Electrodo STX4 EVOM™ con cuchillas removibles para TEER en insertos de 6.5 mm

Características

• Las láminas del electrodo son reemplazables. Después de un período de uso (meses o años) cuando los electrodos pueden haber formado depósitos de medios o muestras y pueden comenzar a mostrar inestabilidad en las lecturas, puede cambiar las láminas sin tener que reemplazar todo el electrodo.

  NOTA: La limpieza regular o diaria después del uso prolongará la vida funcional de las láminas del electrodo.

• La punta del electrodo está especialmente recubierta y no necesita ser clorada con lejía o hipoclorito de sodio para funcionar correctamente, y tampoco se ve afectada por la cloración. La cloración era crítica para el modelo anterior (electrodos STX2-PLUS) para mantener su funcionalidad.

Las puntas del electrodo STX4, la región de detección, tienen un recubrimiento especial que no requiere cloración.

• La punta del electrodo (área activa de detección) del STX4 es más corta que la del STX2-PLUS. Al estar especialmente recubierta, no necesita tener un área tan grande como el STX2-PLUS. Por lo tanto, el electrodo STX4 requiere menos volumen de líquido apical (parte superior del inserto) y basolateral (medio) que el STX2-PLUS para mantener las puntas del electrodo completamente sumergidas y poder proporcionar lecturas estables de la medición TEER.

• El electrodo STX4 se ajusta idealmente en insertos de cultivo celular tipo transwells colgantes de 24 pocillos (por ejemplo, Corning 3470) y puede permanecer colgado sobre ellos. Esto permite una operación manos libres que mejora aún más la precisión de la medición.

• El electrodo STX4 tiene una precisión de medición mejorada ya que el diseño del electrodo, que es similar al del STX2-PLUS, elimina o minimiza las variabilidades introducidas por la posición del electrodo que se observan con el STX2 o STX3. El electrodo STX2 o STX3 se sostiene a mano, y su diseño flexible es susceptible a que el electrodo se incline, lo que cambia la distancia entre las dos láminas del electrodo durante la medición. Capturar un valor estable y consistente dentro del mismo grupo de muestras usando un STX2 o STX3 es un desafío. Los usuarios de STX2 o STX3 generalmente toman múltiples mediciones de la misma muestra y usan un promedio al usar estos electrodos. Con el electrodo STX4, no se requieren múltiples mediciones de la misma muestra.

• El electrodo STX4 tiene un cable blindado, e incluso el cuerpo metálico del electrodo está conectado al mecanismo de blindaje. Al minimizar o eliminar las interferencias eléctricas y de teléfonos móviles, el blindaje asegura que la medición y las lecturas de TEER sean estables (no fluctúen) y no se vean afectadas por interferencias.

Beneficios

• Cuchillas reemplazables – Este nuevo electrodo STX4 tiene cuchillas de electrodo reemplazables.

• No es necesaria la cloruración – Las puntas del electrodo están especialmente recubiertas, por lo que no requieren cloruración (paso de mantenimiento) para asegurar la funcionalidad adecuada del electrodo al medir TEER en capas celulares como cultivos epiteliales. La cloruración era necesaria para el STX2-PLUS.

• Menor volumen de líquido necesario – Este electrodo requiere menos volumen de líquido que el electrodo STX2-PLUS para mantener las puntas sumergidas y proporcionar lecturas estables.

• Operación manos libres – El electrodo STX4 encaja perfectamente en placas de cultivo celular tipo transwells colgantes de 24 pocillos y puede permanecer colgado sobre estos transwells, permitiendo operación manos libres.

• Mayor precisión – El electrodo STX4 ofrece mejor precisión en la medición TEER, porque elimina los factores de variabilidad causados por cambios en el espaciamiento y posicionamiento del electrodo, como ocurre con el electrodo STX2.

• Protegido contra interferencias de radiofrecuencia (RFI) – Este electrodo STX4 tiene un cable blindado que elimina o minimiza cualquier interferencia (de fuentes eléctricas o teléfonos celulares) que afecte las lecturas de medición TEER.

El electrodo STX4 se coloca sobre el pocillo para operación manos libres, y el anillo de ajuste permite colocar las cuchillas del electrodo en el pocillo exactamente donde deben estar, suspendidas en la solución sin tocar la membrana ni el fondo de la placa de cultivo celular.

NOTA: Mejore la precisión de su medición TEER con el modelo anterior EVOM2 cambiando el STX2 o STX3 por el nuevo STX4. El STX4 puede usarse con el EVOM2 (modelo previo) usando el adaptador EVM-AC-02-01-01, que se vende por separado.

Mejoras clave del STX4 sobre el STX2-PLUS

• Ahorre recursos, porque el STX4 necesita menos volúmenes de líquido.

• Ahorre tiempo, porque el STX4 requiere menos mantenimiento. No se necesita cloruración.

• El STX4 es más rentable a largo plazo, porque las cuchillas del electrodo son reemplazables por el usuario.

