Comment définir une nouvelle séquence EVOM™ Auto GxP
Le module EVOM™ Auto GxP est un complément pour le système automatisé de mesure TEER EVOM™ Auto qui garantit la conformité à la réglementation 21 CFR Partie 11 afin de satisfaire aux exigences de la FDA. L’EVOM™ Auto est utilisé pour effectuer des mesures de résistance électrique transepitheliale (TEER) lorsque vous testez la confluence cellulaire ou l’intégrité de la barrière dans le cadre d’études d’absorption de médicaments, d’ingénierie tissulaire, de modèles de maladies, de contrôle qualité des tests basés sur les cellules, et plus encore. Dans cette vidéo, nous allons créer une séquence à utiliser avec un EVOM™ Auto équipé du module GxP.
- Au démarrage du système, la fenêtre principale s’affiche. Pour créer une séquence de mesure, sélectionnez le menu Gérer la séquence. Choisissez Nouvelle séquence.
- Entrez un nom pour votre séquence, votre commentaire, et votre mot de passe client EVOM™ Auto GxP. Si vous ne souhaitez pas ajouter de commentaire, vous pouvez cocher la case Pas de commentaire. Dans ce cas, un texte par défaut apparaît dans la ligne de commentaire. Ensuite, appuyez sur le bouton Enregistrer pour continuer. Le nom de la nouvelle séquence s’affiche en haut de la fenêtre.
- Sélectionnez Gérer la séquence et choisissez votre nouvelle séquence pour afficher la fenêtre Séquence.
- Vous pouvez choisir d’afficher les valeurs de résistance mesurées ou la mesure TEER. Sélectionnez le menu Mode. Les options incluent Résistance et TEER.
- Lorsque vous sélectionnez Mode>Résistance>Plage, vous pouvez choisir la plage de résistance pour effectuer les mesures. Les options incluent 10K Ohms, 50K Ohms et 100K Ohms.
- Lorsque vous sélectionnez Mode>TEER, vous pouvez choisir la plage de résistance et la surface du puits. La surface du puits définit la surface d’un puits sur votre plaque.
- Sélectionnez votre option blanc. Cette option mesure la résistance de la première colonne, et cette valeur est utilisée comme référence pour chaque ligne. Ces valeurs sont soustraites des mesures sur la ligne correspondante pour obtenir la variation par rapport au puits de référence, afin de soustraire tout décalage ou valeur de fond.
- Pour commencer la configuration du blanc, sélectionnez le menu Blanc et choisissez Charger blanc, puis Nouveau blanc pour créer un fichier de données de référence blanc. Une fenêtre contextuelle demande un nom pour votre nouveau fichier ou ensemble de données blanc.
- Entrez un nom et appuyez sur Enregistrer. Après l’enregistrement de la séquence, le conteneur est créé avec une valeur par défaut de zéro affichée. Le nom du blanc est mis à jour dans la zone État actuel.
- Chargez une plaque de puits avec du milieu ou du tampon dans la première colonne de puits et placez-la dans la zone de la plaque sur l’automate.
- Pour mesurer les blancs et charger ces informations dans l’ensemble de données blanc, sélectionnez le menu Blanc et choisissez Remplir blanc. Appuyez sur Continuer pour commencer. L’automate déplace le réseau d’électrodes vers la colonne 1 et mesure les huit valeurs consécutivement. Les valeurs s’affichent dans la zone Blanc de la fenêtre au fur et à mesure de leur acquisition.
- Après la fin de la mesure, un message apparaît. Appuyez sur Continuer pour terminer la séquence.
- Configurez le temps de puits en sélectionnant le menu Temps de puits. Le temps de puits est le nombre de secondes pendant lesquelles les électrodes restent immergées dans un puits avant la prise de mesures. Entrez le temps souhaité en secondes et appuyez sur Enregistrer.
- Les trois stations de rinçage peuvent être utilisées pour rincer, désinfecter, stabiliser ou toute autre fonction désirée. Configurez le programme de rinçage en sélectionnant Rinçage dans le menu. La fenêtre Temps de rinçage apparaît. Vous pouvez régler le temps de rinçage et le temps d’attente dans chaque station de rinçage à l’aide des commandes bascule sur chaque champ. Trois boutons bascule dans la section Options de rinçage à droite de la fenêtre vous permettent de définir quand les paramètres de rinçage et d’attente sont appliqués. Le temps de rinçage est la durée pendant laquelle le réseau d’électrodes reste immergé dans la station de rinçage. Le temps d’attente est la durée pendant laquelle le réseau d’électrodes attend au-dessus de la station de rinçage pour laisser s’égoutter les liquides restants.
- Après avoir défini le programme dans la fenêtre Temps de rinçage, appuyez sur Enregistrer pour sauvegarder les modifications, puis revenez à la fenêtre Séquence.
- Appuyez sur l’icône Enregistrer en bas à droite de la fenêtre Séquence pour sauvegarder la séquence. Dans la fenêtre contextuelle, entrez votre commentaire et votre mot de passe client EVOM™ Auto GxP.
- Maintenant que la séquence est définie, nous pouvons l’utiliser dans une plaque.
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