VIDEO: Forscher vergleicht EVOM3 mit einer Ussing-Kammer
von Benjamin Dubansky, PhD, Tierphysiologe/Forscher
Eine Ussing-Kammer wird verwendet, wenn Barriereuntersuchungen an einem herausgenommenen Epithelgewebe durchgeführt werden. Ähnliche Messungen können in Wellplatten mit einem EVOM-Serie TEER-Messgerät durchgeführt werden, das für Epithelgewebe verwendet wird, das in einer Zellkultur-Wellplatte bis zur Konfluenz gewachsen ist. Während EVOM-Messungen nur qualitativ sind, ist Ihr Durchsatz mit einem EVOM3 deutlich höher. Die EVOM-Geräte sind tragbar und wesentlich kostengünstiger als eine Ussing-Kammer. Hier erklärt Ben Dubansky, PhD, die Unterschiede zwischen EVOMs und Ussing-Kammern.
Das EVOM ist eine spezielle Art von Voltmeter zur Messung elektrischer Eigenschaften über eine Zellschicht in der Kultur oder eine biologische Membran. Wir messen TEER (TER) – transepitheliale elektrische Resistenz. Das EVOM3 ermöglicht es uns, entweder den Widerstand oder die Spannung über diese Membranen oder Zellen in der Kultur genau zu messen.
EVOM3 versus Ussing-Kammer
Herausgenommenes Gewebe oder kultiviertes Gewebe
EVOM3 klingt ähnlich wie die Ussing-Kammer, ist es aber nicht ganz. Die Ussing-Kammer erzeugt ein gleichmäßiges Feld über die Membran, das es ermöglicht, eine konstante Spannung über das Epithel anzulegen und gleichzeitig eine gleichmäßigere Überwachung der gesamten Epithelplatte durchzuführen. Die Ussing-Kammer ist wirklich für herausgenommenes Gewebe gedacht. Zum Beispiel kann man ein Stück Darm herausschneiden und in einer Ussing-Kammer kultivieren, um Transport- oder Barriereeigenschaften zu untersuchen, ähnlich wie ich es gerade beschrieben habe.
Einzelprobe oder hoher Durchsatz
Der Nachteil einer Ussing-Kammer ist, dass man nur wenige Proben gleichzeitig bearbeiten kann. Eine Ussing-Kammer ist definitiv keine 24-Well-Platte. Es gibt Möglichkeiten, das EVOM3 so anzupassen, dass man Ussing-Kammer-ähnliche Daten mit höherem Durchsatz erhält. Obwohl das EVOM3 nicht so genau ist wie eine Ussing-Kammer, ist es dennoch eine solide Plattform mit deutlich höherem Durchsatz als eine Ussing-Kammer.
Verbesserung der Genauigkeit des EVOM3 mit EndOhm
Die einfachste Möglichkeit, das EVOM3 zu verwenden, besteht darin, während eines Experiments Messungen durchzuführen, um Veränderungen im Verlauf einer Behandlung zu überwachen. Oder Sie können die EndOhm-Elektrodenkonfiguration verwenden. Obwohl das EVOM3 nicht so genau ist wie die Ussing-Kammer, können Sie mit der EVOM-Serie, insbesondere den neuen Modellen (EVOM3), dennoch Ussing-Kammer-ähnliche Daten erhalten.
Wenn Sie mehr Genauigkeit benötigen, können Sie die EndOhm-Elektrodenkonfiguration verwenden, die an das EVOM3 angeschlossen wird. Dabei müssen Sie den Einsatz entfernen und in eine Kammer einsetzen, die perfekt ausgerichtete Elektroden hat, ähnlich wie eine Ussing-Kammer. Das ist sehr gut gemacht, um schnelle und konsistente Messungen zu ermöglichen. Sie müssen Ihre Einsätze bewegen. Das ist ein langsamerer Prozess, aber wenn Sie sorgfältig reinigen und sterile Arbeitsbedingungen einhalten, sind die EndOhm-Elektroden hervorragend. Sie sind zwar etwas langsamer, sodass der Durchsatz geringer ist, aber immer noch viel schneller als eine Ussing-Kammer. Und Sie verwenden kultivierte Zellen.
Obwohl das EVOM3 nicht so genau ist wie eine Ussing-Kammer, ist es dennoch eine solide Plattform mit deutlich höherem Durchsatz als eine Ussing-Kammer. Sie erhalten solide, qualitative Daten mit einem tragbaren EVOM3-Messgerät zu einem Bruchteil der Kosten eines kompletten Ussing-Systems.
