吸光度検出
水分析における有機化合物の検出
光の吸収は、物質の原子の電子が取り込む光子のエネルギーに関連しています。電磁エネルギーは吸収物質の内部エネルギーに変換されます。物質の吸光度は、入射光のうちどれだけが吸収され(反射や屈折されるのではなく)たかを定量化します。多くの波長での吸光度を正確に測定することで、吸収分光法により物質の同定が可能になります。この方法では、試料の一方から光を照射し、試料からあらゆる方向に出る光の強度を測定します(図1参照)。吸収の例としては、紫外可視(UV-Vis)分光法や赤外(IR)分光法があります。

図1. 白色光と光学部品を用いて特定の波長の光をフィルターし、溶液中の分子と相互作用させる吸光分光法の概念。この特定波長での溶液中の分子による吸光度は、光強度の減少として検出されます(分光光度計-出典: http://chemwiki.ucdavis.edu/)。
吸収とは、物質が取り込み通過させない光の量です。分光光度計は実際には透過率、すなわち試料を通過した光の量を測定しますが、これは電球の出力と試料を通過した光を比較することで吸収に換算されます。吸光分光法に使用できる光源は、特定の分子を標識するために用いる物質に強く依存し、電磁スペクトル全体にわたる光を利用できます。
タンパク質検出のためのUVスペクトルをカバーする産業用途は、食品分析(例えば、欧州規則に基づくエクストラバージンやバージンオイルなどのオリーブオイルの等級評価)や製薬業界の品質管理に関連しています。さらに、吸光分光法の産業用途は、水の純度評価や廃水分析、硝酸塩、亜硝酸塩、リンなど特定の有機分子の測定にも及びます。特に可視光(Vis)スペクトルを用いるこの最後の用途は興味深いものです。
生物学的応用としては、培養細菌集団の成長速度を監視しピーク濃度を特定するために600 nmでの光散乱の測定も含まれます。
単色光源(高出力LEDなど)を用いた可視吸光分光法は、WPIのLEDSpec分光光度計に採用されており、2チャネルまたは4チャネルシステムで最大7波長を使用します。LEDSpecは特定波長での高感度かつ安定した吸光度測定を低ノイズ特性で提供します。さらに、高出力LEDは安定した光源であり、ウォームアップ時間が不要で、低コストかつ長寿命です。
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