Penetratore cellulare di precisione WPI MICRO-ePORE

Caratteristiche

• Display touchscreen con pannello resistivo, utilizzabile con i guanti
• Controllo dell’iniezione tramite comando a pedale o manualmente dal touch screen 
• Interfaccia utente intuitiva 
• Frequenza e tensione regolabili dall’utente tramite touch screen 
• Ingombro ridotto 
• Quattro protocolli programmabili dall’utente 
• Tono acustico di continuità regolabile per indicare l’iniezione attiva della sonda; contatore per indicare il numero totale di iniezioni 
• Usa una tensione inferiore rispetto all’elettroporazione per attraversare un’area specifica della membrana cellulare
• Sono disponibili supporti per elettrodi con fili di platino

Vantaggi

• Aumenta la vitalità degli embrioni iniettati
• Sistema flessibile
• Si integra con PV820/PV830 di WPI e con altri diffusi sistemi di microiniezione, come Femtojet® di Eppendorf e gli iniettori Narishige (Femtojet® 4I è un marchio registrato di Eppendorf.)
• Microiniezione di diversi composti e biomolecole: DNA, RNA, proteine
• Prima e dopo l’impianto, in embrioni di diverse specie: topi, roditori, scimmie, bovini, suini, pesci zebra ecc.
• Microiniettore cellulare facile da usare - funzionamento a mani libere tramite comando a pedale 
• Frequenza e tensione regolabili dall’utente - quattro protocolli programmabili
• Unità compatta e portatile che consente di risparmiare prezioso spazio sul banco di lavoro
• Compatibile con tutti i principali microscopi invertiti
• Garanzia premium disponibile

Applicazioni principali

• Microiniezione cellulare negli ovociti e negli embrioni di mammiferi in fase preimpianto, compresa la microiniezione di reagenti CRISPR-Cas9 nel citoplasma di embrioni allo stadio di due cellule 
• Microiniezione pronucleare di zigoti di roditori 
• Silenziamento genico nel pesce zebra

Una soluzione semplice ed elegante

Il nuovo MICRO-ePORE™ Pinpoint Cell Penetrator di WPI è un sistema semplice e versatile, utilizzabile per eseguire in modo efficiente la microiniezione di un’ampia varietà di composti e biomolecole negli ovociti e negli embrioni di mammiferi in fase preimpianto. La tecnologia brevettata Flutter Electrode, in attesa di brevetto, favorisce una penetrazione della membrana precisa, pulita e circoscritta, senza lacerarla né danneggiarla, durante la microiniezione per la creazione di animali transgenici o la manipolazione cellulare.

Pinpoint Cell Penetrator a confronto con l’elettroporazione

L’elettroporazione usa un impulso elettrico in un mezzo per aprire pori nelle membrane cellulari delle cellule presenti nella cuvetta per elettroporazione, così da attraversare la membrana cellulare e introdurre materiale genetico.

Il MICRO-ePORE™ Pinpoint Cell Penetrator di WPI offre diversi vantaggi rispetto all’elettroporazione tradizionale per la microiniezione cellulare. 

• Il nostro microiniettore cellulare di precisione usa una tensione molto più bassa per aprire un canale nella membrana cellulare.
• L’elettroporazione è un approccio a tappeto che apre numerosi pori nella membrana cellulare. Al contrario, il nostro microiniettore cellulare di precisione agisce su un’area specifica della membrana cellulare, proprio nel punto in cui avviene la microiniezione.
• La sopravvivenza degli embrioni è significativamente maggiore con la penetrazione cellulare puntiforme rispetto all’elettroporazione.

Dati sperimentali

I sistemi elettrofisiologici che utilizzano la capacità negativa sono stati regolarmente impiegati per la microiniezione cellulare di diverse biomolecole negli ovociti di mammifero, nonché in embrioni preimpianto e postimpianto negli studi di biologia dello sviluppo. Il sistema non più disponibile, l’amplificatore intracellulare WPI Cyto721, consente all’ago di perforare la membrana cellulare con un trauma fisico minimo. Più recentemente, questa tecnica è stata applicata al trasferimento genetico tramite microiniezione di reagenti CRISPR/Cas9 in embrioni di topo allo stadio di due cellule. Gli autori hanno dimostrato che il loro metodo aumenta significativamente l’efficienza di knock-in e garantisce un’elevata vitalità degli embrioni.

Il nuovo penetratore cellulare puntiforme MICRO-ePORE™ offre una soluzione esclusiva per la microiniezione cellulare, con conseguente elevata vitalità embrionale. Lo strumento genera un campo elettrico oscillante in un punto localizzato della membrana, immediatamente sotto il sito di iniezione. MICRO-ePORE™ crea piccoli pori reversibili nella membrana plasmatica, attraverso i quali viene microiniettato il materiale. Il ricercatore determina l’ampiezza e la frequenza del segnale più adatte all’applicazione. A differenza della microiniezione cellulare convenzionale, nella microiniezione mirata con MICRO-ePORE™ la membrana non si lacera, consentendo così una vitalità embrionale superiore. La tecnica è semplice ed elegante. Il nuovo prototipo di penetratore cellulare MICRO-ePORE™ è stato testato con successo su embrioni preimpianto di topo e primati, oltre che per il silenziamento genico nelle code di zebrafish.

MICRO-ePORE™ è stato progettato per una serie di applicazioni, tra cui la generazione di topi knock-in CRISPR/Cas9 con grandi inserzioni mediante microiniezione in embrioni allo stadio di due cellule, con un’elevata vitalità.7 MICRO-ePORE™ ha consentito la microiniezione precisa di oligomeri morfolino (knockdown antisenso) nelle code di zebrafish.

Opzione con elettrodo di riferimento a pozzetto

Opzione con elettrodo di riferimento a sonda

Questo mostra l’elettrodo di riferimento a sonda con un iniettore Eppendorf, di Fangtao Chi dell’UCLA/MCDB e Utpal Banerjee.

Configurazione del MICRO-ePORE™

Il nuovo penetratore cellulare puntiforme WPI MICRO-ePORE™ è un sistema semplice e versatile, utilizzabile per la microiniezione efficiente di un’ampia varietà di composti e biomolecole negli ovociti e negli embrioni di mammifero in fase preimpianto. La tecnologia brevettata Flutter Electrode, in attesa di brevetto, consente di penetrare la membrana in modo preciso, pulito e delicato, senza lacerarla né danneggiarla. Qui Gabe configura il sistema e collega tutti i componenti.

MICRO-ePORE^TM Brochure

È possibile ridurre la lisi degli embrioni usando MICRO-ePORE? W.Gardiner, J.Kenyon, T.Bell, S.Atkins

Video

Disimballaggio del sistema MICRO-ePORE™

Collegamento del sistema MICRO-ePORE™

Collegamento dei portaeletrodi MICRO-ePORE™

Il sistema include:

(1) Controller MICRO-ePORE™
(1) Portaeletrodi con filo d'argento. A scelta tra:
   • WPI #300863 Portaeletrodi WPI MICRO-ePORE
   • WPI #300864 Portaeletrodi Femtojet® MICRO-ePORE
   • WPI #300865 Narishige MICRO-ePORE™
(1) Cavo di interfaccia del portamicroelettrodi
(1) Elettrodo di riferimento a pozzetto
(1) Gruppo elettrodo di riferimento a sonda
(1) Interruttore a pedale 13142
(1) Cavo di alimentazione
(1) Cavo di messa a terra 99789 MICRO-ePORE™
(1) Manuale di istruzioni