VIDEO: So erstellen Sie eine Plattendatei auf dem EVOM™ Auto
Das EVOM™ Auto automatisiert die Messungen des TEER in epithelialen oder endothelialen Monolayern, die auf 96-Well-Platten für Hochdurchsatz-Screenings kultiviert werden, und nutzt dabei unsere innovative EVOM™-Technologie. Es misst qualitativ die Gesundheit der Zellmonolayer und quantitativ die Zellkonfluenz, indem es eine Zunahme oder ein Plateau im Gewebewiderstand bestimmt.
Das folgende Video zeigt Ihnen, wie Sie eine Plattendatei auf dem EVOM™ Auto erstellen:
1. Um eine Messsequenz zu erstellen, wählen Sie im Startbildschirm das Menü Sequenz verwalten. Eine Liste der vorhandenen Sequenzen wird angezeigt, und Sie können jede bestehende Sequenz öffnen und bearbeiten oder Neue Sequenz auswählen, um eine neue zu erstellen. Wenn Sie Neue Sequenz wählen, erscheint ein Popup, in dem Sie der Sequenz einen Namen geben können.
2. Sie können wählen, ob die gemessenen Widerstandswerte oder die TEER-Messung angezeigt werden sollen. TEER ist ein berechneter Wert, der auf der Oberfläche des Wells und dem gemessenen Widerstand basiert.
Wählen Sie das Menü Modus. Die Optionen umfassen Widerstand und TEER.
Wenn Sie Modus>Widerstand>Bereich auswählen, können Sie den Widerstandsbereich für die Messungen festlegen:
- 10K Ohm
- 50K Ohm
- 100K Ohm
Der Bereich Aktueller Zustand auf der rechten Seite des Fensters wird entsprechend aktualisiert.
3. Wenn Sie Modus>TEER auswählen, können Sie den Widerstandsbereich und die Wellfläche wählen. Die Wellfläche definiert die Oberfläche eines Wells auf Ihrer Platte.
4. Wählen Sie Ihre Blanko-Option. Diese Option misst den Widerstand der ersten Spalte (Wells A1, B1, C1...H1), und dieser Wert wird als Basislinie für jede Reihe verwendet. Jeder Wert in der Tabelle Blanko-Wert misst den Widerstand des spezifischen Elektrodenpaares, das zur Messung jeder Spalte in einem Well verwendet wird, das nur Puffer enthält. Die Werte 1-8 werden von den Messungen der entsprechenden Reihe subtrahiert, um die Änderung gegenüber dem Basis-Well zu erhalten.
5. Um die Blanko-Einrichtung zu starten, wählen Sie das Menü Blanko und dann Blanko laden, gefolgt von Neue Blanko, um einen Container für die Blanko-Basisdaten zu erstellen.
Nachdem die Sequenz gespeichert wurde, wird der Container mit einem Standardwert von null erstellt. Der Blanko-Name wird im Bereich Aktueller Zustand aktualisiert.
6. Laden Sie als Nächstes eine Wellplatte mit Medium oder Puffer in die erste Spalte der Wells und platzieren Sie sie im Bereich für HTS-Wellplatten auf dem Autosampler.
7. Um die Blankos zu messen und diese Informationen in den Blanko-Container zu laden, wählen Sie das Menü Blanko und dann Blanko füllen.
Der Autosampler bewegt dann das Elektrodenarray zur Spalte 1 und misst alle acht Werte. Die Werte werden im Bereich Blanko im Fenster angezeigt, während sie erfasst werden.
Nach Abschluss der Messung können Sie die Blankos beliebig oft erneut messen, jetzt oder in der Zukunft, indem Sie diesen Container laden und die Option Blanko füllen erneut ausführen.
8. Richten Sie die Wellzeit ein, indem Sie das Menü Wellzeit auswählen. Die Wellzeit ist die Anzahl der Sekunden, die die Elektroden bei der Messung in jedem Well eingetaucht sind. Geben Sie die gewünschte Zeit in Sekunden ein und drücken Sie Speichern. Der aktualisierte Wert wird im Bereich Aktueller Zustand des Fensters angezeigt.
9. Die drei Spülstationen können zum Spülen, Desinfizieren, Stabilisieren oder für jede andere gewünschte Funktion verwendet werden. Konfigurieren Sie den Spülplan, indem Sie im Menü Spülen auswählen. Sie können die Spülzeit und die Wartezeit in jeder Spülstation mit den Umschaltreglern in jedem Feld einstellen. Drei Umschaltknöpfe im Bereich Spüloptionen auf der rechten Seite des Fensters zeigen an, wann die Spül- und Warteparameter aktiviert sind. Sie können jede beliebige Kombination dieser Optionen wählen.
10. Nachdem der Plan im Fenster Spülzeit festgelegt wurde, drücken Sie Speichern, um die Änderungen zu sichern, und kehren Sie dann zum Fenster Sequenz zurück.
11. Jetzt, da die Sequenz definiert ist, kann sie in einer Platte verwendet werden. Drücken Sie die Zurück-Taste, um zum Hauptfenster zurückzukehren.
