6.5 mmインサート用TEER対応、着脱式ブレード付きSTX4 EVOM™電極

特長

• 電極ブレードは交換可能です。数か月または数年使用するうちに、培地やサンプル由来の付着物が電極に蓄積し、測定値が不安定になり始めることがあります。その場合、電極全体を交換せずにブレードを交換できます。

  注：使用後に定期的または毎日洗浄することで、電極ブレードの使用寿命を延ばせます。

• 電極先端には特殊コーティングが施されており、正常に機能させるために漂白剤や次亜塩素酸ナトリウムで塩化処理する必要はなく、塩化処理の影響も受けません。従来モデル（STX2-PLUS電極）では、機能を維持するために塩化処理が不可欠でした。

STX4電極の検知領域である電極先端には、塩化処理が不要な特殊コーティングが施されています。

• STX4の電極先端（有効測定領域）は、STX2-PLUSより短くなっています。特殊コーティングが施されているため、STX2-PLUSのように広い面積は必要ありません。そのため、電極先端を完全に浸して安定したTEER測定値を得るために必要な頂端側（インサート上部）および基底外側の液量（培地量）は、STX2-PLUSより少なくて済みます。

• STX4電極は、24ウェルのハンギング式細胞培養インサート（例：Corning 3470）にぴったり合い、その上部に吊り下げたままにできます。これにより、手を使わずに操作でき、測定精度がさらに向上します。

• STX4電極は、STX2-PLUSに似た電極設計により、STX2またはSTX3で見られる、電極の位置決めによるばらつきを排除または最小化し、測定精度が向上しています。STX2またはSTX3の電極は手持ち式で、柔軟な設計のため傾きやすく、測定中に2枚の電極ブレード間の距離が変化します。STX2またはSTX3を使用して同じサンプル群で安定した一貫性のある値を得るのは困難です。STX2またはSTX3のユーザーは通常、同じサンプルを複数回測定し、平均値を使用します。STX4電極では、同じサンプルを複数回測定する必要はありません。

• STX4電極はシールドケーブルを備えており、電極本体の金属部分もシールド機構に接続されています。電気機器や携帯電話からの干渉を最小限に抑える、または排除することで、TEER測定値と読み取り値が安定し（変動せず）、干渉の影響を受けないようシールドします。

メリット

• 交換可能なブレード – 新しいSTX4電極は、電極ブレードを交換できます。

• 塩化処理不要 – 電極先端には特殊コーティングが施されており、上皮細胞培養などの細胞層のTEER測定で電極を正常に機能させるための塩化処理（メンテナンス作業）は不要です。STX2-PLUSでは塩化処理が必要でした。

• 必要な液量が少ない – この電極は、先端を浸して安定した測定値を得るために必要な液量が、STX2-PLUS電極よりも少なくて済みます。

• ハンズフリー操作 – STX4電極は、24ウェルの吊り下げ式トランスウェル細胞培養ウェルプレートにぴったり収まり、トランスウェルの上部に吊り下げたまま使用できるため、ハンズフリーで操作できます。

• より高い精度 – STX4電極は、STX2電極で見られる電極間隔や位置の変化によるばらつきを抑えるため、TEER測定の精度が向上します。

• 高周波干渉（RFI）を遮断 – STX4電極にはシールドケーブルが備わっており、TEER測定値に影響する電気機器や携帯電話からの干渉を除去または最小限に抑えます。

STX4電極はウェルに載せてハンズフリーで使用でき、調整リングを使って電極ブレードをウェル内の適切な位置に配置できます。ブレードは溶液中に吊り下げられ、膜や細胞培養ウェルプレートの底面には触れません。

注：旧型のEVOM2でTEER測定の精度を高めるには、STX2またはSTX3を新しいSTX4に交換してください。STX4は、別売りのEVM-AC-02-01-01アダプターを使用することで、EVOM2（旧モデル）と併用できます。

STX2-PLUSからの主なSTX4の改良点

• STX4は必要な液量が少なく、リソースを節約できます。

• STX4はメンテナンスの手間が少なく、時間を節約できます。塩化処理は不要です。

• 電極ブレードはユーザーが交換できるため、STX4は長期的に見るとコスト効率に優れています。

 

