手頃な新型インジェクター：PV850システムの設定
[by Gabe Gonzalez]
PV850インジェクターは細胞内注入やさまざまなマイクロインジェクション作業を簡素化するために設計されています。PV850は調整された空気圧を使用して細胞に液体を注入します。注入量はピコリットルからナノリットルまで対応します。ポートは最大87 PSIの高圧噴射用の正圧を供給します。PV850 マイクロインジェクターは、補償圧（逆流防止）と噴射圧を別々に調整可能で、注入圧力から補償圧力へ自動的に切り替わる精密なタイミング回路を備えています。タイミング、注入圧力、補償圧力は直感的なタッチスクリーンユーザーインターフェースで独立して調整可能です。時間間隔は注入圧力設定により2秒から10ミリ秒以下まで設定できます。注入圧力の間隔はフットスイッチ、手動、またはコンピューター制御のTTLパルスでトリガーされます。PV850は薬剤などの非常に少量の液体を細胞や小さな細胞小器官に注入するために設計されています。圧力注入は電気イオノフォレシスの代替として特に有用で、荷電イオンの使用を必要としません。
特徴
- 調整可能な補償圧力と注入圧力
- 圧力出力：0.3～87 PSI
- 注入はタッチスクリーン、フットスイッチ、またはコンピューター制御のTTLパルスで手動トリガー可能
- 低容量チューブ組立
利点
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インジェクターの直感的なユーザーインターフェース |
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小型設計で作業台のスペースをほとんど取らない |
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タッチスクリーンとコントロールノブで簡単に操作可能 |
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ピコリットル単位で単一細胞に注入 |
PV850インジェクターのセットアップ（ハードウェアセットアップ）
システムには以下のコンポーネントが含まれています：
- (1) PV850 インジェクター
- (1) フットスイッチ
- (1) 300753 PV850 キャピラリーキット
- (4) 1.0 mm ピペットガスケット（緑）
- (4) 1.2 mm ピペットガスケット（黒）
- (4) 1.5 mm ピペットガスケット（赤）
- (4) 1.65 mm ピペットガスケット（白）
- (2) シーリングOリング
- (1) ピペットハンドル
- (1) ピペットホルダー
- (1) 圧力源に接続するためのチューブ組立
- (1) キャピラリーキットをPV850に接続するためのアダプター用チューブ組立
- (1) 3316 ピコポンプ用入力キット
- (1) 0.25インチ NPT 継手（窒素タンクレギュレーター用）
- (1) 10フィート ハードチューブ
- (1) 真空継手
- (1) CBL102 6フィート BNCケーブル
- (1) 803130 ステレオスプリッターケーブル（TTL制御用にコンピューターへ接続）
- (1) AC/DC 24 V 電源アダプターとコード
システムをセットアップするために最初に行うのは物理的な接続です：
- 電源をユニットの背面に接続し、壁のコンセントに差し込みます。
- フットスイッチコネクターをコントローラーの背面パネルのフットスイッチポートに差し込みます。フットスイッチコネクターケーブルには「Back Panel」とラベルが付いています。
注意：まだキャピラリーキットは接続しないでください。 - PV850の電源を入れます。電源投入時にスタートアップ画面が表示され、PV850が自己診断を行います。自己診断が完了したら、必要な各種コンポーネントを接続できます。
- 最初の接続は外部圧力源からの入力接続です。付属の1/4インチの硬質チューブは適切な長さに切断して使用できます。これは圧力源、タンク、または圧力ポンプの接続に使います。硬質チューブを取り付けるには、機器背面のクイックコネクト継手にしっかりと差し込みます。十分に差し込まれると固定され、引き抜けなくなります。
チューブを外すには、周囲のカラーを押し込みながらチューブを引き抜きます。 - 次にキャピラリーホルダーチューブアセンブリを接続します。
- アダプターチューブアセンブリの裸端をピペットハンドルに通します。
ピペットホルダー本体のバーブに接続します。
注意：チューブを取り付けたり外したりする際にバーブが折れないように注意してください。 - ピペットハンドルをバーブにスライドさせ、ピペットホルダー本体に慎重にねじ込みます。
注意：ねじ山をつぶさないように注意してください。 - 適切なサイズのガスケットをキャップに置きます。
ガスケットの色 緑 黒 赤 白 ピペット外径 1.0mm 1.2 mm 1.5mm 1.65 mm - 小さなチューブのもう一方の端にはクイックコネクターがあります。付属の青いPV850チューブアセンブリに接続します。
- アダプターチューブアセンブリの裸端をピペットハンドルに通します。
- 注入ポートが無効になっていることを確認します。無効でない場合は、ディスプレイの設定エリアをタッチして設定メニューに入り、ポートONボタンをタッチしてポートOFFに設定します。
- イージーコネクトインジェクターコネクターをPV850前面のインジェクターポートに合わせ、しっかりと差し込み、わずかに時計回りに回して固定します。
- コンピューターやパルスジェネレーターを使ってTTLパルスを送信し、注入をトリガーしたい場合：
- Y型ステレオスプリッター（803130）をPV850の背面にあるフットスイッチポートに接続します。
- CBL102ジャックをY型ステレオスプリッターのメス端子の一つに接続します。
- BNCケーブルをパルスジェネレーターの適切なTTLポートに差し込みます。
- 鈍い端のマイクロピペット（引き伸ばしたキャピラリーガラス）をガスケットを通してキャップに挿入し、本体に差し込みます。キャップをねじで固定します。ねじキャップとゴム製ガスケットがガラス製マイクロピペットをしっかりと保持します。
すべての物理的な接続を設定した後は、直感的なタッチスクリーンインターフェースを使って注入設定を行う準備が整いました。次のビデオでは、ソフトウェアインターフェースの使い方を紹介し、マイクロインジェクションのための注入プロトコルを設定する方法を説明します。詳細なマイクロインジェクションの技術についてはマニュアルをご参照ください。