 

Consulte la tabla a continuación para más detalles (Diferencias y similitudes entre STX4 y STX2-PLUS)

Tipo	STX2-Plus	STX4
Volúmenes de líquido necesarios para mediciones estables	Se requieren volúmenes mayores de líquido (medio) por muestra para mantener completamente sumergidas las regiones sensoras más largas y obtener lecturas estables con STX2-PLUS. Volúmenes de ejemplo: Para Corning 3470, placa transwell de 24 pozos, se necesitan volúmenes mínimos de 300 µL en la parte superior (apical) y 850 µL en la parte inferior (basolateral) para STX2-PLUS.	Se requieren menos volúmenes de líquido (medio) por muestra para que el STX4 obtenga lecturas estables y precisas. Debido a que las regiones sensoras del STX4 son más cortas y están especialmente recubiertas, el STX4 necesita menos volumen de líquido que el STX2-PLUS. El uso de menos medio con el STX4 ahorra tus recursos. Volúmenes de ejemplo: Para Corning 3470, placa transwell de 24 pozos, se necesitan volúmenes mínimos de 150 µl de medio apical y 500 µl de medio basolateral para STX4.
Clorado (Mantenimiento por el usuario) requerido	Sí, es importante. Cuando se usa diariamente, el electrodo debe ser clorado sumergiendo las puntas en hipoclorito de sodio al 3-6% durante 10 minutos (seguido de un enjuague con agua DI) para asegurar el correcto funcionamiento del electrodo.	No, no es necesario. El electrodo no necesita ser clorado. (Tampoco se ve afectado funcionalmente por el clorado.) Un recubrimiento especial en las regiones sensoras del electrodo asegura su correcto funcionamiento. Se requiere menos mantenimiento por parte del usuario, lo que te ahorra tiempo.
Cuchillas reemplazables por el usuario (Estas cuchillas están en contacto directo con las muestras y contienen la región sensora.)	No. Las cuchillas no son desmontables.	Sí. Tienes la opción de cambiar las cuchillas, haciendo que el STX4 sea más económico a largo plazo.
Aplicación	• Ideal para placas de cultivo celular transwell de 24 pozos. • Usado en mediciones de resistencia y milivoltios.	Igual que STX2-PLUS
Conectividad directa con EVOM Manual o versión anterior EVOM3	Sí	Sí
Compatibilidad con EVOM2, EVOM, Millicell ERS-2 y ERS (usando el adaptador EVM-AC-02-01-01)	Sí	Sí

 

 

Documentos

Manual de instrucciones del electrodo STX4 con cuchillas reemplazables

Tablas de compatibilidad para placas de inserción/pozos

Vídeo

7 razones para actualizar tus electrodos EVOM - Presentamos el nuevo STX4

 

 

Cómo reemplazar las cuchillas del electrodo STX4 para usar con el EVOM3

 

Preguntas frecuentes

¿Las puntas de las cuchillas del electrodo STX4 tienden a oscurecerse durante el uso o el almacenamiento?

Sí, es un proceso normal. Las puntas del electrodo STX4 tienden a oscurecerse (cosmético), pero la función del electrodo o de la hoja del electrodo permanece sin afectar.

¿Puede el color de la punta de la hoja del electrodo STX4 ser significativamente diferente en el lado exterior en comparación con el lado interior?

Sí, es normal (cosmético) y se puede atribuir al camino del flujo de corriente entre las dos hojas del electrodo. Generalmente, el lado exterior de las puntas de las hojas del electrodo tiende a oscurecerse más, ya que los electrodos exteriores están involucrados en la aplicación de corriente eléctrica desde el EVOM (Fig. 29). El lado interior de las puntas de las hojas del electrodo tiende a permanecer relativamente blanquecino (color de la punta), ya que no pasa corriente eléctrica por ese lado. Estos electrodos internos (el lado interior de las puntas de las hojas del electrodo) están involucrados en la detección del cambio (voltaje) en respuesta a la corriente aplicada. Esta diferencia observada o inconsistencia en el color de la punta (lado interior versus lado exterior) no afecta la función real de la hoja del electrodo ni del electrodo.   

El oscurecimiento de la punta del electrodo STX4 y una diferencia significativa en el color entre los lados interno y externo de las hojas del electrodo (durante el almacenamiento o después de un período de uso) se consideran normales.

NOTA: WPI realiza un acondicionamiento especial de cada hoja de electrodo individualmente (especialmente las puntas) y verifica la funcionalidad adecuada de cada hoja de electrodo fabricada y del electrodo STX4.

¿Por qué obtengo guiones o lecturas inestables en EVOM Manual, incluso si tengo el electrodo STX4 dentro de la muestra?

Un electrodo en el aire o parcialmente sumergido en el líquido puede mostrar guiones ya que registra lecturas inestables. La porción de la punta del electrodo (región de detección) debe permanecer completamente sumergida. También puede notar lecturas inestables cuando la punta del electrodo no está completamente sumergida. Asegúrese de seleccionar volúmenes apical y basolateral para que las puntas de ambos electrodos permanezcan completamente sumergidas. 

