Électrode STX4 EVOM™ avec lames amovibles pour TEER dans des inserts de 6,5 mm

Caractéristiques

• Les lames d'électrode sont remplaçables. Après une période d'utilisation (après plusieurs mois ou années), lorsque les électrodes peuvent avoir accumulé des dépôts provenant du milieu ou des échantillons et commencer à montrer une instabilité des relevés, vous pouvez changer les lames sans avoir à remplacer l'électrode entière.

  REMARQUE : Un nettoyage régulier ou quotidien après utilisation prolongera la durée de vie fonctionnelle des lames d'électrode.

• La pointe de l'électrode est spécialement revêtue et n'a pas besoin d'être chlorurée avec de l'eau de Javel ou de l'hypochlorite de sodium pour fonctionner correctement, et elle n'est pas affectée par la chloruration non plus. La chloruration était essentielle pour le modèle précédent (électrodes STX2-PLUS) afin de maintenir sa fonctionnalité.

Les pointes d'électrode STX4, la région de détection, possèdent un revêtement spécial qui ne nécessite pas de chloruration.

• La pointe de l'électrode (zone active de détection) du STX4 est plus courte que celle de la STX2-PLUS. Étant spécialement revêtue, elle n'a pas besoin d'une grande surface comme la STX2-PLUS. Par conséquent, l'électrode STX4 nécessite des volumes de liquide apical (au-dessus de l'insert) et basolatéral (milieu) moindres que la STX2-PLUS pour maintenir les pointes d'électrode entièrement immergées et capables de fournir des relevés TEER stables.

• L'électrode STX4 s'adapte idéalement aux inserts de culture cellulaire suspendus à 24 puits transwells (par exemple, Corning 3470) et peut rester suspendue au-dessus de ceux-ci. Cela permet une utilisation mains libres qui améliore encore la précision des mesures.

• L'électrode STX4 offre une précision de mesure améliorée grâce à un design similaire à celui du STX2-PLUS, qui élimine ou minimise les variations introduites par le positionnement de l'électrode observées avec le STX2 ou le STX3. L'électrode STX2 ou STX3 est tenue à la main, et sa conception flexible est sujette à l'inclinaison de l'électrode, ce qui modifie l'écart entre les deux lames de l'électrode pendant la mesure. Obtenir une valeur stable et cohérente au sein d'un même groupe d'échantillons avec un STX2 ou STX3 est difficile. Les utilisateurs de STX2 ou STX3 prennent généralement plusieurs mesures du même échantillon et utilisent une moyenne. Avec l'électrode STX4, plusieurs mesures du même échantillon ne sont pas nécessaires.

• L'électrode STX4 possède un câble blindé, et même le corps métallique de l'électrode est relié au mécanisme de blindage. En minimisant ou en éliminant les interférences électriques et téléphoniques, le blindage garantit que la mesure TEER et les relevés sont stables (ne fluctuent pas) et ne sont pas affectés par les interférences.

Avantages

• Lames remplaçables – Cette nouvelle électrode STX4 possède des lames d'électrode remplaçables.

• Pas de chloruration nécessaire – Les pointes d'électrode sont spécialement revêtues, ne nécessitant pas de chloruration (étape d'entretien) pour assurer le bon fonctionnement de l'électrode lors de la mesure TEER des couches cellulaires comme les cultures épithéliales. La chloruration était nécessaire pour le STX2-PLUS.

• Moins de volume de liquide nécessaire – Cette électrode nécessite moins de volume de liquide que l'électrode STX2-PLUS pour maintenir les pointes immergées et fournir des lectures stables.

• Utilisation mains libres – L'électrode STX4 s'adapte parfaitement aux plaques de culture cellulaire 24 puits suspendus transwells et peut rester suspendue au-dessus de ces transwells, permettant une utilisation mains libres.

• Plus grande précision – L'électrode STX4 offre une meilleure précision de mesure TEER, car elle élimine les facteurs de variabilité liés au changement d'espacement et de positionnement des électrodes observés avec l'électrode STX2.

