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Pourquoi mes relevés TEER sont-ils instables ? Causes, solutions et prévention
Des lectures instables de TEER peuvent résulter de divers facteurs techniques et biologiques, allant de l’état des électrodes et des variations de température à la variabilité du milieu et aux bulles d’air. Cet article aide les chercheurs à identifier les sources les plus courantes d’incohérence dans les mesures et propose des solutions pratiques pour améliorer la stabilité et la reproductibilité. Il clarifie également comment distinguer les véritables changements biologiques de l’intégrité de la barrière du bruit de mesure indésirable, garantissant une interprétation des résultats plus fiable.
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Comprendre le TEER : un outil clé pour étudier l'intégrité des barrières
Les barrières cellulaires, telles que l’épithélium intestinal, la barrière hémato-encéphalique ou l’endothélium cornéen, sont essentielles pour contrôler ce qui entre et sort des tissus. Une barrière compromise peut entraîner des maladies, tandis qu’une barrière solide est indispensable pour maintenir la santé.
Comprendre le fonctionnement des barrières protectrices de notre corps est crucial pour faire progresser les traitements et développer de nouvelles thérapies. Pour les chercheurs, mesurer avec précision l’intégrité des barrières est vital dans des domaines allant du développement de médicaments à la modélisation des maladies. L’un des outils les plus importants utilisés par les scientifiques pour étudier ces barrières est la TEER (résistance électrique transépithéliale ou transendothéliale). Cette technique de mesure puissante fournit des informations précieuses sur l’intégrité et la fonction des barrières cellulaires qui protègent nos organes et tissus. La TEER est une technique de référence, non invasive, pour quantifier l’intégrité et la perméabilité des monocouches cellulaires cultivées.
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Organoïdes en recherche biomédicale : opportunités et défis
Les organoïdes sont des modèles miniatures tridimensionnels d’organes et de tissus, cultivés in vitro à partir de cellules souches ou d’autres cellules progénitrices capables de se différencier en un type cellulaire présent dans un organe ou tissu donné. Ils reproduisent fidèlement la structure et la fonction des organes humains, ce qui en fait des outils précieux pour étudier le développement humain, la modélisation des maladies, la découverte de médicaments et la médecine personnalisée.
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Améliorer le contrôle qualité dans les thérapies cellulaires
Les thérapies cellulaires ont révolutionné le domaine de la médecine régénérative, offrant des traitements prometteurs pour diverses affections médicales. Maintenir la sécurité, l'efficacité et la cohérence des thérapies à base de cellules est essentiel pour leur application réussie en milieu clinique. Les mesures de contrôle qualité jouent un rôle crucial dans l'évaluation de la qualité de ces thérapies, depuis leur développement jusqu'à leur administration. Cet article explore les approches actuelles du contrôle qualité dans les thérapies cellulaires, y compris l'utilisation de techniques de mesure fonctionnelle telles que la résistance électrique transepitheliale (TEER), pour garantir la qualité et la sécurité de ces traitements prometteurs.
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COMMUNIQUÉ DE PRESSE : Présentation du Conseil Consultatif Scientifique de World Precision Instruments
SARASOTA, Floride, 10 novembre 2023 /PRNewswire/ -- World Precision Instruments (WPI), un fournisseur de premier plan d'instruments et d'équipements de laboratoire de haute qualité pour la recherche fondamentale et le développement de médicaments, est fier d'annoncer la création de son Conseil consultatif scientifique (SAB). Composé d'experts renommés dans diverses disciplines scientifiques, le SAB jouera un rôle crucial dans l'orientation et la promotion de l'engagement de WPI envers l'innovation et l'excellence dans la recherche scientifique.
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Partie 7 : Que signifie GxP pour moi ?
GxP est un cadre essentiel pour les laboratoires de recherche, garantissant l'intégrité des données, la sécurité des produits, la conformité réglementaire et l'efficacité opérationnelle. En respectant ces directives, les laboratoires peuvent produire des recherches fiables, protéger la santé publique et maintenir les normes les plus élevées de responsabilité scientifique et éthique. En rationalisant les rapports de conformité et en simplifiant la préparation des audits grâce à un logiciel conforme à GxP, les organisations peuvent éviter les retards, réduire le risque de sanctions pour non-conformité et démontrer avec confiance leur engagement envers le respect des réglementations.
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Importance de la mesure de la résistance électrique transepitheliale/transendothéliale (TEER) dans les modèles pulmonaires in vitro
Les cellules épithéliales et endothéliales sont reconnues pour leur fonction de barrière, telle que la perméabilité sélective. Le tissu pulmonaire est composé de couches cellulaires épithéliales, situées à côté des couches endothéliales, permettant l’échange d’oxygène et de dioxyde de carbone entre le poumon et le sang. Actuellement, le principal domaine d’intérêt de la communauté de recherche biomédicale est de comprendre les détails de l’infection causée par ce nouveau coronavirus (2019-nCoV) ou par des virus similaires. Ce nouveau virus peut perturber la capacité normale du poumon à se nettoyer pour éliminer les particules étrangères, et la perméabilité sélective ou la fonction de barrière du poumon peut être gravement altérée. L’effet physiologique défavorable peut se maintenir une fois que la cascade inflammatoire est déclenchée.
