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¿Por qué son inestables mis lecturas TEER? Causas, soluciones y prevención
Las lecturas inestables de TEER pueden deberse a una variedad de factores técnicos y biológicos, desde el estado del electrodo y los cambios de temperatura hasta la variabilidad del medio y las burbujas de aire. Este artículo ayuda a los investigadores a identificar las fuentes más comunes de inconsistencia en las mediciones y ofrece soluciones prácticas para mejorar la estabilidad y la reproducibilidad. También aclara cómo distinguir los cambios biológicos reales en la integridad de la barrera del ruido no deseado en las mediciones, garantizando una interpretación más confiable de los resultados.
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Comprendiendo TEER: Una herramienta clave para estudiar la integridad de la barrera
Las barreras celulares, como el epitelio intestinal, la barrera hematoencefálica o el endotelio corneal, son fundamentales para controlar lo que entra y sale de los tejidos. Una barrera comprometida puede conducir a enfermedades, mientras que una barrera fuerte es esencial para mantener la salud.
Comprender cómo funcionan las barreras protectoras de nuestro cuerpo es crucial para avanzar en los tratamientos y desarrollar nuevas terapias. Para los investigadores, medir con precisión la integridad de la barrera es vital en campos que van desde el desarrollo de fármacos hasta la modelización de enfermedades. Una de las herramientas más importantes que los científicos utilizan para estudiar estas barreras es TEER (Resistencia Eléctrica Transepithelial o Resistencia Eléctrica Transendotelial). Esta poderosa técnica de medición proporciona valiosos conocimientos sobre la integridad y función de las barreras celulares que protegen nuestros órganos y tejidos. TEER es una técnica estándar de oro, no invasiva, para cuantificar la integridad y permeabilidad de monocapas celulares cultivadas.
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Organoides en la Investigación Biomédica: Oportunidades y Desafíos
Los organoides son modelos tridimensionales y en miniatura de órganos y tejidos que se cultivan in vitro a partir de células madre u otras células progenitoras con la capacidad de diferenciarse en un tipo celular presente en un órgano o tejido determinado. Imitan de cerca la estructura y función de los órganos humanos, lo que los convierte en herramientas valiosas para estudiar el desarrollo humano, modelar enfermedades, descubrir fármacos y la medicina personalizada.
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Mejorando el Control de Calidad en las Terapias Celulares
Las terapias celulares han revolucionado el campo de la medicina regenerativa, ofreciendo tratamientos prometedores para una variedad de condiciones médicas. Mantener la seguridad, eficacia y consistencia de las terapias basadas en células es fundamental para su aplicación exitosa en entornos clínicos. Las medidas de control de calidad juegan un papel vital en la evaluación de la calidad de estas terapias, desde el desarrollo hasta la administración. Este artículo explora los enfoques actuales para el control de calidad en terapias celulares, incluyendo la utilización de técnicas de medición funcional como la resistencia eléctrica transepitelial (TEER), para garantizar la calidad y seguridad de estos tratamientos prometedores.
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COMUNICADO DE PRENSA: Presentación del Consejo Asesor Científico de World Precision Instruments
SARASOTA, Fla., 10 de noviembre de 2023 /PRNewswire/ -- World Precision Instruments (WPI), un proveedor líder de instrumentos y equipos de laboratorio de alta calidad para la investigación básica y el desarrollo de fármacos, se enorgullece de anunciar el establecimiento de su Consejo Asesor Científico (SAB). Compuesto por expertos reconocidos en diversas disciplinas científicas, el SAB desempeñará un papel crucial en la orientación y el avance del compromiso de WPI con la innovación y la excelencia en la investigación científica.
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Parte 7: ¿Qué significa GxP para mí?
GxP es un marco crítico para los laboratorios de investigación, que garantiza la integridad de los datos, la seguridad del producto, el cumplimiento normativo y la eficiencia operativa. Al adherirse a estas directrices, los laboratorios pueden producir investigaciones confiables, proteger la salud pública y mantener los más altos estándares de responsabilidad científica y ética. Al optimizar la presentación de informes de cumplimiento y simplificar la preparación de auditorías con software compatible con GxP, las organizaciones pueden evitar retrasos, reducir el riesgo de sanciones por incumplimiento y demostrar con confianza un compromiso con la adherencia regulatoria.
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Importancia de la Medición de la Resistencia Eléctrica Transepithelial/Transendotelial (TEER) en Modelos In vitro de Pulmón
Se sabe que las células epiteliales y endoteliales tienen una función de barrera, como la permeabilidad selectiva. El tejido pulmonar está compuesto por capas celulares epiteliales, que se encuentran adyacentes a capas endoteliales y permiten el intercambio de oxígeno y dióxido de carbono entre el pulmón y la sangre. Actualmente, el principal enfoque de la comunidad de investigación biomédica es comprender los detalles de la infección causada por este nuevo coronavirus (2019-nCoV) o por virus similares. Este nuevo virus puede alterar la capacidad normal del pulmón para limpiarse y eliminar partículas extrañas, y la permeabilidad selectiva o función de barrera del pulmón puede verse gravemente afectada. El efecto fisiológico adverso puede mantenerse una vez que se inicia la cascada inflamatoria.