• Protégé contre les interférences radiofréquences (RFI) – Cette électrode STX4 possède un câble blindé et élimine ou minimise toute interférence (provenant de sources électriques ou de téléphones portables) affectant les mesures TEER.

L'électrode STX4 se place sur le puits pour une utilisation mains libres, et la bague de réglage vous permet de positionner les lames de l'électrode exactement là où elles doivent être, suspendues dans la solution sans toucher la membrane ni le fond de la plaque de culture cellulaire.

REMARQUE : Améliorez la précision de votre mesure TEER avec l'ancien EVOM2 en remplaçant le STX2 ou STX3 par le nouveau STX4. Le STX4 peut être utilisé avec le EVOM2 (modèle précédent) en utilisant l'adaptateur EVM-AC-02-01-01, vendu séparément.

Principales améliorations du STX4 par rapport au STX2-PLUS

• Économisez des ressources, car le STX4 nécessite moins de volumes de liquide.

• Gagnez du temps, car le STX4 nécessite moins d'entretien. Aucun chloruration n'est requise.

• Le STX4 est plus rentable à long terme, car les lames des électrodes sont remplaçables par l'utilisateur.

 

Reportez-vous au tableau ci-dessous pour les détails (Différences et similitudes entre STX4 et STX2-PLUS)

Type.	STX2-Plus	STX4
Volumes de liquide requis pour des mesures stables	Des volumes de liquide (milieu) plus importants par échantillon sont nécessaires pour maintenir les zones de détection plus longues entièrement immergées afin d'obtenir des lectures stables avec la STX2-PLUS. Volumes d'exemple : Pour Corning 3470, plaque transwell à 24 puits, un volume minimum de 300 µL en haut (apical) et 850 µL en bas (basolatéral) est nécessaire pour la STX2-PLUS.	Des volumes de liquide (milieu) inférieurs par échantillon sont nécessaires pour la STX4 afin d'obtenir des lectures stables et précises. Parce que les zones de détection de la STX4 sont plus courtes et spécialement revêtues, la STX4 nécessite moins de volume de liquide que la STX2-PLUS. L'utilisation de moins de milieu avec la STX4 économise vos ressources. Volumes d'exemple : Pour Corning 3470, plaque transwell à 24 puits, un volume minimum de 150 µl de milieu apical et 500 µl de milieu basolatéral est nécessaire pour la STX4.
Chloration (Entretien utilisateur) requise	Oui, c'est important. Lors d'une utilisation quotidienne, l'électrode doit être chlorée en immergeant les pointes dans une solution de 3-6 % d'hypochlorite de sodium pendant 10 minutes (suivi d'un rinçage à l'eau DI) pour garantir un fonctionnement correct de l'électrode.	Non, ce n'est pas nécessaire. L'électrode n'a pas besoin d'être chlorée. (Elle n'est pas non plus affectée fonctionnellement par la chloration.) Un revêtement spécial des zones de détection de l'électrode assure un fonctionnement correct. Moins d'entretien est requis par l'utilisateur, ce qui vous fait gagner du temps.
Lames remplaçables par l'utilisateur (Ces lames sont en contact direct avec les échantillons et contiennent la zone de détection.)	Non. Les lames ne sont pas détachables.	Oui. Vous avez la possibilité de changer les lames, ce qui rend la STX4 plus économique sur le long terme.
Application	• Idéal pour les plaques de culture cellulaire transwell à 24 puits. • Utilisé pour les mesures de résistance et de millivolts.	Identique à STX2-PLUS
Connexion directe avec EVOM Manuel ou version plus ancienne EVOM3	Oui	Oui
Compatibilité avec EVOM2, EVOM, Millicell ERS-2 et ERS (en utilisant l'adaptateur EVM-AC-02-01-01)	Oui	Oui

 

 

Documents

Manuel d'instructions de l'électrode STX4 avec lames remplaçables

Tableaux de compatibilité des plaques à puits/insert

Vidéo

7 raisons de mettre à niveau vos électrodes EVOM - Présentation de la nouvelle STX4

 

 

Comment remplacer les lames des électrodes STX4 pour une utilisation avec l'EVOM3

 

FAQ

Les pointes de lame des électrodes STX4 ont-elles tendance à s'assombrir au cours de l'utilisation ou pendant le stockage ?

