WPI MICRO-ePORE ピンポイント細胞貫通器

  • microepore2
  • micro-epore-well-ref-electrode
  • micro-epore-holders
  • micro-epore-system-w-pump-text
  • micro-epore_package_contents_labeled_1

MICRO-EPORE

プローブ

価格はアメリカ合衆国、カナダ、プエルトリコのみ有効です。

標的細胞微小注入および胚の生存率向上のためのピンポイントセルペネトレーター

新しいWPI MICRO-ePORE™ピンポイントセルペネトレーターは、卵母細胞や着床前段階の哺乳類胚への多様な化合物や生体分子の効率的な細胞微小注入に使用できるシンプルで多用途なシステムです。特許出願中のFlutter Electrode Technologyは、トランスジェニック動物の微小注入や細胞操作時に膜を裂いたり損傷したりすることなく、小さく清潔で正確な膜貫通をサポートします。

プラチナワイヤー電極ホルダー （別売）をご用意しています！

注意：システム画像に表示されている微小注入ポンプおよびその他のアクセサリーは別売です。

保証オプションの詳細については、 こちらをクリック.

*注意：Femtojetで購入したハンドルにePOREのプラスチックヘッドをねじ込もうとしないでください。ねじ山が異なり、部品を損傷します。

詳細

特徴

  • タッチスクリーン表示 – 手袋使用可能な抵抗膜式タッチパネル
  • フットスイッチまたはタッチスクリーンによる注入制御 
  • 直感的なユーザーインターフェース 
  • タッチスクリーンによるユーザー調整可能な周波数と電圧 
  • 小さな設置面積 
  • 4つのユーザープログラム可能なプロトコル 
  • アクティブなプローブ注入を示す調整可能な音声連続トーンと、総注入回数を示すカウンター 
  • エレクトロポレーションよりも少ない電圧で細胞膜の特定の領域を貫通
  • プラチナワイヤー付き電極ホルダーが利用可能

利点

  • 注入された胚の生存率を向上
  • 柔軟なシステム
    • WPIのPV820/PV830や、Eppendorf Femtojet®や成重製作所のインジェクターなどの他の人気マイクロインジェクションシステムと統合可能（Femtojet® 4IはEppendorfの登録商標です）
    • 多様な化合物や生体分子のマイクロインジェクション – DNA、RNA、タンパク質
    • さまざまな種の胚の着床前後 – マウス、齧歯類、サル、ウシ、ブタ、ゼブラフィッシュなど
  • 操作が簡単な細胞インジェクター – フットスイッチ制御によるハンズフリー操作 
  • ユーザー調整可能な周波数と電圧 – 4つのプログラム可能なプロトコル
  • 小型で携帯可能なユニットが貴重な作業台スペースを節約
  • 主要なすべての倒立顕微鏡に対応
  • プレミアム保証あり

対象アプリケーション

  • 卵母細胞および着床前段階の哺乳類胚への細胞マイクロインジェクション、二細胞期胚の細胞質へのCRISPR-Cas9試薬のマイクロインジェクションを含む 
  • 前核期齧歯類受精卵のマイクロインジェクション 
  • ゼブラフィッシュにおける遺伝子サイレンシング

シンプルでエレガントなソリューション

新しいWPI MICRO-ePORE™ ピンポイント細胞ペネトレーターは、卵母細胞や着床前段階の哺乳類胚に多様な化合物や生体分子を効率的にマイクロインジェクションするためのシンプルで多用途なシステムです。特許出願中のFlutter Electrode Technologyは、トランスジェニック動物のマイクロインジェクションや細胞操作時に膜を裂いたり損傷したりすることなく、小さく清潔で正確な膜貫通を支援します。

マイクロエポアセットアップ

ピンポイント細胞ペネトレーター vs. エレクトロポレーション

エレクトロポレーションは、エレクトロポレーションキュベット内の細胞の細胞膜に孔を開けるために、媒体中で電気パルスを使用し、細胞膜を貫通して遺伝物質を導入します。

WPIのMICRO-ePORE™ ピンポイント細胞ペネトレーターは、細胞マイクロインジェクションの目的で従来のエレクトロポレーションに比べていくつかの利点を提供します。 

  • 当社のピンポイント細胞マイクロインジェクターは、細胞膜にポートを開くためにはるかに低い電圧を使用します。
  • エレクトロポレーションは細胞膜に多数の孔を開けるショットガン方式です。これに対し、当社のピンポイント細胞マイクロインジェクターは、細胞マイクロインジェクションのまさにそのポイントで細胞膜の特定の領域を狙います。
  • ピンポイント細胞貫通を用いた場合、エレクトロポレーションに比べて胚の生存率が著しく高いです。

実験データ

負の静電容量を利用した電気生理学的システムは、発生生物学研究において哺乳類の卵母細胞や着床前・着床後胚への多様な生体分子の細胞マイクロインジェクションに日常的に使用されてきました。現在は入手できないシステムである細胞内アンプWPI Cyto721は、針が細胞膜を最小限の物理的損傷で貫通することを可能にしました。最近では、この技術が二細胞期マウス胚へのCRISPR/Cas9試薬のマイクロインジェクションによる遺伝子導入に応用されています。著者らはこの方法でノックイン効率の大幅な向上と胚の高い生存率を示しました。

