Électrode STX4 EVOM™ avec lames amovibles pour TEER dans des inserts de 6,5 mm

Caractéristiques

• Les lames de l’électrode sont remplaçables. Après plusieurs mois ou années d’utilisation, lorsque des dépôts provenant des milieux ou des échantillons se sont éventuellement formés sur les électrodes et que les mesures commencent à manquer de stabilité, vous pouvez remplacer les lames sans avoir à remplacer l’électrode entière.

  REMARQUE : Un nettoyage régulier ou quotidien après utilisation prolongera la durée de vie fonctionnelle des lames de l’électrode.

• La pointe de l’électrode possède un revêtement spécial et n’a pas besoin d’être chlorée à l’eau de Javel ou à l’hypochlorite de sodium pour fonctionner correctement. La chloration ne l’endommage pas non plus. La chloration était indispensable au bon fonctionnement du modèle précédent (électrodes STX2-PLUS).

Les pointes de l’électrode STX4, qui constituent la zone de détection, possèdent un revêtement spécial qui ne nécessite pas de chloration.

• La pointe de l’électrode STX4 (zone de détection active) est plus courte que celle de la STX2-PLUS. Son revêtement spécial lui permet d’être plus petite que celle de la STX2-PLUS. L’électrode STX4 nécessite donc des volumes plus faibles de liquide apical (au-dessus de l’insert) et basolatéral (milieu de culture) que la STX2-PLUS pour maintenir les pointes entièrement immergées et obtenir des résultats de mesure TEER stables.

• L’électrode STX4 s’adapte parfaitement aux inserts de culture cellulaire Transwell suspendus à 24 puits (par ex., Corning 3470) et peut rester suspendue au-dessus de ceux-ci. Cela permet une utilisation mains libres, ce qui améliore encore la précision des mesures.

• L’électrode STX4 offre une meilleure précision de mesure grâce à sa conception, similaire à celle de la STX2-PLUS, qui élimine ou réduit les variations dues au positionnement de l’électrode observées avec la STX2 ou la STX3. Les électrodes STX2 et STX3 sont tenues à la main et leur conception flexible les rend susceptibles de s’incliner, ce qui modifie l’écartement entre les deux lames pendant la mesure. Avec une STX2 ou une STX3, il est difficile d’obtenir une valeur stable et constante pour un même échantillon. Les utilisateurs de STX2 ou de STX3 effectuent généralement plusieurs mesures du même échantillon et en calculent la moyenne. Avec l’électrode STX4, il n’est pas nécessaire de mesurer plusieurs fois le même échantillon.

• L’électrode STX4 est équipée d’un câble blindé, et même son corps métallique est relié au dispositif de blindage. En minimisant ou en éliminant les interférences électriques et celles des téléphones portables, le blindage garantit la stabilité des mesures et des résultats TEER (sans fluctuations) et les protège des interférences.

Avantages

• Lames remplaçables – Cette nouvelle électrode STX4 est dotée de lames remplaçables.

• La chloration n’est pas nécessaire – Les pointes de l’électrode sont spécialement revêtues et ne nécessitent aucune chloration (étape d’entretien) pour garantir le bon fonctionnement de l’électrode lors de la mesure de la résistance électrique transépithéliale (TEER) de couches cellulaires, telles que des cultures épithéliales. La chloration était nécessaire pour le STX2-PLUS.

• Moins de liquide nécessaire – Cette électrode nécessite moins de liquide que l’électrode STX2-PLUS pour maintenir les pointes immergées et fournir des mesures stables.

• Utilisation mains libres – L’électrode STX4 s’adapte parfaitement aux plaques de culture cellulaire à 24 puits avec des transwells suspendus et peut rester accrochée au-dessus de ces transwells, permettant une utilisation mains libres.

• Précision accrue – L’électrode STX4 offre une meilleure précision des mesures TEER, car elle élimine les facteurs de variabilité dus aux changements d’espacement et de positionnement des électrodes, comme avec l’électrode STX2.

