顕微鏡の基本

顕微鏡は標準的な実験室用具ですが、特定の用途に適した顕微鏡を購入するのは難しいことがあります。まず、どのように機器を使用するかを考えてください。スライドを観察しますか、小動物を解剖しますか、それとも手術を行いますか?(用途によって必要な作業距離や倍率が決まります。)どのようなスタンドを使いますか?(ブームスタンドアーティキュレーティングアーム、またはポストスタンド)教室で使用しますか?(トリノキュラースコープはカメラを取り付けるオプションがあります。)カメラは必要ですか?(カメラがあれば、顕微鏡の映像をPCやテレビに映したり、静止画を撮影したりできます。)これらの質問への答えが、必要な作業距離、倍率のレベル、取り付けスタンドの種類や必要なハードウェアを決定するのに役立ちます。

顕微鏡の部品

接眼レンズ–接眼レンズには2枚以上のレンズが含まれており、さまざまな接眼レンズを顕微鏡で使用できます。一般的な接眼レンズの倍率は10倍、15倍、20倍です。接眼レンズには通常、より鮮明に焦点を合わせるための視度調整機能があります。瞳孔間距離や視度調整についての情報はhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/kohler/diopter/index.htmlをご覧ください。

対物レンズ–対物レンズは試料からの光を集めます。通常、3~5本の対物レンズがノーズピース(対物レンズ回転盤)にねじ込まれています。対物レンズはさまざまな倍率や種類があります。対物レンズの種類の詳細については、「顕微鏡の対物レンズ」をご覧ください。

ステージ–ステージは試料を支える台座です。通常、中央に光が通る穴があり、試料はその穴の上に配置されます。

コンデンサー–コンデンサーは光源からの光を試料に集めるレンズです。

光源–光源は鏡で反射させた環境光の場合もありますが、通常はハロゲンランプ、LEDライト、またはレーザーです。

焦点調整ノブ–粗動および微動の焦点調整ノブを使ってステージを上下に動かし、接眼レンズで試料に焦点を合わせます。

用語の定義

顕微鏡について話す際に役立つ用語を以下に示します:

視野(FOV)–これは顕微鏡の接眼レンズを通して見える光の円の直径です。倍率が高いほど視野は狭くなります。

テックチップ:ほとんどの複合顕微鏡では、視野は視野数と対物レンズの倍率を使って計算できます。FOV = 視野数 ÷ 対物レンズの倍率。例えば:
視野数18mmで10倍対物レンズの場合 → 18 ÷ 10 = 1.8mm = 1800µmの視野。
視野数20mmで40倍対物レンズの場合 → 20 ÷ 40 = 0.5mm = 500µmの視野。

作業距離–試料の上部と対物レンズの下部との距離を作業距離といいます。小動物を解剖する場合は、スライドを観察する場合よりも作業距離が長く必要です。

倍率–画像がどれだけ拡大されるかを示します。例えば、10倍の倍率は試料を10倍大きく見せます。倍率が高いほど視野は狭くなります。顕微鏡の総倍率は接眼レンズの倍率と対物レンズの倍率の積です。

視度–技術的には、視度はレンズの補正値の単位で、焦点距離(メートル)の逆数に等しいです。焦点距離が1メートルのレンズは視度1、2メートルのレンズは視度1/2です。各顕微鏡の接眼レンズには視度調整機能があり、左右の目の視力差を補正して画像を微調整できます。

数値開口(N.A.)–この数値は屈折媒質(空気(乾燥対物レンズ)=屈折率1.00、油=1.515)と屈折角に直接関係しています。油浸対物レンズは乾燥対物レンズよりも高いN.A.を持ちます。屈折角は対物レンズと試料の距離によって決まります。N.A.が高いほど、対物レンズの解像度が高くなります。

解像度–解像度は視界の鮮明さを表します。解像度は視野内の2点がどれだけ近くても区別して見えるかを決定します。

瞳孔間距離–これは観察者の両目の間の距離です。双眼顕微鏡では、接眼レンズの間隔を調整して、両方の接眼レンズを通して見たときに1つの光の円として見えるようにできます。

 

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