Gli studi sulla generazione di gocce sono in rapida crescita grazie ai notevoli vantaggi che questi metodi offrono per l'analisi ad alta processività di singole cellule: milioni di gocce di reazione con una singola cellula in una provetta Eppendorf equivalgono a >10.000 piastre a 96 pozzetti con una singola cellula per pozzetto.
Biochip per la generazione di gocce e gli studi di microfluidica
Le gocce vengono generate o formate controllando con precisione liquidi immiscibili (di solito acquosi e a base oleosa) tramite pompe microfluidiche in chip microfluidici dalla geometria precisa. Questo metodo è noto come generazione «passiva» di gocce (quella «attiva» utilizza mezzi elettrici, magnetici o centrifughi) e si basa generalmente su tre tipi di geometrie:
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Flusso incrociato: geometria a giunzione a T o a Y in un chip microfluidico.
Per le gocce di acqua in olio, il campione oleoso (fase continua) scorre in una direzione. Il campione acquoso (fase dispersa) confluisce nel campione oleoso in corrispondenza di una giunzione a T o a Y. Quando il campione acquoso si unisce a quello oleoso, le forze di taglio dell'olio che scorre continuamente rompono il campione acquoso formando una goccia. In questo caso, le dimensioni della goccia sono determinate dal rapporto tra le portate dei campioni oleoso e acquoso che scorrono nei canali del chip microfluidico, nonché dalla viscosità, dalla velocità e dalla tensione interfacciale del campione oleoso. La portata della fase continua (l'olio, in questo esempio) è di solito superiore a quella della fase dispersa (l'acqua). Per ottenere gocce di olio in acqua, si invertono i liquidi. |
Generazione di gocce mediante flusso incrociato: Gocce acqua-in-olio |
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Focalizzazione del flusso: geometria a giunzione "+" o a X in un chip microfluidico.
Per le gocce di acqua in olio, il campione acquoso (fase dispersa) incontra il campione oleoso (fase continua) alla giunzione, dove di solito i canali si restringono nel punto di giunzione. Come nel flusso incrociato, la portata della fase continua (l'olio, in questo esempio) è di solito superiore a quella della fase dispersa (l'acqua). In questo caso, è possibile aumentare le dimensioni delle gocce riducendo la portata della fase continua. Per ottenere gocce di olio in acqua, si invertono i liquidi. |
Generazione di gocce mediante focalizzazione del flusso: Gocce acqua-in-olio |
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Co-flusso focalizzato: il canale della fase dispersa è racchiuso all'interno di un canale della fase continua.
Quando il fluido disperso entra nella fase continua, è sottoposto alle forze di taglio del fluido della fase continua finché, prima o poi, si rompe formando una goccia per gocciolamento o a getto.
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Generazione di gocce con focalizzazione a flusso coassiale: Gocce acqua-in-olio |
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DropChip
I DropChip sono realizzati in plastica (acrilico) e hanno un ingombro di 40 mm x 50 mm (W x L). Ogni DropChip contiene:??
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Biochip Cellix Vena Delta Y1I biochip VenaDeltaY1 contengono microcanali ramificati per il doppio flusso/la doppia iniezione dei campioni. Ideali per studiare gradienti chemiotattici, doppio flusso, flusso multilaminare e diffusione. Ogni biochip contiene 4 capillari a Y in parallelo, che possono essere rivestiti con diverse molecole di adesione per studiare le interazioni recettore-ligando cellulari (cioè le interazioni cellula-matrice) in condizioni di flusso di taglio con doppia iniezione (esperimenti di chemiotassi) o per analizzare la formazione di trombi nella ramificazione del canale a Y.
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Biochip Cellix Vena Delta Y2I biochip VenaDeltaY2 contengono microcanali ramificati per il doppio flusso/la doppia iniezione dei campioni. Ideali per studiare gradienti chemiotattici, doppio flusso, flusso multilaminare e diffusione. Ogni biochip contiene 4 capillari a Y in parallelo a entrambe le estremità, che possono essere rivestiti con diverse molecole di adesione per studiare le interazioni recettore-ligando cellulari (cioè le interazioni cellula-matrice) in condizioni di flusso di taglio con doppia iniezione (esperimenti di chemiotassi) o per analizzare la formazione di trombi nella ramificazione del canale a Y.
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