VIDÉO : Comment créer un fichier de plaque sur l'EVOM™ Auto
Le EVOM™ Auto automatise les mesures de TEER dans des monocouches épithéliales ou endothéliales cultivées sur des plaques 96 puits à haut débit, en utilisant notre technologie innovante EVOM™, mesurant qualitativement la santé de la monocouche cellulaire et quantitativement la confluence cellulaire en déterminant une augmentation ou un plateau de la résistance tissulaire.
La vidéo ci-dessous vous montre comment créer un fichier de plaque sur le EVOM™ Auto :
1. Pour créer une séquence de mesure, sélectionnez le menu Gérer la séquence depuis l'écran d'accueil. Une liste des séquences existantes s'affiche, et vous pouvez ouvrir et modifier n'importe quelle séquence existante ou sélectionner Nouvelle séquence pour en créer une nouvelle. Si vous sélectionnez Nouvelle séquence, une fenêtre contextuelle vous permet de nommer la séquence.
2. Vous pouvez choisir d'afficher les valeurs de résistance mesurées ou la mesure TEER. TEER est une valeur calculée basée sur la surface du puits et la résistance mesurée.
Sélectionnez le menu Mode. Les options incluent Résistance et TEER.
Lorsque vous sélectionnez Mode>Résistance>Plage, vous pouvez choisir la plage de résistance pour effectuer les mesures :
- 10K Ohms
- 50K Ohms
- 100K Ohms
La zone État actuel sur le côté droit de la fenêtre se met à jour en conséquence.
3. Lorsque vous sélectionnez Mode>TEER, vous pouvez choisir la plage de résistance et la surface du puits. La surface du puits définit la surface d'un puits sur votre plaque.
4. Sélectionnez votre option blanc. Cette option mesure la résistance de la première colonne (puits A1, B1, C1...H1), et cette valeur est utilisée comme référence pour chaque ligne. Chaque valeur dans le tableau Valeur Blanc mesure la résistance de la paire d'électrodes spécifique utilisée pour mesurer chaque colonne sur un puits contenant uniquement du tampon. Les valeurs 1 à 8 sont soustraites des mesures sur la ligne correspondante pour obtenir la variation par rapport au puits de référence.
5. Pour démarrer la configuration du blanc, sélectionnez le menu Blanc et choisissez Charger Blanc, puis Nouveau Blanc pour créer un conteneur pour les données de référence du blanc.
Après la sauvegarde de la séquence, le conteneur est créé avec une valeur par défaut de zéro. Le nom du blanc est mis à jour dans la zone État actuel.
6. Ensuite, chargez une plaque de puits avec du milieu ou du tampon dans la première colonne de puits et placez-la dans la zone HTS Well Plate sur l'automate d'échantillonnage.
7. Pour mesurer les blancs et charger ces informations dans le conteneur blanc, sélectionnez le menu Blanc et choisissez Remplir Blanc.
L'automate d'échantillonnage déplace alors le réseau d'électrodes vers la colonne 1 et mesure les huit valeurs. Les valeurs sont affichées dans la zone Blanc de la fenêtre au fur et à mesure de leur acquisition.
Après la fin de la mesure, vous pouvez rééchantillonner les blancs autant de fois que vous le souhaitez, maintenant ou plus tard, en chargeant ce conteneur et en relançant l'option Remplir Blanc.
8. Configurez le temps par puits en sélectionnant le menu Temps par puits. Le temps par puits est le nombre de secondes pendant lesquelles les électrodes sont immergées dans chaque puits lors des mesures. Entrez le temps souhaité en secondes et appuyez sur Enregistrer. La valeur mise à jour s'affiche dans la zone État actuel de la fenêtre.
9. Les trois stations de rinçage peuvent être utilisées pour rincer, désinfecter, stabiliser ou toute autre fonction souhaitée. Configurez le planning de rinçage en sélectionnant Rinçage dans le menu. Vous pouvez régler le temps de rinçage et le temps d'attente dans chaque station de rinçage à l'aide des commandes bascule dans chaque champ. Trois boutons bascule dans la section Options de rinçage sur le côté droit de la fenêtre vous permettent de voir quand les paramètres de rinçage et d'attente sont appliqués. Vous pouvez choisir n'importe quelle combinaison de ces options.
10. Après avoir défini le planning dans la fenêtre Temps de rinçage, appuyez sur Enregistrer pour sauvegarder les modifications, puis revenez à la fenêtre Séquence.
11. Maintenant que la séquence est définie, elle peut être utilisée dans une plaque. Appuyez sur le bouton Retour pour revenir à la fenêtre principale.