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Aplicaciones de la Medición TEER en el Descubrimiento de Fármacos
En 2022, la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) aprobó 37 nuevos medicamentos, de los cuales 20 fueron entidades químicas y 17 fueron biológicos. En 2023, el descubrimiento de fármacos sigue siendo fuerte con muchos avances nuevos como resultado de los cambios en los tipos de medicamentos que se están desarrollando y los nuevos e innovadores ensayos que se están lanzando para evaluar los medicamentos de forma preclínica. El desarrollo terapéutico sigue estando muy enfocado en enfermedades que afectan a grandes poblaciones para las cuales no existen tratamientos efectivos, y se espera que los lanzamientos de medicamentos más anticipados de 2023 sean en áreas de cáncer, enfermedad de Alzheimer, enfermedades cardiovasculares y colitis ulcerosa.
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Suministros de laboratorio imprescindibles cuando los necesitas
En cualquier laboratorio, contar con suministros clave es casi tan importante como tener el equipo principal. Elegir un proveedor confiable de estos suministros necesarios es tan importante como disponer de suministros de laboratorio de calidad cuando los necesitas. WPI quiere ser tu socio en el descubrimiento temprano de fármacos, y tenemos en stock una amplia variedad de suministros de laboratorio, muchos de los cuales pueden enviarse el mismo día hábil. Contar con una variedad de suministros listos para enviar nos convierte en un socio de investigación confiable. Aquí tienes algunos de los suministros populares que mantenemos disponibles para satisfacer tus necesidades en tu próximo experimento
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Control de Calidad de las Terapias con Células del Epitelio Pigmentario Retiniano
Las terapias celulares han surgido como un enfoque prometedor para tratar diversas condiciones médicas, ofreciendo el potencial de regenerar tejidos dañados, restaurar la función celular normal o incluso actuar como células citotóxicas que atacan y destruyen células enfermas como las células cancerosas. A medida que el campo de las terapias basadas en células y la medicina regenerativa continúa avanzando, garantizar la calidad y seguridad de las terapias celulares es de suma importancia. Las medidas de control de calidad juegan un papel fundamental en el proceso de fabricación de terapias celulares, y la resistencia eléctrica trans-epitelial (TEER) se ha convertido en una herramienta valiosa para evaluar la integridad y funcionalidad de las células utilizadas en estas terapias. Aquí, destacamos el uso de TEER para el control de calidad de las células del epitelio pigmentario retinal (RPE), una terapia celular prometedora para enfermedades degenerativas de la retina1.
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Consejos para Elegir un Proveedor Confiable de Equipos de Laboratorio
Elegir un proveedor confiable de equipos de laboratorio es crucial para garantizar la calidad, la fiabilidad y la entrega puntual del equipo que necesita. Cuando su investigación está en juego, necesita una empresa en la que confíe, un proveedor con un historial comprobado y un equipo de servicio que lo respalde. Aquí hay algunas consideraciones importantes al seleccionar un proveedor de equipos de laboratorio.
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NOTA DE APLICACIÓN: Uso de Celloger® Mini Plus para Observar Cambios Morfológicos y la Actividad Fagocítica en la Línea Celular de Macrófagos
Como los glóbulos blancos responsables de la función inmunitaria son células en suspensión que viajan por los vasos sanguíneos, los estudios de inmunología suelen utilizar diversas líneas celulares en suspensión originadas de glóbulos blancos. Trabajar con células en suspensión, a diferencia de las células adherentes, implica que un ligero movimiento de la placa al ubicarla en el microscopio hace que las células floten. Además de los problemas causados por la inestabilidad de la temperatura y el CO2, de hecho no es posible usar un microscopio tradicional para monitorear las células en tiempo real. Por lo tanto, para monitorear de manera estable las células en suspensión, es esencial un dispositivo de imagen celular en vivo como Celloger® Mini Plus que funcione dentro de una incubadora1. Además, con Celloger® Mini Plus, la cámara dentro del sistema se mueve para capturar imágenes de las células en múltiples posiciones para mantener la muestra celular en un estado estable en lugar de tener un escenario móvil con una placa encima. Cuando se monitorearon las células en suspensión tanto con Celloger® Mini Plus como con un microscopio, la imagen obtenida con Celloger® Mini Plus fue más estable en comparación con el uso del microscopio, en el que varias células estaban fuera de foco (Figura 1).
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Preguntas frecuentes sobre la medición TEER
Aquí hay algunas preguntas frecuentes (FAQ) sobre la medición TEER utilizando un EVOM2.