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Applications de la mesure TEER dans la découverte de médicaments
En 2022, la Food and Drug Administration (FDA) des États-Unis a approuvé 37 nouveaux médicaments, dont 20 étaient des entités chimiques et 17 des produits biologiques. En 2023, la découverte de médicaments reste dynamique avec de nombreuses avancées résultant des évolutions dans les types de médicaments développés ainsi que des nouveaux essais innovants lancés pour évaluer les médicaments en phase préclinique. Le développement thérapeutique reste fortement axé sur les maladies touchant de larges populations pour lesquelles il existe un manque de traitements efficaces, les lancements de médicaments les plus attendus en 2023 étant prévus dans les domaines du cancer, de la maladie d’Alzheimer, des maladies cardiovasculaires et de la colite ulcéreuse.
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Fournitures de laboratoire indispensables quand vous en avez besoin
Dans tout laboratoire, disposer des fournitures de laboratoire essentielles est presque aussi important que d'avoir les équipements majeurs. Choisir un fournisseur réputé pour ces fournitures nécessaires est aussi crucial que d'avoir des fournitures de laboratoire de qualité quand vous en avez besoin. WPI souhaite être votre partenaire dans la découverte précoce de médicaments, et nous stockons une grande variété de fournitures de laboratoire, dont beaucoup peuvent être expédiées le jour même. Avoir une variété de fournitures de laboratoire prêtes à être expédiées fait de nous un partenaire de recherche fiable. Voici quelques-unes des fournitures populaires que nous gardons en stock pour répondre à vos besoins pour votre prochaine expérience.
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Contrôle de qualité des thérapies à base de cellules épithéliales pigmentaires rétiniennes
Les thérapies cellulaires sont apparues comme une approche prometteuse pour traiter diverses affections médicales, offrant le potentiel de régénérer les tissus endommagés, de restaurer la fonction cellulaire normale, voire d’agir comme des cellules cytotoxiques ciblant et détruisant les cellules malades telles que les cellules cancéreuses. À mesure que le domaine des thérapies cellulaires et de la médecine régénérative progresse, garantir la qualité et la sécurité des thérapies cellulaires est d’une importance capitale. Les mesures de contrôle qualité jouent un rôle crucial dans le processus de fabrication des thérapies cellulaires, la résistance électrique trans-épithéliale (TEER) s’imposant comme un outil précieux pour évaluer l’intégrité et la fonctionnalité des cellules utilisées dans ces thérapies. Ici, nous mettons en avant l’utilisation de la TEER pour le contrôle qualité des cellules de l’épithélium pigmentaire rétinien (RPE), une thérapie cellulaire prometteuse pour les maladies dégénératives de la rétine1.
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Conseils pour choisir un fournisseur fiable de matériel de laboratoire
Choisir un fournisseur d’équipements de laboratoire fiable est crucial pour garantir la qualité, la fiabilité et la livraison dans les délais des équipements dont vous avez besoin. Lorsque votre recherche est en jeu, vous avez besoin d’une entreprise en laquelle vous avez confiance, d’un fournisseur avec un historique éprouvé et d’une équipe de service pour vous soutenir. Voici quelques considérations importantes lors de la sélection d’un fournisseur d’équipements de laboratoire.
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NOTE D'APPLICATION : Utilisation du Celloger® Mini Plus pour Observer les Changements Morphologiques et l'Activité Phagocytaire dans une Lignée Cellulaire de Macrophages
Comme les globules blancs responsables de la fonction immunitaire sont des cellules en suspension qui circulent dans les vaisseaux sanguins, les études en immunologie utilisent souvent diverses lignées cellulaires en suspension provenant de globules blancs. Contrairement aux cellules adhérentes, le moindre mouvement d'une plaque lors de sa localisation au microscope fait flotter les cellules en suspension. En plus des problèmes causés par l'instabilité de la température et du CO2, il est en fait impossible d'utiliser un microscope traditionnel pour surveiller les cellules en temps réel. Par conséquent, pour surveiller de manière stable les cellules en suspension, un dispositif d'imagerie cellulaire en direct tel que Celloger® Mini Plus, qui fonctionne à l'intérieur d'un incubateur, est essentiel1. De plus, avec Celloger® Mini Plus, la caméra à l'intérieur du système se déplace pour capturer les images des cellules à plusieurs positions afin de maintenir l'échantillon cellulaire dans un état stable, au lieu d'avoir une platine mobile avec une plaque dessus. Lorsque les cellules en suspension ont été surveillées à la fois par Celloger® Mini Plus et par microscope, l'imagerie avec Celloger® Mini Plus était plus stable comparée à l'utilisation d'un microscope où plusieurs cellules étaient hors de mise au point (Figure 1).
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FAQ sur la mesure TEER
Voici quelques questions fréquemment posées (FAQ) concernant la mesure TEER à l’aide d’un EVOM2.
