MICRO-ePUMP注入シーケンスの解説
MICRO-ePUMPの概要
細胞内注入やさまざまなマイクロインジェクション作業を簡素化するために設計されたMICRO-ePUMPは、精密に調整された空気圧を用いて細胞に液体を注入します。注入される体積はピコリットルからナノリットルの範囲です。タイミング、注入圧力、補償圧力はタッチスクリーンインターフェースで独立して調整可能です。時間間隔は注入圧力の設定により2秒から10ミリ秒以下まで設定できます。注入圧力の間隔はフットスイッチでトリガーされます。
MICRO-ePUMPは、薬剤などの非常に少量の液体を細胞や小さな細胞小器官に注入するために設計されています。2種類の異なる正圧を、2つの圧力間を自動的に切り替える精密なタイミング回路で適用できます。
- ポートは高圧噴射用の正圧を供給します。
- 圧力ポートは注入パルス間に注入ピペットに低い正の「補償」圧力を維持し、毛細管現象による液体の吸い上げを防ぎます。
貫通を促進する統合MICRO-ePORE
WPIのMICRO-ePORE™ピンポイント細胞貫通技術はMICRO-ePUMPに組み込まれています。研究者がMICRO-ePORE™を有効にすると、ターゲットとなる注入部位に局所的な電圧信号を送って、最小限の損傷で貫通を促進します。研究者は用途に最適な信号の振幅と周波数を決定します。信号は制御ボックスから発生し、電極インターフェースケーブルを通じてマイクロ電極ホルダーに伝達されます。銀線が信号を注入される導電性物質に伝えます。参照電極は生成された電圧に対して培地を0.0 Vの電位に保ちます。
MICRO-ePUMP注入シーケンスの理解
こちらはMICRO-ePUMP注入中に起こる一連のイベントを示した便利なインフォグラフィックです。いくつかのイベントはほぼ同時に発生します。このインフォグラフィックは各トリガーポイントを示し、各マイルストーンで何が起こるかを説明しています。トリガーイベントは下部に時系列で示され、グラフィックはイベント中の注目ポイントの状態を表しています：
- 適用される圧力の種類（補償圧力または注入圧力）
- フットスイッチの位置（押されていない、半押し、完全に押された）
- ピペットの位置（バッファー溶液内、細胞内）
- 可聴フィードバック音（無音、合格・不合格音、注入音）
- 電圧の適用（電圧なし、導通測定電圧、注入電圧）
注入を行うためのイベントシーケンス
1. 注入を行うには、まずピペットをバッファー溶液に位置させます。次にフットスイッチを半押しして最初の位置にします。フットスイッチは回路の導通テストを開始し、400 ms続きます。その400 msの間：
- MICRO-ePUMPは補償圧力を維持し、毛細管現象による液体の吸い上げを防ぎます。
- 導通テスト中は音は聞こえません。
- 電流は導通測定電圧に急上昇し、その後400 msのテスト終了後にプログラムされた注入電圧に下がります。
2. 導通テストが終了するとすぐに、2つのうちのどちらかの音が聞こえます。
- 低音は回路の導通が確立できなかったことを示し、注入を進める前にセットアップを再評価する必要があります。
- 高音は回路の導通が確認されたことを示し、注入を進めてよいことを知らせます。
テスト終了と同時に電圧はプログラムされた注入電圧に下がります。導通テストの結果に応じてMICRO-ePOREが作動し、細胞貫通の準備が整います。
3. 導通テストに合格した場合、ピペットを細胞内に移動できます。貫通時点では：
- 補償圧力が維持されます。
- ペダルはまだ半押しのままです。
- 導通テストの音がまだ鳴っています。
- 注入電圧が維持されており、MICRO-ePOREが作動しています。
4. ピペットが細胞に貫通したら、フットスイッチを完全に押し込むことができます（第2位置）。その時点で：
- MICRO-ePUMPは注入圧力に上げ、プログラムされた注入時間の間その圧力を維持します。
- 注入中は音は聞こえません。
- MICRO-ePOREの電圧はゼロに下がり、次の注入サイクルが始まるまでそのまま維持されます。
5. 注入が完了すると：
- MICRO-ePUMPの圧力は補償圧力に下がります。
- フットスイッチは完全に押されたままです。
- ピペットは標本内に留まります。
- 注入が行われたことを示す短い明確な音が鳴ります。
6. その時点でピペットを標本から取り外すことができ、他の注目ポイントは変わりません。
7. 最後にフットスイッチを離します。これで新しい標本で注入サイクルを繰り返す準備が整いました。
インフォグラフィックのダウンロード
注入サイクルは数秒で完了しますが、このインフォグラフィックはすべてのトリガーイベントと注目ポイントがどのように連携しているかを明確に示しています。グラフィックで見ることで、各注入時にこれらのステップで何が起こっているかを理解しやすくなります。印刷用インフォグラフィックをダウンロードして、実験室に掲示してください。
ご質問がある場合は、(866) 606-1974（米国内無料）までお電話いただくか、wpi@wpiinc.comまでメールでお問い合わせください。