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Preguntas frecuentes: Solución de problemas con lecturas inestables de resistencia en un ENDOHM
Una de nuestras preguntas frecuentes (FAQs) se refiere a las mediciones TEER con un EndOhm. Si las lecturas de resistencia de su ENDOHM no se estabilizan, es posible que necesite realizar algunas soluciones de problemas.
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VIDEO: Cómo reemplazar las cuchillas de electrodo STX4
El nuevo electrodo STX4 funciona con el EVOM3, y las cuchillas son reemplazables. El EVOM3 se utiliza para realizar mediciones TEER (TER) en placas de cultivo celular. Aquí tienes un tutorial rápido que te muestra cómo reemplazar las cuchillas.
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Cómo seleccionar electrodos para realizar mediciones TEER
La resistencia eléctrica transepitelial (TEER), también conocida como resistencia transepitelial (TER), se utiliza para monitorear la salud celular. La TEER comprende mediciones de la vía transcelular (es decir, la resistencia debida a una célula individual) y la vía paracelular (es decir, la resistencia debida a la formación de uniones celulares). La TEER se usa comúnmente para monitorear la confluencia celular. Los valores de TEER pueden indicar cambios en la permeabilidad de la monocapa celular, mostrando la función de barrera de la monocapa de células como las endoteliales (microvasos cerebrales) y epiteliales (alveolares, renales e intestinales). Valores altos de TEER generalmente reflejan monocapas celulares o uniones celulares más estrechas (Lewis 1996, Matter y Balda 2003, Denker y Sabath 2011). A continuación se describen algunos beneficios principales de los sistemas de medición TEER de WPI. Los valores de TEER (análisis electrofisiológico) pueden combinarse con otros métodos de análisis para comprender mejor un fenómeno biológico. Por ejemplo, una disminución en el valor de TEER puede indicar un aumento en la permeabilidad de la monocapa, lo cual puede confirmarse adicionalmente mediante un ensayo con una molécula trazadora (fluoresceína-dextran).
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VIDEO: ¿Cuál es la diferencia entre los insertos de cultivo celular colgantes y de pie usados en cámaras EndOhm?
Las cámaras WPI EndOhm se utilizan con el medidor EVOM2 de WPI para realizar mediciones TEER (resistencia eléctrica transepitelial). Aquí Subhra muestra la diferencia entre insertos de cultivo celular colgantes y insertos de cultivo celular en posición vertical.
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Cómo ajustar la separación en tus cámaras WPI EndOhm
Las cámaras WPI EndOhm se utilizan con el medidor EVOM2 de WPI para realizar mediciones TEER (resistencia eléctrica transepitelial). Cada cámara EndOhm incluye un disco "separador" para calibrar la distancia entre los dos electrodos de la cámara. Una distancia constante garantiza mediciones fiables. Aquí Subhra muestra cómo calibrar tus cámaras.
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Electrodos de Resurfacing en una Cámara WPI EndOhm
Las cámaras WPI EndOhm se utilizan con el medidor EVOM2 de WPI para realizar mediciones TEER (resistencia eléctrica transepitelial). Después de un uso intensivo, la medición de la resistencia de fondo puede comenzar a aumentar. Es posible que sus electrodos necesiten ser renovados para eliminar la acumulación de proteínas, azúcares y materiales biológicos. Aquí Subhra demuestra cómo limpiar y renovar sus cámaras EndOhm.
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Elegir una cámara EndOhm compatible con tus insertos de cultivo celular
Las cámaras EndOhm de WPI se utilizan con el medidor EVOM2 de WPI para medir la TEER (resistencia eléctrica transepitelial) en insertos de cultivo celular. Hay tres tamaños de cámaras disponibles para placas de 6 pocillos, 12 pocillos y 24 pocillos. Aquí Subhra demuestra cómo elegir una cámara EndOhm que coincida con los insertos de cultivo celular que estás usando.
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Electrodos STX100 para Medición TEER
Con el desarrollo de un protocolo de Cribado de Alto Rendimiento (HTS) para un descubrimiento de fármacos más rápido, varios fabricantes principales de insertos para cultivo celular han introducido una nueva línea de placas de filtro para cultivo celular. Estas placas HTS normalmente tienen 24 o 96 insertos individuales de cultivo celular "unidos" en una sola placa para que pueda ser manejada por un aparato robótico. En respuesta a estos avances, WPI ha desarrollado un sistema REMS automático y un electrodo manual, STX100, para mediciones TEER usando placas HTS.
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Mantenimiento de Endohm para una Larga Duración
La serie de cámaras EndOhm, cuando se usan con el medidor de resistencia EVOM2 de WPI o el Millicell ERS, están diseñadas para proporcionar mediciones reproducibles y precisas de la resistencia del tejido endotelial en copas de cultivo. Los valores de resistencia obtenidos con el EndOhm son consistentes con los obtenidos usando una Cámara Ussing bien diseñada.