• Protégé contre les interférences radiofréquences (RFI) – Le câble de cette électrode STX4 est blindé et élimine ou minimise toute interférence (provenant de sources électriques ou de téléphones portables) susceptible d’affecter les résultats des mesures TEER.

L’électrode STX4 repose sur le puits pour permettre une utilisation mains libres, et la bague de réglage permet de placer les lames de l’électrode exactement à l’endroit souhaité dans le puits, suspendues dans la solution sans toucher la membrane ni le fond du puits de la plaque de culture cellulaire.

REMARQUE : améliorez la précision de vos mesures TEER avec l’ancien EVOM2 en remplaçant le STX2 ou le STX3 par le nouveau STX4. Le STX4 peut être utilisé avec l’EVOM2 (modèle précédent) à l’aide de l’adaptateur EVM-AC-02-01-01, vendu séparément.

Principales améliorations du STX4 par rapport au STX2-PLUS

• Économisez des ressources, car le STX4 nécessite moins de liquide.

• Gagnez du temps, car le STX4 nécessite moins d’entretien. Aucune chloruration n’est requise.

• Le STX4 est plus rentable à long terme, car les lames d’électrode peuvent être remplacées par l’utilisateur.

 

Consultez le tableau ci-dessous pour plus de détails (différences et similitudes entre le STX4 et le STX2-PLUS)

Type	STX2-Plus	STX4
Volumes de liquide requis pour des mesures stables	Des volumes de liquide (milieu) plus importants par échantillon sont nécessaires pour maintenir les zones de détection plus longues entièrement immergées et obtenir des mesures stables avec le STX2-PLUS. Volumes indicatifs : pour une plaque Corning 3470 à 24 puits avec transwell, des volumes minimums de milieu de 300 µL en haut (côté apical) et de 850 µL en bas (côté basolatéral) sont nécessaires pour le STX2-PLUS.	Des volumes de liquide (milieu) moins importants par échantillon sont nécessaires pour que le STX4 fournisse des mesures stables et précises. Comme les zones de détection du STX4 sont plus courtes et spécialement revêtues, le STX4 nécessite moins de liquide que le STX2-PLUS. L’utilisation de moins de milieu avec le STX4 économise vos ressources. Volumes indicatifs : pour une plaque Corning 3470 à 24 puits avec transwell, des volumes minimums de milieu de 150 µl côté apical et de 500 µl côté basolatéral sont nécessaires pour le STX4.
Chloruration (entretien par l’utilisateur) requise	Oui, c’est important. En cas d’utilisation quotidienne, l’électrode doit être chlorurée en immergeant ses pointes dans une solution d’hypochlorite de sodium à 3-6 % pendant 10 minutes (puis rincée à l’eau désionisée) afin de garantir son bon fonctionnement.	Non, ce n’est pas nécessaire. L’électrode n’a pas besoin d’être chlorurée. (La chloration n’affecte pas non plus son fonctionnement.) Un revêtement spécial des zones de détection de l’électrode garantit son bon fonctionnement. L’utilisateur a moins d’entretien à effectuer, ce qui vous fait gagner du temps.
Lames remplaçables par l’utilisateur (Ces lames entrent directement en contact avec les échantillons et contiennent la zone de détection.)	Non. Les lames ne sont pas amovibles.	Oui. Vous avez la possibilité de remplacer les lames, ce qui rend la STX4 plus rentable à long terme.
Application	• Idéale pour les plaques de culture cellulaire Transwell à 24 puits. • Utilisée pour les mesures de résistance et en millivolts.	Identique au STX2-PLUS
Connexion directe à l’EVOM Manual ou à une ancienne version de l’EVOM3	Oui	Oui
Compatibilité avec EVOM2, EVOM, Millicell ERS-2 et ERS (avec l’adaptateur EVM-AC-02-01-01)	Oui	Oui

 

 

Documents

Manuel d’instructions de l’électrode STX4 à lames remplaçables

Tableaux de compatibilité des inserts et des plaques multipuits

Vidéo

7 raisons de mettre à niveau vos électrodes EVOM - Présentation de la nouvelle STX4

 

 

Comment remplacer les lames de l’électrode STX4 pour une utilisation avec l’EVOM3

 

FAQ

Les pointes des lames de l’électrode STX4 ont-elles tendance à foncer après une période d’utilisation ou pendant le stockage ?

