VIDÉO : Un chercheur compare l'EVOM3 avec une chambre d'Ussing
par Benjamin Dubansky, PhD, Physiologiste/chercheur animalier
Une chambre d'Ussing est utilisée pour réaliser des études de barrière sur un tissu épithélial excisé. Des mesures similaires peuvent être effectuées dans des plaques à puits à l'aide d'un EVOM, un appareil de mesure TEER de la série EVOM, utilisé pour les tissus épithéliaux cultivés jusqu'à confluence dans un puits de culture cellulaire. Bien que les mesures EVOM soient uniquement qualitatives, votre débit d'analyse est bien plus élevé avec un EVOM3. Les EVOM sont portables et beaucoup plus économiques qu'une chambre d'Ussing. Ici, Ben Dubansky, PhD, explique les différences entre les EVOM et les chambres d'Ussing.
Le EVOM est un type spécial de voltmètre pour mesurer les propriétés électriques à travers une couche de cellules en culture ou une membrane biologique. Nous mesurons la TEER (TER) - Résistance électrique transepitheliale. Le EVOM3 nous permet de zoomer et de mesurer soit la résistance, soit la tension à travers ces membranes ou cellules en culture.
EVOM3 versus chambre d'Ussing
Tissu explanté ou tissu cultivé
EVOM3 ressemble à la chambre d'Ussing, mais pas tout à fait. La chambre d'Ussing produit un champ uniforme à travers la membrane, ce qui vous permet d'appliquer une tension constante à travers l'épithélium et de surveiller de manière plus uniforme toute la feuille d'épithélium en même temps. La chambre d'Ussing est vraiment destinée au tissu explanté. Par exemple, vous pouvez couper un morceau d'intestin et le cultiver dans une chambre d'Ussing pour étudier le transport ou les propriétés de barrière, comme je viens de le décrire.
Échantillon unique ou haut débit
Le principal inconvénient d'une chambre d'Ussing est que vous ne pouvez analyser que quelques échantillons à la fois. Une chambre d'Ussing n'est définitivement pas une plaque à 24 puits. Il existe des moyens d'adapter le EVOM3 pour obtenir des données similaires à celles d'une chambre d'Ussing avec un débit plus élevé. Bien que le EVOM3 ne soit pas aussi précis qu'une chambre d'Ussing, c'est toujours une plateforme solide avec un débit bien supérieur à celui d'une chambre d'Ussing.
Améliorer la précision du EVOM3 avec EndOhm
La façon la plus simple d'utiliser le EVOM3 est de prendre vos mesures pendant une expérience pour surveiller les changements qui pourraient survenir au cours d'un traitement. Ou vous pouvez utiliser la configuration électrode EndOhm . Bien que le EVOM3 ne soit pas aussi précis que la chambre d'Ussing, vous pouvez toujours obtenir des données similaires à celles d'une chambre d'Ussing avec la série EVOM, en particulier les nouveaux modèles (EVOM3).
Si vous avez besoin de plus de précision, vous pouvez utiliser la configuration électrode EndOhm, qui se branche sur le EVOM3. Pour cela, vous devez retirer l'insert et le placer dans une chambre avec des électrodes parfaitement alignées, un peu comme une chambre d'Ussing. C'est assez bien conçu pour obtenir des mesures rapides et cohérentes. Vous devrez déplacer vos inserts. C'est un processus plus lent, mais si vous faites un bon travail de nettoyage et maintenez votre travail stérile, les électrodes EndOhm sont impressionnantes. Elles sont un peu plus lentes, donc le débit est moindre, mais bien plus rapide qu'une chambre d'Ussing. Et vous utilisez des cellules cultivées.
Bien que le EVOM3 ne soit pas aussi précis qu'une chambre d'Ussing, c'est toujours une plateforme solide avec un débit bien supérieur à celui d'une chambre d'Ussing. Vous obtenez des données qualitatives solides en utilisant un appareil portable EVOM3 à une fraction du coût d'un système complet d'Ussing.
