VIDÉO : Calibration des capteurs pour l'analyseur de radicaux libres TBR4100 de WPI (NO, HPO et H2S)

[by Nikki Scafa]

Lors de l'utilisation d'un analyseur de radicaux libres TBR, des mesures précises d'un analyte nécessitent une calibration précise. La calibration des capteurs d'oxyde nitrique, de peroxyde d'hydrogène et de sulfure d'hydrogène est similaire. Les capteurs d'oxygène et de glucose WPI nécessitent des méthodes différentes qui ne seront pas abordées ici.

Avant de commencer :

Assurez-vous d'avoir les articles suivants.
Votre capteur doit être polarisé pendant la durée appropriée.
Vos solutions sont préparées comme décrit dans le manuel. (REMARQUE : Ici, nous montrerons un diaporama de liste de contrôle des articles (ci-dessous) avant de continuer la vidéo.)

	CAPTEURS	TAILLE	SOLUTION	STANDARD	Temps de polarisation
Oxyde nitrique	ISO-NOP	2 mm	0.1 M KI/ H₂SO₄	50 µM KNO₂	12 heures
	ISO-NOP007	7 mm	0.1 M CuCl₂	100 µM SNAP	≥2 heures
	ISO-NOP3005	30 mm			heure
	ISO-NOP3020	30 mm			1 heure
	ISO-NOPF200	200 mm			8+ heures
	ISO-NOPF100	100 mm			8+ heures
	ISO-NOPNM	30 mm			1 heure
Peroxyde d'hydrogène	ISO-HPO-2	2 mm	0.1 M PBS	1 mM H₂O₂	4+ heures
Peroxyde d'hydrogène	ISO-HPO-100	100 mm	0.1 M PBS	1 mM H₂O₂	≥1 heure
Sulfure d'hydrogène	ISO-H2S-2	2 mm	0.1 M PBS	1 mM H₂S	12+ heures
Sulfure d'hydrogène	ISO-H2S-100	100 mm	0.1 M PBS	1 mM H₂S	4+ heures

Cette démonstration montre les méthodes utilisées au laboratoire WPI. Nous utilisons un capteur de peroxyde d'hydrogène ISO-HPO-100.

Après que le capteur a été polarisé, utilisez une pipette pour injecter une aliquote de la solution d'étalonnage. Nous avons commencé avec 2 µL de peroxyde d'hydrogène à 1 mM. Puis, laissez passer 30 secondes pendant que LabTrax enregistre les données. La trace de données atteint un plateau.
Ensuite, injectez deux fois le volume de la première aliquote et laissez passer encore 30 secondes jusqu'à ce que vous voyiez à nouveau le plateau de la trace de données.
Continuez à doubler le volume d'injection pour trois injections supplémentaires, en laissant passer 30 secondes entre chaque injection.
Lorsque vous avez terminé, vous devriez avoir une trace de données avec 5 plateaux distincts.
En utilisant le logiciel LabTrax, déterminez la distance entre la lecture de référence et la lecture du plateau pour chaque aliquote. C'est la distance entre les deux lignes rouges, et le delta est affiché dans le coin supérieur droit de l'écran. En utilisant ces chiffres, créez une courbe d'étalonnage et déterminez le R² valeur.
Après avoir effectué cette calibration, le capteur est prêt à l'emploi.

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