistencia y el área del pocillo. El área del pocillo define la superficie de un pocillo en su placa.
4. Seleccione su opción de blanco. Esta opción mide la resistencia de la primera columna (Pocillos A1, B1, C1...H1), y este valor se usa como línea base para cada fila. Cada valor en la tabla de Valor de Blanco mide la resistencia del par específico de electrodos usado para medir cada columna en un pocillo que contiene solo tampón. Los valores 1-8 se restan de las mediciones en la fila correspondiente para obtener el cambio respecto al pocillo base.
5. Para iniciar la configuración del blanco, seleccione el menú Blanco y elija Cargar Blanco, y luego Nuevo Blanco para crear un contenedor para los datos de línea base del blanco.
Después de guardar la secuencia, se crea el contenedor con un valor predeterminado de cero. El nombre del blanco se actualiza en el área de Estado Actual.
6. A continuación, cargue una placa de pocillos con medio o tampón en la primera columna de pocillos y colóquela en el área de Placa de Pocillos HTS en el Autosampler.
7. Para medir los blancos y cargar esa información en el contenedor de blanco, seleccione el menú Blanco y elija Rellenar Blanco.
El Autosampler mueve entonces el conjunto de electrodos a la columna 1 y mide los ocho valores. Los valores se muestran en el área de Blanco en la ventana a medida que se van registrando.
Después de completar la medición, puede volver a muestrear los blancos tantas veces como desee, ahora o en el futuro, cargando este contenedor y ejecutando nuevamente la opción Rellenar Blanco.
8. Configure el tiempo por pocillo seleccionando el menú Tiempo por Pocillo. El tiempo por pocillo es el número de segundos que los electrodos permanecen sumergidos en cada pocillo al tomar las mediciones. Ingrese el tiempo deseado en segundos y presione Guardar. El valor actualizado se muestra en el área de Estado Actual de la ventana.
9. Las tres estaciones de enjuague pueden usarse para enjuagar, desinfectar, estabilizar o cualquier otra función deseada. Configure el programa de enjuague seleccionando Enjuague en el menú. Puede establecer el tiempo de enjuague y el tiempo de espera en cada estación de enjuague usando los controles de alternancia en cada campo. Tres botones de alternancia en la sección Opciones de Enjuague en el lado derecho de la ventana le permiten ver cuándo se aplican los parámetros de enjuague y espera. Puede elegir cualquier combinación de estas opciones.
10. Después de configurar el programa en la ventana de Tiempo de Enjuague, presione Guardar para guardar los cambios y luego regrese a la ventana de Secuencia.
11. Ahora que la secuencia está definida, puede usarse en una placa. Presione el botón Volver para regresar a la ventana principal.
