動画:EVOM™オートでプレートファイルを作成する方法

EVOM™ Autoは、革新的なEVOM™技術を活用し、ハイスループットスクリーニング用の96ウェルプレート上で培養された上皮または内皮の単層のTEER測定を自動化します。細胞単層の健康状態を定性的に評価し、組織抵抗の増加または安定を判定することで細胞のコンフルエンスを定量的に測定します。

以下のビデオでは、EVOM™ Autoでプレートファイルを作成する方法を紹介しています:

 

1. 測定シーケンスを作成するには、ホーム画面からManage Sequenceメニューを選択します。既存のシーケンス一覧が表示され、任意のシーケンスを開いて編集するか、New Sequenceを選択して新しいシーケンスを作成できます。New Sequenceを選択すると、シーケンス名を入力するポップアップが表示されます。

測定シーケンスを作成

2. 測定された抵抗値またはTEER測定値の表示を選択できます。TEERはウェルの表面積と測定された抵抗値に基づいて計算される値です。

Modeメニューを選択します。選択肢にはResistanceとTEERがあります。

Mode>Resistance>Rangeを選択すると、測定に使用する抵抗範囲を選べます:

  • 10Kオーム
  • 50Kオーム
  • 100Kオーム

ウィンドウ右側のCurrent Stateエリアがそれに応じて更新されます。

測定シーケンスを作成

3. Mode>TEERを選択すると、抵抗範囲とウェルの面積を選択できます。ウェル面積はプレート上のウェルの表面積を定義します。

4. ブランクオプションを選択します。このオプションは最初の列(ウェルA1、B1、C1...H1)の抵抗を測定し、その値を各行の基準値として使用します。Blank Valueテーブルの各値は、バッファのみを含むウェルの各列を測定するために使用される特定の電極ペアの抵抗を示します。1~8の値は対応する行の測定値から差し引かれ、基準ウェルからの変化を得ます。

測定シーケンスを作成

5. ブランク設定を開始するには、Blankメニューを選択し、Load Blankを選んでからNew Blankを選択し、ブランク基準データ用のコンテナを作成します。

シーケンスが保存されると、コンテナがデフォルト値ゼロで作成されます。ブランク名はCurrent Stateエリアに更新されます。

新しいブランク

6. 次に、最初の列のウェルに培地またはバッファを入れたウェルプレートをロードし、オートサンプラーのHTSウェルプレートエリアにセットします。

培地をロード

7. ブランクを測定し、その情報をブランクコンテナに読み込むには、BlankメニューからPopulate Blankを選択します。

ブランクをロード

オートサンプラーは電極アレイを1列目に移動し、8つの値すべてを測定します。値はウィンドウのBlankエリアに表示されます。

実験画面

測定完了後は、いつでもこのコンテナをロードしてPopulate Blankを再実行することで、ブランクを何度でも再測定できます。

8. Well Timeメニューを選択してウェルタイムを設定します。ウェルタイムは測定時に電極が各ウェルに浸される秒数です。希望の秒数を入力し、保存を押します。更新された値はウィンドウのCurrent Stateエリアに表示されます。

ウェルタイムを設定

9. 3つのリンスステーションは洗浄、消毒、安定化など任意の機能に使用できます。Rinseメニューからリンススケジュールを設定します。各リンスステーションのリンス時間と待機時間はトグルコントロールで設定可能です。ウィンドウ右側のRinse Optionsセクションにある3つのトグルボタンで、リンスおよび待機パラメータの適用状況を確認できます。これらのオプションは任意の組み合わせで選択可能です。

リンススケジュール

10. Rinse Timeウィンドウでスケジュールを設定後、保存を押して変更を保存し、Sequenceウィンドウに戻ります。

 

11. シーケンスが定義されたので、プレートで使用できます。Backボタンを押してメインウィンドウに戻ります。

 

詳細情報

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