Wie man eine neue EVOM™ Auto GxP-Sequenz definiert

Das EVOM™ Auto GxP Modul ist eine Erweiterung für das EVOM™ Auto automatisierte TEER-Messsystem, die die Einhaltung von 21 CFR Teil 11 sicherstellt, um FDA-Anforderungen zu erfüllen. Das EVOM™ Auto wird verwendet, um transepitheliale elektrische Widerstandsmessungen (TEER) durchzuführen, wenn Sie die Zellkonfluenz oder die Barriereintegrität testen, beispielsweise bei Studien zur Arzneimittelabsorption, Gewebezüchtung, Krankheitsmodellen, der Qualitätskontrolle zellbasierter Assays und mehr. In diesem Video erstellen wir eine Sequenz zur Verwendung mit einem EVOM™ Auto, das das GxP-Modul besitzt.

Wenn das System startet, wird das Hauptfenster angezeigt. Um eine Messsequenz zu erstellen, wählen Sie das Menü Sequenz verwalten. Wählen Sie Neue Sequenz.
Geben Sie einen Namen für Ihre Sequenz, Ihren Kommentar und Ihr EVOM™ Auto GxP Client-Passwort ein. Wenn Sie keinen Kommentar hinzufügen möchten, können Sie das Kontrollkästchen Kein Kommentar auswählen. In diesem Fall erscheint ein Standardtext in der Kommentarliste. Drücken Sie dann die Schaltfläche Speichern, um fortzufahren. Der neue Sequenzname wird oben im Fenster angezeigt.
Wählen Sie Sequenz verwalten und dann Ihre neue Sequenz, um das Sequenzfenster anzuzeigen.
Sie können wählen, ob die gemessenen Widerstandswerte oder die TEER-Messung angezeigt werden sollen. Wählen Sie das Menü Modus. Optionen sind Widerstand und TEER.
Wenn Sie Modus>Widerstand>Bereich auswählen, können Sie den Widerstandsbereich für die Messungen wählen. Optionen sind 10K Ohm, 50K Ohm und 100K Ohm.
Wenn Sie Modus>TEER auswählen, können Sie den Widerstandsbereich und die Brunnenfläche wählen. Die Brunnenfläche definiert die Oberfläche eines Brunnens auf Ihrer Platte.
Wählen Sie Ihre Leerwertoption. Diese Option misst den Widerstand der ersten Spalte, und dieser Wert wird als Basislinie für jede Reihe verwendet. Diese Werte werden von den Messungen der entsprechenden Reihe subtrahiert, um die Änderung vom Basisbrunnen zu erhalten und eventuelle Offset- oder Hintergrundwerte zu eliminieren.
Um die Leerwert-Einrichtung zu starten, wählen Sie das Menü Leerwert und dann Leerwert laden, gefolgt von Neuer Leerwert, um eine neue Basisdaten-Datei zu erstellen. Ein Popup fragt nach einem Namen für Ihre neue Leerwertdatei oder Ihren neuen Datensatz.
Geben Sie einen Namen ein und drücken Sie Speichern. Nachdem die Sequenz gespeichert wurde, wird der Container mit dem Standardwert Null angezeigt. Der Leerwertname wird im Bereich Aktueller Zustand aktualisiert.
Laden Sie eine Wellplatte mit Medium oder Puffer in die erste Spalte der Brunnen und platzieren Sie sie im Wellplattenbereich des Autosamplers.
Um die Leerwerte zu messen und diese Informationen in den Leerwert-Datensatz zu laden, wählen Sie das Menü Leerwert und dann Leerwert füllen. Drücken Sie Weiter, um zu beginnen. Der Autosampler bewegt die Elektrodenanordnung zur Spalte 1 und misst alle acht Werte nacheinander. Die Werte werden im Leerwertbereich des Fensters angezeigt, während sie erfasst werden.
Nach Abschluss der Messung erscheint eine Meldung. Drücken Sie Weiter, um die Sequenz abzuschließen.
Stellen Sie die Brunnenzeit ein, indem Sie das Menü Brunnenzeit auswählen. Die Brunnenzeit ist die Anzahl der Sekunden, die die Elektroden in einem Brunnen eingetaucht bleiben, bevor die Messungen durchgeführt werden. Geben Sie die gewünschte Zeit in Sekunden ein und drücken Sie Speichern.
Die drei Spülstationen können zum Spülen, Desinfizieren, Stabilisieren oder für andere gewünschte Funktionen verwendet werden. Konfigurieren Sie den Spülplan, indem Sie im Menü Spülen auswählen. Das Fenster Spülzeit erscheint. Sie können die Spülzeit und die Wartezeit in jeder Spülstation mit den Umschaltreglern in den jeweiligen Feldern einstellen. Drei Umschaltknöpfe im Bereich Spüloptionen auf der rechten Seite des Fensters ermöglichen es Ihnen, festzulegen, wann die Spül- und Warteparameter angewendet werden. Die Spülzeit ist die Dauer, in der die Elektrodenanordnung in der Spülstation eingetaucht bleibt. Die Wartezeit ist die Dauer, in der die Elektrodenanordnung über der Spülstation wartet, um verbleibende Flüssigkeiten abtropfen zu lassen.
Nachdem der Plan im Fenster Spülzeit eingestellt wurde, drücken Sie Speichern, um die Änderungen zu sichern, und kehren Sie dann zum Sequenzfenster zurück.
Drücken Sie das Speichern-Symbol unten rechts im Sequenzfenster, um die Sequenz zu speichern. Geben Sie im Popup-Fenster Ihren Kommentar und Ihr EVOM™ Auto GxP Client-Passwort ein.
Jetzt, da wir die Sequenz definiert haben, können wir sie in einer Platte verwenden.