Cómo seleccionar electrodos para realizar mediciones TEER

La resistencia eléctrica transepitelial (TEER), también conocida como resistencia transepitelial (TER), se utiliza para monitorear la salud celular. TEER comprende mediciones de la vía transcelular (es decir, resistencia debida a una célula individual) y la vía paracelular (es decir, resistencia debida a la formación de uniones celulares). TEER se usa comúnmente para monitorear la confluencia celular. Los valores de TEER pueden indicar cambios en la permeabilidad de la monocapa celular, mostrando la función de barrera de la monocapa de células como las endoteliales (microvasos cerebrales) y epiteliales (alveolares, renales e intestinales). Valores altos de TEER generalmente reflejan monocapas celulares o uniones celulares más estrechas (Lewis 1996, Matter y Balda 2003, Denker y Sabath 2011). A continuación se describen algunos beneficios principales de los sistemas de medición TEER de WPI. Los valores de TEER (análisis electrofisiológico) pueden combinarse con otros métodos de análisis para comprender mejor un fenómeno biológico. Por ejemplo, una disminución en el valor de TEER puede indicar un aumento en la permeabilidad de la monocapa, lo cual puede confirmarse mediante un ensayo con una molécula trazadora (fluoresceína-dextran). Si un investigador desea entender si un fármaco tiene algún efecto sobre las células, la medición TEER puede usarse en un cribado primario para verificar si un fármaco puede afectar la salud celular o la permeabilidad de la monocapa celular. Los sistemas de medición TEER de WPI aplican una corriente muy baja (10 µA) y recomendamos aplicar esta corriente por un corto período (alrededor de 1-2 minutos como máximo) durante cada medición. Usando esta configuración, dado que no se esperan cambios fisiológicos (o son insignificantes) durante la adquisición de datos, nuestros sistemas de medición TEER pueden considerarse no invasivos. Una muestra específica, analizada para la medición TEER, puede usarse posteriormente para otros experimentos, como la detección de niveles de proteína o la detección de viabilidad celular. La técnica de medición TEER ha sido adoptada por muchos científicos, porque los valores de TEER pueden indicar diferentes fenómenos biológicos que pueden explorarse o confirmarse con otras técnicas. La medición TEER requiere un enfoque experimental simple.

Denker, B. M. y E. Sabath (2011). "La biología de las uniones estrechas de células epiteliales en el riñón." Journal of the American Society of Nephrology 22(4): 622-625. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21415157

Matter, K. y M. S. Balda (2003). "Análisis funcional de las uniones estrechas." Methods 30(3): 228-234. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12798137

Lewis, S. A. (1996). Electrofisiología epitelial. Transporte epitelial, Springer: 93-117. https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-94-009-1495-7_5

En estos dos videos discutimos las opciones de electrodos que ofrecemos en WPI. La elección del electrodo dependerá principalmente de su sistema (por ejemplo, dimensiones del inserto de cultivo celular/placa de pocillos). A lo largo de los años hemos diseñado diferentes electrodos para asegurar compatibilidad con distintos sistemas y mejorar la adquisición de datos consistentes minimizando errores humanos durante la experimentación en laboratorio.