Piastre per coltura rivestite con vitronectina: condizioni definite per le cellule staminali pluripotenti.
La coltura di cellule staminali pluripotenti umane (hPSC) richiede più di una superficie di supporto. Richiede costanza, controllo e idoneità all’uso clinico. La vitronectina è comunemente utilizzata per la coltura di hPSC, poiché ne favorisce la crescita e la differenziazione.
La vitronectina è una glicoproteina della matrice extracellulare (ECM) che promuove l’adesione e la sopravvivenza cellulare legandosi alle integrine. Svolge un ruolo fondamentale nei sistemi di coltura privi di componenti di origine animale e di cellule feeder, soprattutto nei laboratori che coltivano cellule staminali embrionali (ESC) o cellule staminali pluripotenti indotte (iPSC). Il FluoroDish™ da 35 mm con finestra di osservazione in vetro da 23 mm di WPI, rivestito di vitronectina, offre un ambiente biologicamente funzionale e ottimizzato per l’imaging, ideale per mantenere le cellule staminali nel loro stato più incontaminato.
Che cos’è la vitronectina e come funziona?
La vitronectina si lega ai recettori delle integrine (in particolare αVβ3 e αVβ5), essenziali per l’adesione, la distensione e l’autorinnovamento delle cellule staminali. Favorisce l’espansione delle cellule staminali senza cellule feeder, i protocolli di coltura definiti e privi di componenti di origine animale e la sopravvivenza cellulare in condizioni chimicamente definite.
A differenza delle matrici non definite come Matrigel, la vitronectina è una singola proteina ricombinante, che garantisce un elevato livello di standardizzazione e conformità normativa per la ricerca traslazionale e conforme alle buone pratiche di fabbricazione (GMP).
Utilizzi ideali delle piastre rivestite di vitronectina
La vitronectina è un’ottima scelta per lavorare con:
- iPSC o ESC umane
- Sistemi privi di cellule feeder (ad es., mTeSR1, Essential 8)
- Protocolli di differenziazione verso le linee ectodermica, mesodermica o endodermica
- Formazione di organoidi o semina su scaffold 3D
La segnalazione mediata dalle integrine aiuta a mantenere i marcatori di pluripotenza, favorisce una morfologia compatta delle colonie e garantisce la riproducibilità tra passaggi e lotti.
Perché vitronectina e FluoroDish™ sono l’abbinamento perfetto
La coltura di cellule staminali richiede spesso il monitoraggio di cellule vive, la valutazione della morfologia delle colonie e l’imaging di precisione. Il FluoroDish™ da 35 mm di WPI, con pozzetto da 10 mm, è progettato appositamente per queste attività:
- Il fondo in vetro di qualità ottica consente un imaging privo di fluorescenza e distorsioni, anche con colonie di cellule staminali delicate.
- Il pozzetto centrale da 10mm concentra l’area di coltura, riducendo i costi dei reagenti e consentendo la compatibilità con obiettivi ad alta apertura numerica.
- Il vetro ultrasottile favorisce una regolazione stabile della temperatura sulle piastre riscaldanti, mantenendo la vitalità cellulare durante l’osservazione.
Questa combinazione rende i FluoroDish™ di WPI rivestiti di vitronectina ideali per i flussi di lavoro in cui sono importanti un imaging microscopico di alta qualità, la coerenza dei campioni e dei dati e il risparmio di risorse grazie all’uso di meno terreno.
Applicazioni nella ricerca
Le piastre rivestite di vitronectina sono utilizzate per:
- Il mantenimento di cellule staminali pluripotenti in condizioni definite
- Protocolli di differenziazione diretta
- Modifica delle iPSC basata su CRISPR
- Studi sulla morfologia delle colonie e imaging
- Flussi di lavoro di medicina rigenerativa preclinica
Queste applicazioni riguardano la biologia delle cellule staminali, la scoperta di farmaci, la modellizzazione dello sviluppo e lo sviluppo di terapie cellulari.
Quando scegliere la vitronectina
Scegliete la vitronectina quando:
- Avete bisogno di conformità a condizioni prive di componenti di origine animale e di cellule feeder
- Il vostro terreno è completamente definito e privo di siero
- Lavorate con cellule pluripotenti o appartenenti a linee cellulari precoci
- Sono necessari imaging di precisione e prestazioni di coltura a lungo termine
Configurazione disponibile
WPI offre rivestimenti in vitronectina su FluoroDish™ da 35 mm con pozzetto da 10mm, fornendo una superficie definita e biologicamente funzionale per applicazioni di coltura cellulare ad alta intensità di imaging e di grande importanza.
Prossimamente: confronto diretto, scegliere la superficie giusta per le vostre cellule
Nel post conclusivo di questa serie, metteremo insieme tutti gli elementi con un confronto pratico dei cinque rivestimenti, evidenziando quale usare, quando e perché. Dalle trasfezioni a breve termine alle colture neuronali a lungo termine e ai sistemi di cellule staminali definiti, vi aiuteremo a trovare la superficie ideale per le vostre esigenze di ricerca.
Leggete Scegliere il rivestimento giusto per la piastra di coltura.