Oui, c'est un processus normal. Les pointes d'électrode STX4 ont tendance à s'assombrir (cosmétique), mais la fonction de l'électrode ou de la lame d'électrode reste fonctionnellement inchangée.

La couleur de la pointe de la lame d'électrode STX4 peut-elle être significativement différente sur le côté extérieur par rapport au côté intérieur ?

Oui, c'est normal (cosmétique) et peut être attribué au chemin du flux de courant entre les deux lames d'électrode. En général, le côté extérieur des pointes des lames d'électrode a tendance à s'assombrir davantage puisque les électrodes extérieures participent à l'application du courant électrique depuis l'EVOM (Fig. 29). Le côté intérieur des pointes des lames d'électrode tend à rester relativement blanchâtre (couleur de la pointe), car aucun courant électrique ne passe par ce côté. Ces électrodes intérieures (le côté intérieur des pointes des lames d'électrode) sont impliquées dans la détection du changement (tension) en réponse au courant appliqué. Cette différence ou incohérence observée de la couleur de la pointe (côté intérieur versus côté extérieur) n'affecte pas la fonction réelle de la lame d'électrode ni de l'électrode.   

L'assombrissement de la pointe de l'électrode STX4 et une différence significative de couleur entre les côtés intérieur et extérieur des lames d'électrode (pendant le stockage ou après une période d'utilisation) sont considérés comme normaux.

REMARQUE : WPI effectue un conditionnement spécial de chaque lame d'électrode individuellement (en particulier les pointes) et vérifie le bon fonctionnement de chaque lame d'électrode fabriquée ainsi que de l'électrode STX4.

Pourquoi est-ce que j'obtiens des tirets ou des lectures instables sur l'EVOM Manuel, même si j'ai l'électrode STX4 dans l'échantillon ?

Une électrode dans l'air ou partiellement immergée dans le liquide peut afficher des tirets car elle enregistre des lectures instables. La partie de la pointe de l'électrode (région de détection) doit rester entièrement immergée. Vous pouvez également remarquer des lectures instables lorsque la pointe de l'électrode n'est pas complètement immergée. Assurez-vous de sélectionner des volumes apicaux et basolatéraux afin que les pointes des deux lames d'électrode restent entièrement immergées. 

Tournez la bague de réglage de la longueur dans le sens des aiguilles d'une montre afin que les lames d'électrode puissent pénétrer plus profondément dans un échantillon et que les pointes des électrodes puissent rester entièrement immergées dans les volumes liquides. 

La longueur exposée peut être ajustée sur les lames d'électrode STX4 en tournant la bague de réglage.

Assurez-vous que les pointes de détection des électrodes sur les deux lames restent entièrement immergées dans un liquide conducteur (milieu de culture cellulaire ou tampon) pendant la mesure. Vous devez disposer de volumes apicaux et basolatéraux adéquats pour obtenir une lecture stable.

L'électrode doit-elle être nettoyée quotidiennement ?

Oui, il est essentiel qu'après chaque utilisation quotidienne, vous nettoyiez l'électrode, la laissiez sécher à l'air, et la stockiez dans un endroit sec. Cela est nécessaire pour la longévité fonctionnelle des lames de l'électrode. Reportez-vous à la section ENTRETIEN du manuel d'instructions STX4 pour plus de détails.

Y a-t-il d'autres instructions de manipulation de l'électrode recommandées par WPI ?

1. Soulevez toujours l'électrode par le corps, jamais par le câble. Cela peut progressivement casser physiquement les connexions internes.