Oui, c’est un processus normal. Les pointes de l’électrode STX4 ont tendance à foncer (aspect esthétique), mais cela n’affecte pas le fonctionnement de l’électrode ou de la lame.

La couleur des pointes des lames de l’électrode STX4 peut-elle être très différente sur la face extérieure par rapport à la face intérieure ?

Oui, c’est normal (aspect esthétique) et cela peut être attribué au trajet du courant entre les deux lames de l’électrode. En général, les pointes des faces extérieures des lames ont tendance à foncer davantage, car les électrodes extérieures servent à appliquer le courant électrique provenant de l’EVOM (fig. 29). Les pointes des faces intérieures des lames ont tendance à rester relativement blanchâtres (couleur de la pointe), car aucun courant électrique ne passe par cette face. Ces électrodes intérieures (la face intérieure des pointes des lames) servent à détecter les variations (de tension) en réponse au courant appliqué. Cette différence ou incohérence de couleur observée entre les pointes (face intérieure par rapport à face extérieure) n’affecte pas le fonctionnement réel de la lame ou de l’électrode.   

Le noircissement de la pointe de l’électrode STX4 et une différence de couleur importante entre les faces intérieure et extérieure des lames de l’électrode (pendant le stockage ou après une période d’utilisation) sont considérés comme normaux.

REMARQUE : WPI applique un conditionnement spécial à chaque lame d’électrode individuellement (en particulier aux pointes) et vérifie le bon fonctionnement de chaque lame fabriquée et de chaque électrode STX4.

Pourquoi l’EVOM Manual affiche-t-il des tirets ou des mesures instables alors que l’électrode STX4 est dans l’échantillon ?

Une électrode dans l’air ou partiellement immergée dans le liquide peut afficher des tirets, car elle enregistre des mesures instables. La pointe de l’électrode (zone de détection) doit rester entièrement immergée. Vous pouvez également constater des mesures instables si la pointe de l’électrode n’est pas entièrement immergée. Veillez à choisir des volumes apical et basolatéral qui permettent aux pointes des deux lames de l’électrode de rester entièrement immergées. 

Tournez la bague de réglage de la longueur dans le sens des aiguilles d’une montre afin que les lames de l’électrode puissent pénétrer plus profondément dans l’échantillon et que les pointes restent entièrement immergées dans les volumes de liquide. 

La longueur exposée des lames de l’électrode STX4 peut être réglée en tournant la bague de réglage.

Pendant la mesure, veillez à ce que les pointes de détection des deux lames de l’électrode restent entièrement immergées dans un liquide conducteur (milieu de culture cellulaire ou tampon). Les volumes apical et basolatéral doivent être suffisants pour obtenir une mesure stable.

L’électrode doit-elle être nettoyée tous les jours ?

Oui, il est essentiel de nettoyer l’électrode après chaque utilisation quotidienne, de la laisser sécher à l’air libre et de la ranger dans un endroit sec. Cela est nécessaire pour prolonger la durée de vie fonctionnelle des lames de l’électrode. Pour plus de détails, consultez la section ENTRETIEN du manuel d’instructions du STX4.

WPI recommande-t-elle d’autres consignes de manipulation de l’électrode ?

1. Soulevez toujours l’électrode par son corps, jamais par le câble. Cela risque de briser progressivement les connexions internes.

