Detección de Absorbancia
Detección de compuestos orgánicos en el análisis de agua
La absorción de luz se relaciona con la energía de un fotón que es captada por los electrones del átomo de la sustancia. La energía electromagnética se transforma en energía interna de la sustancia absorbente. La absorbancia de una sustancia cuantifica cuánto de la luz incidente es absorbida por ella (en lugar de ser reflejada o refractada). Mediciones precisas de la absorbancia en muchas longitudes de onda permiten la identificación de una sustancia mediante espectroscopía de absorción, donde una muestra se ilumina desde un lado y se mide la intensidad de la luz que sale de la muestra en todas las direcciones (ver Fig. 1). Algunos ejemplos de absorción son la espectroscopía ultravioleta-visible (UV-Vis) o la espectroscopía infrarroja (IR).
Fig 1. Concepto de espectroscopía de absorbancia usando luz blanca y componentes ópticos para filtrar la luz de una longitud de onda específica que interactúa con las moléculas en la solución. La absorbancia en esta longitud de onda específica por las moléculas en las soluciones se detecta como una disminución en la intensidad de la luz (Espectrofotómetro-Fuente: http://chemwiki.ucdavis.edu/).
La absorción es la cantidad de luz que una sustancia absorbe y no permite que pase a través de ella. Los espectrofotómetros en realidad miden la transmisión, la cantidad de luz que atraviesa una muestra, pero esto se convierte en absorción comparando la salida de la lámpara con la luz que ha pasado a través de la muestra. Las fuentes de luz que se pueden usar para la espectroscopía de absorbancia dependen en gran medida de la sustancia utilizada para marcar una molécula específica y pueden abarcar todo el espectro electromagnético de la luz.
Las aplicaciones industriales que cubren el espectro UV para la detección de proteínas están relacionadas con el análisis de alimentos (por ejemplo, caracterizar la clasificación del aceite de oliva como extra virgen, virgen, etc., según lo establecido por las regulaciones europeas) o el control de calidad en la industria farmacéutica. Además, las aplicaciones industriales de la espectrofotometría de absorbancia incluyen la caracterización de la pureza del agua o el análisis de aguas residuales, además de la determinación de moléculas orgánicas específicas como nitrato, nitrito o fósforo. Esta última aplicación es interesante cuando se usa el espectro de luz visible (Vis).
La aplicación biológica también abarca la medición de la dispersión de luz a 600 nm para monitorear la tasa de crecimiento de una población bacteriana cultivada e identificar la concentración máxima.
La espectrofotometría de absorbancia Vis usando fuentes de luz monocromáticas, como LED de alta potencia, se utiliza en el espectrofotómetro LEDSpec de WPI, como sistema de 2 o 4 canales, usando hasta siete longitudes de onda. El LEDSpec proporciona una medición de absorbancia altamente sensible y estable con características de bajo ruido para una longitud de onda específica. Además, los LED de alta potencia ofrecen una fuente de luz estable, sin tiempos de calentamiento, son económicos y tienen una larga vida útil.
Si tiene alguna pregunta, por favor contacte a WPI al 941.371.1003 o technicalsupport@wpiinc.com.