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FAQ : Résolution des problèmes de lectures de résistance instables avec un ENDOHM
Une de nos questions fréquemment posées (FAQ) concerne les mesures TEER avec un EndOhm. Si les lectures de résistance de votre ENDOHM ne se stabilisent pas, vous devrez peut-être effectuer un dépannage.
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VIDÉO : Comment remplacer les lames d'électrode STX4
La nouvelle électrode STX4 fonctionne avec l'EVOM3, et les lames sont remplaçables. L'EVOM3 est utilisé pour effectuer des mesures TEER (TER) dans des plaques de culture cellulaire. Voici un tutoriel rapide pour vous montrer comment remplacer les lames.
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Comment choisir les électrodes pour effectuer des mesures TEER
La résistance électrique transepitheliale (TEER), également appelée résistance transepitheliale (TER), est utilisée pour surveiller la santé cellulaire. La TEER comprend des mesures de la voie transcellulaire (c’est-à-dire la résistance due à une cellule individuelle) et de la voie paracellulaire (c’est-à-dire la résistance due à la formation des jonctions cellulaires). La TEER est couramment utilisée pour surveiller la confluence cellulaire. Les valeurs de TEER peuvent indiquer des changements dans la perméabilité du monocouche cellulaire, montrant la fonction de barrière du monocouche de cellules telles que les cellules endothéliales (microvaisseaux cérébraux) et épithéliales (alvéolaires, rénales et intestinales). Des valeurs élevées de TEER reflètent généralement des monocouches cellulaires ou des jonctions cellulaires plus serrées (Lewis 1996, Matter et Balda 2003, Denker et Sabath 2011). Quelques avantages majeurs des systèmes de mesure TEER WPI sont décrits ci-dessous. Les valeurs TEER (analyse électrophysiologique) peuvent être combinées avec d’autres méthodes d’analyse pour mieux comprendre un phénomène biologique. Par exemple, une diminution de la valeur TEER peut indiquer une perméabilité accrue du monocouche, ce qui peut être confirmé par un test utilisant une molécule traceuse (fluorescéine-dextran).
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VIDÉO : Quelle est la différence entre les inserts de culture cellulaire suspendus et debout utilisés dans les chambres EndOhm
Les chambres WPI EndOhm sont utilisées avec le compteur EVOM2 de WPI pour effectuer des mesures TEER (résistance électrique transepitheliale). Ici, Subhra montre la différence entre les inserts de culture cellulaire suspendus et les inserts de culture cellulaire debout.
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Comment régler l'écart sur vos chambres WPI EndOhm
Les chambres EndOhm de WPI sont utilisées avec le compteur EVOM2 de WPI pour réaliser des mesures TEER (résistance électrique transepitheliale). Chaque chambre EndOhm est fournie avec un disque « espacement » pour calibrer l’écart entre les deux électrodes de la chambre. Un écart constant garantit des mesures fiables. Ici, Subhra montre comment calibrer vos chambres.
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Électrodes de resurfaçage dans une chambre WPI EndOhm
Les chambres WPI EndOhm sont utilisées avec le compteur EVOM2 de WPI pour effectuer des mesures TEER (résistance électrique transepitheliale). Après une utilisation intensive, votre mesure de résistance de fond peut commencer à augmenter. Vos électrodes peuvent nécessiter un resurfaçage pour éliminer l'accumulation de protéines, sucres et matériaux biologiques. Ici, Subhra montre comment nettoyer et resurfaçer vos chambres EndOhm.
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Choisir une chambre EndOhm compatible avec vos inserts de culture cellulaire
Les chambres EndOhm de WPI sont utilisées avec le compteur EVOM2 de WPI pour mesurer la TEER (résistance électrique transepitheliale) dans les inserts de culture cellulaire. Trois tailles de chambres sont disponibles pour les plaques à 6 puits, 12 puits et 24 puits. Ici, Subhra montre comment choisir une chambre EndOhm adaptée aux inserts de culture cellulaire que vous utilisez.
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Électrodes STX100 pour mesure TEER
Avec le développement d'un protocole de criblage à haut débit (HTS) pour accélérer la découverte de médicaments, une nouvelle gamme de plaques filtrantes pour culture cellulaire a été introduite par plusieurs grands fabricants d'inserts pour culture cellulaire. Ces plaques HTS comportent généralement 24 ou 96 inserts individuels de culture cellulaire "assemblés" en une seule plaque afin qu'elle puisse être manipulée par un appareil robotisé. En réponse à ces évolutions, WPI a développé un système REMS automatique et une électrode manuelle, STX100, pour les mesures TEER utilisant des plaques HTS.
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Entretien de l'endohm pour une longue durée de vie
La série de chambres EndOhm, utilisée avec le mesureur de résistance EVOM2 de WPI ou le Millicell ERS, est conçue pour fournir des mesures de résistance reproductibles et précises des tissus endothéliaux dans des coupelles de culture. Les valeurs de résistance obtenues avec le EndOhm sont cohérentes avec celles obtenues à l'aide d'une chambre Ussing bien conçue.