Les ions et le courant électrique peuvent être transportés à travers les cellules (transcellulaire) et à travers l’espace entre les cellules adjacentes (paracellulaire). Les lignes pointillées montrent la voie transcellulaire du flux d’ions ou de courant électrique. Les lignes pleines illustrent la voie paracellulaire du flux d’ions ou de courant.

Initialement, 24 heures après le semis cellulaire dans le transwell, les valeurs TEER sont généralement faibles, car le courant peut facilement passer entre les cellules. Avec le temps, les cellules se multiplient et commencent à couvrir les espaces. Finalement, une monocouche cellulaire confluente se forme. À ce stade, la membrane perméable est entièrement recouverte de cellules et ne permet pas le passage facile du courant électrique. Cela se traduit par une valeur TEER élevée.

Le type de cellule A permet à des quantités plus importantes de courant et d’ions de passer entre les cellules et présente une faible valeur de TEER. Avec ses jonctions plus serrées, les monocouches cellulaires de type B afficheront une valeur de TEER plus élevée. Bien que les deux monocouches soient confluentes, les valeurs de résistance TEER peuvent être sensiblement différentes en fonction de la nature même des cellules.

À mesure que le TEER augmente, vous pouvez voir la corrélation directe avec la barrière cellulaire, la confluence du tissu et la cytotoxicité du milieu testé.

Le EVOM de WPI est considéré comme la référence en matière de mesure TEER, avec de nombreuses citations pour les instruments WPI actuels et anciens, y compris EVOM, EVOM2, ERS2, REMS, EVOM3, le manuel EVOM™, l’EVOM™ Auto et des électrodes telles que STX HTS, ENDOHM, STX2 et STX4. L’EVOM™ est une technologie reconnue depuis plus de 30 ans (voir Techniques de mesure TEER pour les systèmes modèles de barrières in vitro - PubMed), et elle a été citée dans de nombreuses publications évaluées par des pairs.

EVOM™ Manuel et EVOM™ Auto sont simples à utiliser pour des lectures rapides, la TEER est non invasive et non destructive pour les cellules, et elle vous fournit des données quantitatives mesurables sur la santé de votre barrière.

WPI propose désormais des inserts de culture cellulaire à membrane perméable Corning® avec différents choix de membrane, taille de pores et conception de plaques. Le choix du type de plaque dépend de votre application.

• Les membranes en polycarbonate (PC) permettent une diffusion maximale. Par conséquent, les membranes PC conviennent généralement aux études d’absorption et de transport de médicaments (par exemple, EVM-AC-03-C3415).
• Les membranes transparentes en PET (polyester ou polyéthylène téréphtalate) offrent une transparence optique suffisante pour observer la croissance cellulaire sur ces inserts membranaires par microscopie en contraste de phase (par exemple, EVM-AC-03-C3460, EVM-AC-03-3470).

Les inserts de culture cellulaire peuvent être des transwells détachables disponibles en formats de plaques de 6 (par exemple, EVM-AC-03-C3450), 12 (par exemple, EVM-AC-03-C3460) et 24 (par exemple, EVM-AC-03-C3460) puits. Ces inserts amovibles conviennent aux études ne nécessitant pas un haut débit et aux études où deux types cellulaires ou plus doivent être cultivés sur les deux faces des membranes. Les inserts de culture cellulaire en plaque de 24 puits peuvent être utilisés pour la mesure automatisée de la TEER avec l’EVOM™ Auto en déplaçant les inserts vers une plaque compagnon.

WPI propose également des plaques HTS (criblage à haut débit) disponibles en formats de 24 (par exemple, EVM-AC-03-C3399) et 96 (par exemple, EVM-AC-03-C3381) puits. Les plaques HTS comportent un seul assemblage pour le compartiment apical de tous les puits. Les zones d’accès apical et basolatéral sont fixes à un emplacement cohérent sur la plaque. Ainsi, les plaques HTS permettent un haut débit et une automatisation. Par exemple, les plaques HTS sont couramment utilisées avec l’EVOM™ Auto de WPI pour la mesure automatisée de la TEER.

• Normalement, on insère des plaques avec une taille de pore de membrane de 0,4 (e.g., EVM-AC-03-C3391) et 1,0 (e.g., EVM-AC-03-C3380) µm sont utilisés pour les études de transport, de perméabilité et de co-culture.
• Les applications en toxicité, interface air-liquide (ALI) et ingénierie tissulaire utilisent couramment des membranes de 0,4 et 3 µm (e.g., EVM-AC-03-C3385).
• Les études de migration et d’invasion cellulaires nécessitent une taille de pore de membrane plus grande de 3, 5 (e.g. (EVM-AC-03-C3388), 8 µm (e.g., EVM-AC-03-C3384) des inserts de culture cellulaire.

WPI propose les plaques d'inserts de culture cellulaire Corning les plus fiables avec différents types de membranes et options de taille de pores pour diverses applications, ainsi que la solution de mesure TEER de pointe utilisant l'EVOM™ de WPI pour vérifier la croissance fonctionnelle des tissus. La mesure TEER est essentielle pour valider les études in vitro réalisées avec des inserts et plaques à membrane perméable.

Voici quelques-unes des applications populaires de la mesure TEER. Cependant, l'ingénierie tissulaire, l'évaluation de la fonction barrière épithéliale/endothéliale, la recherche sur les organoïdes et les études d'absorption des médicaments ne sont que la partie émergée de l'iceberg. La TEER est utilisée pour la culture cellulaire, la modélisation des maladies, le contrôle qualité dans les tests basés sur les cellules et les thérapies cellulaires, le contrôle qualité de la fabrication et bien plus encore. Aujourd'hui, il est même possible de surveiller la TEER pour les systèmes organes sur puce.