新しいMICRO-ePORE™ピンポイント細胞貫通装置は、高い胚生存率をもたらす細胞マイクロインジェクションのための独自のソリューションを提供します。この装置は、注入部位のすぐ下の膜上に局所的な振動電場を作り出します。MICRO-ePORE™は細胞膜に小さく可逆的な穴を開け、そこから物質をマイクロインジェクションします。研究者は用途に最適な信号の振幅と周波数を決定します。従来の細胞マイクロインジェクションとは異なり、MICRO-ePORE™を用いた標的マイクロインジェクションでは膜が裂けず、優れた胚生存率を可能にします。この技術はシンプルで洗練されています。新しいMICRO-ePORE™細胞貫通装置のプロトタイプは、マウスおよび霊長類の着床前胚、さらにゼブラフィッシュの尾での遺伝子サイレンシングにおいて成功裏に試験されています。

MICRO-ePORE™は、二細胞期胚へのマイクロインジェクションによる大きな挿入を伴うCRISPR/Cas9媒介ノックインマウスの作製など、幅広い用途向けに設計されています。MICRO-ePORE™はゼブラフィッシュの尾におけるモルフォリノオリゴマー（アンチセンス「ノックダウン」）の正確なマイクロインジェクションを実現しました。

ウェルスタイル参照電極オプション

ウェルスタイル参照電極のセットアップ例

プローブスタイル参照電極オプション

ウェルスタイル参照電極のセットアップ例

 

これはUCLA/MCDBのFangtao ChiとUtpal BanerjeeによるEppendorfインジェクターを用いたプローブスタイル参照電極の例です。

プローブスタイル参照電極

MICRO-ePORE™ のセットアップ

新しいWPI MICRO-ePORE™ ピンポイント細胞貫通装置は、卵母細胞や着床前段階の哺乳類胚に多様な化合物や生体分子を効率的にマイクロインジェクションするためのシンプルで多用途なシステムです。特許出願中のFlutter Electrode Technologyは、膜を裂いたり損傷させることなく、小さく清潔で正確な膜貫通を支援します。ここでGabeがシステムをセットアップし、すべてのコンポーネントを接続しています。

 

リソース

MICRO-ePORE™ バージョン2
Rev. 2 (シリアル番号182508以降のユニット用)  		MICRO-ePORE™ バージョン1
Rev. 1 (シリアル番号182508までのユニット用) 
取扱説明書 v2
クイックスタートガイド v2 		取扱説明書 v1 
クイックスタートガイド v1

 

MICRO-ePORETM パンフレット

MICRO-ePOREを使用した胚溶解の減少は可能か W.Gardiner, J.Kenyon, T.Bell, S.Atkins

 

 

ビデオ

MICRO-ePORE™ システムの開梱

 

 

MICRO-ePORE™ システムの接続

 

MICRO-ePORE™ 電極ホルダーの接続

仕様

システムに含まれるもの:

(1) MICRO-ePORE™ コントローラー
(1) 銀線付き電極ホルダー。以下からお選びください:
   • WPI #300863 WPI MICRO-ePORE ホルダー
   • WPI #300864 Femtojet® MICRO-ePORE ホルダー
   • WPI #300865 Narishige MICRO-ePORE™
(1) マイクロ電極ホルダーインターフェースケーブル
(1) ウェル型参照電極
(1) プローブ型参照電極アセンブリ
(1) 13142 フットスイッチ
(1) 電源コード
(1) 99789 MICRO-ePORE™ 接地ケーブル
(1) 取扱説明書

仕様 説明
電圧パラメータ 0–3.0 V、1 mV刻み
周波数パラメータ 50–3000 Hz、1 Hz刻み
ピペット抵抗アラーム閾値最大 500 MΩ
寸法 19.7 × 12.7 × 7.6 cm (7.75 × 5 × 3 in.) 
重量 0.9 kg (2 lb.)
認証 CE, RoHS

参考文献

Bałakier H, Pedersen RA. 着床前マウス胚における内細胞塊と栄養外胚葉系譜への細胞配分。Dev Biol. 1982年4月; 90(2):352-62. PMID: 7075865 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7075865)

Lawson KA, Pedersen RA. マウスの胚葉形成時における胚内内胚葉の細胞運命、形態形成運動および集団動態。Development. 1987年11月;101(3):627-52. PMID:3502998 (https://www-ncbi-nlm-nih-gov.myaccess.library.utoronto.ca/pubmed/3502998)

Wianny F, Zernicka-Goetz M. 初期マウス発生における二本鎖RNAによる遺伝子機能の特異的干渉。Nat Cell Biol. 2000年2月; 2(2):70-5. PMID:10655585 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10655585)

Chazaud C, Yamanaka Y, Pawson T, Rossant J. Grb2-MAPK経路を介したマウス胚盤胞における上胚葉と原始内胚葉の早期系譜分離。Dev Cell. 2006年5月; 10(5):615-24. PMID:16678776 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16678776)

Swann K, Campbell K, Yu Y, Saunders C, Lai FA. マウス卵におけるPLCzeta発現をモニターするためのルシフェラーゼキメラの使用。Methods Mol Biol. 2009; 518:17-29. doi: 10.1007/978-1-59745-202-1_2. PMID:19085135 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19085135)

Posfai E, Petropoulos S, de Barros FRO, Schell JP, Jurisica I, Sandberg R, Lanner F, Rossant J. 初期マウス胚における系譜分離中の位置依存およびHippoシグナル依存の可塑性。Elife. 2017年2月22日; 6. pii: e22906. doi: 10.7554/eLife.22906. PMID: 28226240 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28226240)

Gu B, Posfai E, Rossant J. 2細胞期マウス胚へのマイクロインジェクションによる標的大型挿入の効率的生成。Nature Biotechnology 2018年8月; 36(7):632-637. doi: 10.1038/nbt.4166. 2018年6月11日電子版。PMID: 29889212 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29889212)

関連記事