TEER測定用電極の選び方
経上皮電気抵抗(TEER)は、経上皮抵抗(TER)とも呼ばれ、細胞の健康状態を監視するために使用されます。TEERは、細胞内経路(すなわち、個々の細胞による抵抗)と細胞間経路(すなわち、細胞接合部の形成による抵抗)の測定値で構成されています。TEERは一般的に細胞のコンフルエンスを監視するために用いられます。TEER値は、細胞単層の透過性の変化を示し、脳微小血管内皮細胞や肺胞、腎臓、腸の上皮細胞などの細胞の単層バリア機能を示します。高いTEER値は一般的により密な細胞単層または細胞接合部を反映します(Lewis 1996、Matter and Balda 2003、Denker and Sabath 2011)。WPIのTEER測定システムの主な利点を以下に示します。TEER値(電気生理学的解析)は、他の解析方法と組み合わせて生物学的現象をさらに理解するために用いることができます。例えば、TEER値の低下は単層の透過性の増加を示し、トレーサー分子(フルオレセイン-デキストラン)を用いたアッセイでさらに確認できます。研究者が薬剤が細胞に影響を与えるかどうかを理解したい場合、TEER測定は一次スクリーニングで薬剤が細胞の健康や細胞単層の透過性に影響を与えるかを検証するために使用されることがあります。WPIのTEER測定システムは非常に低い電流(10 µA)を適用し、各測定時にこの電流を短時間(最大約1~2分)適用することを推奨しています。このような設定を用いることで、データ取得中に生理学的変化が起こらない(または無視できる)ため、当社のTEER測定システムは非侵襲的と見なすことができます。TEER測定に用いた特定のサンプルは、タンパク質レベルの検出や細胞の生存率の検出など、他の実験にさらに使用することが可能です。TEER測定技術は多くの科学者に採用されており、TEER値は他の技術でさらに探求・確認できるさまざまな生物学的現象を示す可能性があります。TEER測定はシンプルな実験手法を必要とします。
Denker, B. M. and E. Sabath (2011). "腎臓における上皮細胞のタイトジャンクションの生物学." Journal of the American Society of Nephrology 22(4): 622-625. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21415157
Matter, K. and M. S. Balda (2003). "タイトジャンクションの機能解析." Methods 30(3): 228-234. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12798137
Lewis, S. A. (1996). 上皮電気生理学. Epithelial Transport, Springer: 93-117. https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-94-009-1495-7_5
ここでは、WPIが提供する電極の選択肢について2本の動画で説明します。電極の選択は主に使用するシステム(例:細胞培養インサートやウェルプレートの寸法)によって決まります。私たちは、異なるシステムとの互換性を高め、実験中のヒューマンエラーを最小限に抑えて一貫したデータ取得を改善するために、長年にわたりさまざまな電極を設計してきました。
#1 - TEER測定用電極の選び方
EVOM2では、STX2、STX3、STX100電極およびEndOhmチャンバーを使用できます。
各タイプの利点はこちらをご覧ください。
#2 - TEER測定を速く行う方法
EndOhmチャンバーやREMSシステムを使って正確なTEER測定を行う方法を学びましょう。