Cuando un bolo más grande es mejor

Comprendiendo la escala de las mediciones

En microinyección, un bolo se refiere a un volumen discreto y medido de solución entregado en un objetivo biológico específico [como una célula, tejido, órgano o espacio anatómico localizado] en un solo evento de inyección. El bolo contiene la sustancia activa (por ejemplo, tintes, ácidos nucleicos, fármacos o células) suspendida en un fluido portador, y su volumen se controla típicamente en la escala de nanolitros a microlitros usando sistemas de microinyección de precisión.

El tamaño del bolo es un parámetro experimental crítico porque influye directamente en la distribución, concentración y respuesta biológica. En muchos casos, se prefieren bolos más pequeños para minimizar la alteración mecánica, prevenir fugas y mantener una localización precisa, especialmente en microinyección de una sola célula o embrionaria.

Sin embargo, más grande es mejor cuando el objetivo experimental requiere una cobertura tisular más amplia, exposición sostenida o superar la difusión y eliminación rápidas. Los bolos más grandes pueden mejorar la detectabilidad de la señal en estudios con trazadores, asegurar una concentración suficiente de reactivo en tejidos densos o vascularizados, o aumentar la captación al dirigirse a espacios extracelulares o compartimentados. También son útiles para compensar efectos de dilución en estructuras más grandes o cuando se necesita una concentración umbral para provocar una respuesta fisiológica medible.

En última instancia, el tamaño óptimo del bolo equilibra eficiencia de entrega, impacto biológico e integridad del tejido, y debe adaptarse al sistema objetivo y al objetivo experimental.

Primero, consideremos los volúmenes.

  • Un mililitro (mL) es una milésima parte del volumen de un litro (L) o 10-3L
  • Un microlitro (µL) es una milésima parte del volumen de un mL (10-6L)
  • Un nanolitro (nL) es una milésima parte del volumen de un µL (10-9L)
  • Un picolitro (pL) es una milésima parte del volumen de un nL (10-12L)

Esto se representa gráficamente a la derecha. Observe que el mL es un billón de veces más grande que el picolitro. La tabla (a la derecha) muestra que el lado de un cubo con un volumen de 1 mL mide 1 cm de largo. De igual manera, el lado de un cubo con un volumen de 1 pL mide 10 µm de largo. Solo para comparación, muestra que el diámetro de una esfera con un volumen de 1 mL es 1.24 cm, y el volumen de una esfera con un volumen de 1 pL es 12.4 µm.

Con estas comparaciones de volumen en mente, consideremos algunas de las opciones disponibles para bombas de microinyección.

RANGO   BOMBAS APLICACIONES
Rango de mililitros 10-3L Bombas de jeringa
Bombas peristálticas
Aplicaciones generales de bombeo
Microlitro 10-6L UMP3 Inyección en tejido/órgano/cuerpo
Microperfusión
Nanolitro 10-9L Nanolitro2010 Inyección celular
Picolitro 10-12L PicoBombas neumáticas Inyección de ADN

Las especificaciones para bombas WPI pueden encontrarse en el artículo "Cómo elegir la bomba correcta."

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