詳細については、以下の表をご覧ください（STX4とSTX2-PLUSの相違点と共通点）。

種類	STX2-Plus	STX4
安定した測定に必要な液量	STX2-PLUSで安定した測定値を得るには、長い検知領域を完全に浸すため、サンプルあたりの液体（培地）量を多くする必要があります。 使用量の例：Corning 3470、24ウェルトランスウェルの場合、STX2-PLUSには上部（頂端側）培地が最低300 µL、下部（基底側）培地が最低850 µL必要です。	STX4で安定した正確な測定値を得るには、サンプルあたりの液体（培地）量を少なくできます。STX4は検知領域が短く、特殊コーティングが施されているため、STX2-PLUSより少ない液量で使用できます。STX4で培地の使用量を減らすことで、リソースを節約できます。 使用量の例：Corning 3470、24ウェルトランスウェルの場合、STX4には頂端側培地が最低150 µl、基底側培地が最低500 µl必要です。
塩化処理（ユーザーメンテナンス）が必要	はい、重要です。 毎日使用する場合は、電極先端を3～6%の次亜塩素酸ナトリウムに10分間浸して塩化処理してください（その後、DI水ですすぎます）。これにより電極が正常に機能します。	いいえ、必要ありません。 電極を塩化処理する必要はありません。（塩化処理をしても機能に影響はありません。）電極の検知部には特殊コーティングが施されており、正常に機能します。ユーザーによるメンテナンスが少なくて済み、時間を節約できます。
ユーザー交換式ブレード （サンプルに直接接触し、検知部を含むブレードです。）	いいえ。 ブレードは取り外せません。	はい。 ブレードを交換できるため、長期的にはSTX4のコスト効率が高くなります。
用途	• 24ウェルのトランスウェル細胞培養プレートに最適。 • 抵抗値およびミリボルトの測定に使用。	STX2-PLUSと同じ
EVOM Manualまたは旧バージョンのEVOM3と直接接続	はい	はい
EVOM2、EVOM、Millicell ERS-2、ERSとの互換性（EVM-AC-02-01-01アダプターを使用）	はい	はい

 

 

資料

ブレード交換式STX4電極取扱説明書

インサート／ウェルプレート対応表

動画

EVOM電極をアップグレードする7つの理由-新しいSTX4のご紹介

 

 

EVOM3で使用するSTX4電極ブレードの交換方法

 

よくある質問

STX4電極ブレードの先端は、使用期間中または保管中に黒ずむ傾向がありますか？

はい、正常な現象です。STX4の電極先端は黒ずむ傾向があります（外観上の変化）が、電極や電極ブレードの機能には影響しません。

STX4電極ブレード先端の色は、外側と内側で大きく異なることがありますか？

はい、正常な現象（外観上の変化）であり、2枚の電極ブレード間を電流が流れる経路によるものです。一般に、EVOMから電流を流す際に外側の電極が使われるため、電極ブレード先端の外側はより黒ずむ傾向があります（図29）。一方、電流が流れないため、電極ブレード先端の内側は比較的白っぽい色（先端の色）のままです。これらの内側電極（電極ブレード先端の内側）は、印加電流に応じた変化（電圧）の検出に使われます。先端の色に見られるこの違い、つまり内側と外側の不一致は、電極ブレードや電極の実際の機能に影響しません。   

STX4 電極先端の黒ずみや、保管中または一定期間使用した後に電極ブレードの内側と外側で色に大きな違いが生じることは、正常とみなされます。

注：WPIでは、すべての電極ブレード（特に先端）を個別に特別な処理でコンディショニングし、製造した各電極ブレードおよびSTX4電極が正常に機能することを確認しています。

サンプルにSTX4電極を入れているのに、EVOM Manualにダッシュが表示されたり、測定値が不安定になったりするのはなぜですか？

電極が空気中にある、または液体に部分的にしか浸かっていない場合、不安定な測定値が記録され、ダッシュが表示されることがあります。電極の先端部分（検出領域）は、液中に完全に浸した状態に保つ必要があります。電極チップが完全に浸かっていない場合も、不安定な測定値が表示されることがあります。両方の電極ブレードのチップが完全に浸かるよう、頂端側および基底外側の液量を選んでください。 