   	A. NE tenez PAS l’électrode par le câble. (Manipulation incorrecte)
   	B. Tenez l’électrode par la partie en plastique indiquée par la flèche rouge. (Manipulation correcte)

2. Limitez l’immersion ou la pulvérisation de liquide à un niveau situé sous le niveau maximum indiqué par les flèches dans l’image ci-dessous. Le liquide ne doit pas pénétrer à l’intérieur jusqu’aux câbles ou aux connecteurs. Vous pouvez essuyer le reste de l’électrode avec une serviette en papier imbibée d’isopropanol ou d’éthanol. (Ne pulvérisez pas directement sur l’électrode.)

   La pointe ne doit être immergée dans le liquide que jusqu’à cette ligne (maximum). Le reste de l’électrode peut être essuyé avec une serviette en papier humide.

Mes inserts ou transwells sont-ils compatibles avec l’électrode STX4 ?

L’électrode STX4 est idéale avec les inserts suspendus à 24 puits couramment utilisés (par exemple, Corning, Millipore et Greiner). Elle peut être utilisée avec la plupart des autres inserts à 24 puits et des inserts à 12 puits. Pour les inserts à 12 puits, l’électrode doit être tenue à la main ou maintenue pendant la mesure. La liste des inserts compatibles est disponible ici ou dans la section « APPENDICE B : INSERTS ET PLAQUES COMPATIBLES » du manuel d’instructions du STX4.

L’augmentation ou la modification des volumes de liquide des échantillons peut-elle modifier mes valeurs de résistance ?

Oui. Vous pouvez constater une variation des valeurs de résistance brutes. Toutefois, vous devez soustraire les valeurs à blanc (transwell sans cellules) des valeurs des échantillons (transwell avec cellules). Ainsi, vous soustrayez la valeur à blanc mesurée avec le volume augmenté des échantillons mesurés avec le volume augmenté. La variation de résistance due à l’augmentation du volume est ainsi éliminée. Utilisez systématiquement les mêmes volumes pour tous vos échantillons dans une expérience.

La résistance électrique et la résistance électrique transépithéliale (TEER), est-ce la même chose ?

Non. Multipliez la résistance mesurée par la surface de membrane appropriée pour calculer la TEER. Par exemple, si la résistance mesurée pour un insert de 6,5 mm (plaque de 24 puits) est de 565 Ω, la TEER est de :

 565 Ω × 0,33 cm² = 186,45 Ω-cm²

[Pour une plaque de 24 puits (insert de 6,5 mm), la surface est de 0,33 cm² et, pour une plaque de 12 puits (insert de 12 mm), elle est de 1,13 cm². Veuillez consulter les caractéristiques techniques du fabricant pour le insert/transwell concerné (par exemple, Millipore, Corning, etc.) afin d’obtenir des informations précises sur la surface de membrane correspondant à un numéro de référence donné.] 

Pouvez-vous suggérer des paramètres expérimentaux pouvant être contrôlés afin d’obtenir des résultats TEER plus cohérents ?

• On sait que la température influe sur les valeurs de TEER. Nous recommandons de maintenir une température constante des échantillons afin d’obtenir des valeurs cohérentes. Nous suggérons de sortir de l’incubateur la plaque de puits contenant les cellules sur inserts et de laisser la plaque se stabiliser à température ambiante sous la hotte à flux laminaire pendant 15-20 minutes avant de prendre les mesures. À ce moment-là, tous les échantillons seront à peu près à la même température ambiante.

• Après avoir ajouté les liquides aux transwells, attendez 15 minutes avant de prendre des mesures. Les niveaux de liquide à l’intérieur et à l’extérieur de insert tendront à s’égaliser et offriront une meilleure stabilité de lecture. 

• Nous recommandons d’utiliser le même liquide conducteur, à la même concentration ionique, des deux côtés, apical (en haut de la culture cellulaire insert) et basolatéral (en bas de insert). Par exemple, utilisez le même milieu à l’intérieur et à l’extérieur de insert. 

• L’utilisation de volumes constants de liquide (milieu/tampon) pendant toutes les expériences réduit la variabilité.