Gire el anillo de ajuste de longitud en el sentido de las agujas del reloj para que las hojas del electrodo puedan entrar más profundamente en una muestra y las puntas del electrodo puedan permanecer completamente sumergidas en los volúmenes líquidos. 

La longitud expuesta se puede ajustar en las hojas del electrodo STX4 girando el anillo de ajuste.

Asegúrese de que las puntas de detección del electrodo en ambas hojas permanezcan completamente sumergidas en un líquido conductor (medio de cultivo celular o tampón) durante la medición. Necesita tener volúmenes apical y basolateral adecuados para obtener una lectura estable.

¿Es necesario limpiar el electrodo diariamente?

Sí, es fundamental que después del uso diario limpie el electrodo, lo deje secar al aire y lo guarde en condiciones secas. Esto es necesario para la longevidad funcional de las hojas del electrodo. Consulte la sección de MANTENIMIENTO del manual de instrucciones del STX4 para más detalles.

¿Hay otras instrucciones de manejo del electrodo que WPI recomiende?

1. Siempre levante el electrodo por el cuerpo, nunca por el cable. Esto puede romper físicamente las conexiones internas gradualmente.

   	A. NO sostenga el electrodo por el cable. (Manejo Incorrecto)
   	B. Sostenga el electrodo por la región plástica indicada por la flecha roja. (Manejo Correcto)

2. Limite el nivel de inmersión o rociado de líquido a un punto por debajo del nivel máximo indicado por las flechas en la imagen abajo. No desea que el líquido entre y llegue hasta los cables o conectores. Puede limpiar el resto del electrodo con una toalla de papel rociada con isopropanol o etanol. (No rocíe directamente.)

   La inmersión en líquido debe limitarse solo hasta esta línea desde la punta (máximo). El resto del electrodo puede limpiarse con una toalla de papel húmeda.

¿Son mis insertos o transwells compatibles con el electrodo STX4?

El electrodo STX4 funciona idealmente con insertos colgantes de 24 pocillos comúnmente usados (como Corning, Millipore y Greiner). El electrodo puede usarse con la mayoría de otros insertos de 24 pocillos y de 12 pocillos. Para insertos de 12 pocillos, el electrodo debe sostenerse a mano o apoyarse manualmente durante la medición. La lista de insertos compatibles se puede encontrar aquí o está listada en el “APÉNDICE B: INSERTOS Y PLACAS COMPATIBLES” del manual de instrucciones del STX4.

¿Puede el aumento o cambio en los volúmenes de líquido de la muestra cambiar mis valores de resistencia?

Sí. Puede esperar ver un cambio en los valores de resistencia en bruto. Sin embargo, debe restar los valores en blanco (transwell transwell sin células) de los valores de muestra (transwell transwell con células). De esta manera, resta el valor en blanco con volumen aumentado de las muestras con volumen aumentado. Así, se omite cualquier cambio de resistencia causado por el aumento de volumen. Use consistentemente los mismos volúmenes para todas sus muestras en un experimento.

¿Son lo mismo la resistencia eléctrica y la resistencia eléctrica transepitelial (TEER)?

No. Multiplique la resistencia medida por el área superficial adecuada de la membrana para calcular el TEER. Por ejemplo, si un insert de 6.5 mm (placa de 24 pocillos) mide 565 Ω, el TEER es:

 565 Ω × 0.33 cm² = 186.45 Ω-cm²

[Para una placa de 24 pocillos (6.5 mm insert), área = 0.33 cm² y para una placa de 12 pocillos (12 mm insert) área = 1.13 cm². Por favor, consulte los detalles técnicos del fabricante del insert/transwell específico (por ejemplo, Millipore, Corning, etc.) para encontrar información precisa sobre el área de la membrana aplicable a un número de parte específico del insert.] 

¿Puede sugerir algunos parámetros experimentales que se puedan controlar para obtener resultados de TEER más consistentes?

• Se sabe que la temperatura afecta los valores de TEER. Recomendamos mantener una temperatura constante de la muestra para obtener valores consistentes. Sugerimos sacar la placa de pocillos con inserts que contienen células del incubador y dejar que la placa se estabilice a temperatura ambiente dentro de la campana de flujo laminar durante 15-20 minutos antes de tomar las mediciones. Para entonces, todas las muestras estarán aproximadamente a la misma temperatura ambiente.

• Después de añadir líquidos a los transwells, espere 15 minutos antes de tomar las mediciones. Los niveles de líquido dentro y fuera del insert tenderán a igualarse y proporcionarán una mejor estabilidad en la lectura. 

• Recomendamos usar el mismo líquido conductor con la misma concentración iónica tanto en el lado apical (parte superior del cultivo celular insert) como en el basolateral (parte inferior del insert). Por ejemplo, use el mismo medio tanto dentro como fuera del insert. 

• La aplicación de volúmenes consistentes del fluido (medio/tampón) durante todos los experimentos reduce la variabilidad.