Électroporation vs Transfection d'Embryons de Poisson Zèbre

Électroporation vs Transfection embryonnaire de poisson zèbre

L’électroporation est une méthode de transfection permettant d’introduire des substances telles que l’ADN, l’ARN ou du matériel protéique dans les cellules par l’application d’une impulsion électrique. Bien que l’électroporation soit une méthode efficace pour des cellules telles que bactériennes, de levure, de mammifères, végétales, d’insectes ou primaires, certaines cellules sont plus sensibles et cette méthode peut alors affecter négativement leur viabilité globale. Par exemple, pour une application populaire impliquant la transfection embryonnaire de poisson zèbre, il n’est pas recommandé d’utiliser l’électroporation. Plusieurs raisons expliquent pourquoi cette méthode n’est pas bénéfique pour ces types cellulaires embryonnaires et leur viabilité, notamment le stade de développement de l’embryon, la sensibilité de l’embryon et le chorion de l’embryon.

Stade de développement

Les embryons de poisson zèbre se développent rapidement, la gastrulation commençant environ 6 heures après la fécondation, et l’éclosion ayant lieu après 2 jours sous forme de larves nageant librement. L’efficacité de l’électroporation peut varier selon le stade de développement de la cellule. L’électroporation peut être moins efficace à certains stades du développement, limitant ainsi l’utilité de cette méthode pour une transfection réussie.

Cependant, il a été démontré qu’au stade de clivage, l’électroporation peut être utilisée efficacement (Zhang, et al. 2020). Il est important de noter que selon le matériel à délivrer et le résultat souhaité, ce stade de transfection des embryons de poisson zèbre peut ne pas être préférable.

Sensibilité

Les embryons de poisson zèbre sont petits, fragiles et sensibles aux stress extérieurs. Il a été constaté que les impulsions électriques affectent négativement le développement et, encore une fois, la viabilité. Leur petite taille et leur fragilité rendent l’électroporation une méthode risquée pour la transfection.

Chorion

Les embryons de poisson zèbre sont enfermés dans un chorion protecteur qui sert de barrière aux molécules périphériques. Le chorion est assez imperméable, ce qui nécessite une tension plus élevée pour ouvrir les canaux via l’électroporation, une tension souvent préjudiciable à la viabilité cellulaire.

Techniques alternatives

Les méthodes alternatives pour réussir la transfection incluent la microinjection standard basée sur la pression. Il a été démontré que la transgénèse de vecteurs utilisant Tol2 ou d’autres systèmes basés sur les transposons favorise une expression stable. Une approche standard de microinjection basée sur la pression offre une plus grande fiabilité, précision et contrôle global lors de la délivrance de matériel aux embryons, souvent préférée à l’électroporation dans les études sur le poisson zèbre. Découvrez la gamme de systèmes de microinjection basés sur la pression de WPI pour tous vos besoins de modulation embryonnaire de poisson zèbre.

Bien que l’électroporation ne soit pas souvent idéale pour une utilisation chez les embryons de poisson zèbre, elle peut être mise en œuvre pour manipuler des cellules ou tissus dérivés d’embryons ou d’adultes de poisson zèbre dans certains contextes de recherche. Les utilisateurs finaux doivent faire preuve de prudence lors de l’élaboration d’un protocole utilisant l’électroporation pour les modèles de poisson zèbre afin d’optimiser les résultats de leur application.

Référence

Zhang, C., Ren, Z. & Gong, Z. (2020). Expression transgénique et édition du génome par électroporation des embryons de poisson zèbre. Mar Biotechnology, 22, 644–650. https://doi.org/10.1007/s10126-020-09985-0