長さ調整リングを時計回りに回すと、電極ブレードをサンプルのより深い位置まで入れることができ、電極チップを液中に完全に浸した状態に保てる場合があります。 

STX4電極ブレードの露出長は、調整リングを回して調節できます。

測定中は、両方のブレードにある電極の検出チップを、導電性の液体（細胞培養液またはバッファー）に完全に浸した状態にしてください。安定した測定値を得るには、十分な頂端側および基底外側の液量が必要です。

電極は毎日洗浄する必要がありますか？

はい。毎日の使用後は、電極を洗浄して自然乾燥させ、乾燥した状態で保管することが非常に重要です。電極ブレードを長期間正常に機能させるために必要です。詳しくは、STX4取扱説明書の「メンテナンス」の項をご覧ください。

WPIが推奨する、その他の電極の取り扱い上の注意事項はありますか？

1. 電極は必ず本体を持って持ち上げ、ケーブルを持たないでください。ケーブルを持つと、内部の接続部が徐々に物理的に破損するおそれがあります。

   	A. 電極をケーブルで持たないでください。（誤った取り扱い方）
   	B. 赤い矢印で示されたプラスチック部分を持ってください。（正しい取り扱い方）

2. 液体に浸す深さ、または液体を噴霧する範囲は、下の画像で矢印が示す最大レベルより下にしてください。液体が内部に入り、ケーブルやコネクターまで達しないようにしてください。電極の残りの部分は、イソプロパノールまたはエタノールを噴霧したペーパータオルで拭くことができます。（電極に直接噴霧しないでください。）

   液体に浸すのは、先端からこの線まで（最大）にしてください。電極の残りの部分は、湿らせたペーパータオルで拭くことができます。

使用しているインサートやトランスウェルはSTX4電極に対応していますか？

STX4電極は、一般的に使用されている24ウェルのハンギングインサート（Corning、Millipore、Greinerなど）に最適です。他のほとんどの24ウェルインサートおよび12ウェルインサートにも使用できます。12ウェルインサートの場合、測定中は電極を手で持つか、手で支える必要があります。対応するインサートの一覧はこちら、またはSTX4取扱説明書の「付録B：対応するインサートおよびプレート」に記載されています。

サンプルの液量を増やしたり変更したりすると、抵抗値は変わりますか？

はい。生の抵抗値は変化することが予想されます。ただし、サンプル値（細胞を含むトランスウェル）からブランク値（細胞を含まないブランクのトランスウェル）を差し引いてください。これにより、液量を増やしたサンプルから、液量を増やしたブランク値を差し引けます。そのため、液量の増加による抵抗値の変化は除外されます。実験では、すべてのサンプルで同じ液量を一貫して使用してください。

電気抵抗と経上皮電気抵抗（TEER）は同じものですか？

いいえ。測定した抵抗値に膜の適切な表面積を掛けて、TEERを計算します。たとえば、6.5 mm（24ウェルプレート）のインサートの測定値が565 Ωの場合、TEERは次のようになります。

 565 Ω × 0.33 cm² = 186.45 Ω-cm²

[24ウェルプレート（6.5 mm インサート）の場合、面積 = 0.33 cm²、12ウェルプレート（12 mm インサート）の場合、面積 = 1.13 cm²です。特定のインサートに適用される膜面積の正確な情報については、該当するインサート/トランスウェル（Millipore、Corningなど）のメーカー技術資料を参照してください。] 

より安定したTEER測定結果を得るために、管理できる実験パラメーターを教えてください。

• 温度がTEER値に影響することが知られています。安定した値を得るには、サンプルの温度を一定に保つことをおすすめします。細胞を含むインサートをセットしたウェルプレートをインキュベーターから取り出し、測定前に層流フード内で15-20分間置いて室温で安定させることをおすすめします。この時点で、すべてのサンプルがほぼ同じ室温になります。

• トランスウェルに液体を加えた後、測定を始める前に15分間待ちます。インサートの内側と外側の液面は同じ高さになりやすく、測定値がより安定します。 

• 頂端側（細胞培養用インサートの上部）と基底側（インサートの下部）の両方で、イオン濃度が同じ導電性液体を使用することをおすすめします。たとえば、インサートの内側と外側の両方に同じ培地を使用してください。 

• すべての実験で液体（培地/バッファー）の量を一定にすると、ばらつきを抑えられます。