   	A. Ne tenez PAS l'électrode par le câble. (Manipulation incorrecte)
   	B. Tenez l'électrode par la partie en plastique indiquée par la flèche rouge. (Manipulation correcte)

2. Limitez le niveau d'immersion ou de pulvérisation du liquide en dessous du niveau maximum indiqué par les flèches sur l'image ci-dessous. Vous ne voulez pas que le liquide pénètre à l'intérieur et atteigne les câbles ou connecteurs. Vous pouvez essuyer le reste de l'électrode avec un essuie-tout vaporisé d'isopropanol ou d'éthanol. (Ne pas vaporiser directement.)

   L'immersion dans le liquide doit être limitée uniquement jusqu'à cette ligne depuis la pointe (maximum). Le reste de l'électrode peut être essuyé avec un essuie-tout humide.

Mes inserts ou transwells sont-ils compatibles avec l'électrode STX4 ?

L'électrode STX4 fonctionne idéalement avec les inserts suspendus à 24 puits couramment utilisés (tels que Corning, Millipore et Greiner). L'électrode peut être utilisée avec la plupart des autres inserts à 24 puits et à 12 puits. Pour les inserts à 12 puits, l'électrode doit être tenue à la main ou soutenue manuellement pendant la mesure. La liste des inserts compatibles est disponible ici ou dans « ANNEXE B : INSERTS ET PLAQUES COMPATIBLES » du manuel d'instructions STX4.

L'augmentation ou le changement des volumes de liquide des échantillons peut-il modifier mes valeurs de résistance ?

Oui. Vous pouvez vous attendre à voir une variation des valeurs de résistance brute. Cependant, vous devez soustraire les valeurs de blanc (transwell transwell sans cellules) des valeurs des échantillons (transwell transwell avec cellules). De cette façon, vous soustrayez la valeur du blanc avec volume augmenté des échantillons avec volume augmenté. Ainsi, toute variation de résistance due à l'augmentation du volume est éliminée. Utilisez toujours les mêmes volumes pour tous vos échantillons dans une configuration expérimentale.

La résistance électrique et la résistance électrique transepitheliale (TEER) sont-elles la même chose ?

Non. Multipliez la résistance mesurée par la surface appropriée de la membrane pour calculer la TEER. Par exemple, si un insert de 6,5 mm (plaque à 24 puits) mesure 565 Ω, la TEER est :

 565 Ω × 0,33 cm² = 186,45 Ω-cm²

[Pour une plaque à 24 puits (insert de 6,5 mm insert), surface = 0,33 cm² et pour une plaque à 12 puits (insert de 12 mm insert) surface = 1,13 cm². Veuillez vous référer aux détails techniques du fabricant du insert/transwell spécifique (par exemple, Millipore, Corning, etc.) pour trouver des informations précises sur la surface de la membrane applicable à un numéro de pièce insert spécifique.] 

Pouvez-vous suggérer certains paramètres expérimentaux qui peuvent être contrôlés pour obtenir des résultats TEER plus cohérents ?

• La température est connue pour influencer les valeurs de TEER. Nous vous recommandons de maintenir une température d'échantillon constante pour obtenir des valeurs cohérentes. Nous suggérons de sortir la plaque à puits avec les inserts contenant des cellules de l'incubateur et de laisser la plaque se stabiliser à température ambiante dans la hotte à flux laminaire pendant 15-20 minutes avant de prendre les mesures. À ce moment, tous les échantillons seront à peu près à la même température ambiante.

• Après avoir ajouté des liquides aux transwells, attendez 15 minutes avant de prendre les mesures. Les niveaux de liquide à l'intérieur et à l'extérieur de l'insert auront tendance à s'égaliser et offriront une meilleure stabilité de lecture. 

• Nous recommandons d'utiliser le même liquide conducteur avec la même concentration ionique à la fois du côté apical (haut de la culture cellulaire insert) et du côté basolatéral (bas de l'insert). Par exemple, utilisez le même milieu à l'intérieur et à l'extérieur de l'insert. 

• L'application de volumes constants de fluide (milieu/tampon) pendant toutes les expériences réduit la variabilité.