Conceptos básicos del microscopio
Los microscopios son una herramienta estándar de laboratorio, pero comprar el microscopio adecuado para una aplicación particular puede ser un desafío. Primero, considere cómo usará el instrumento. ¿Está observando portaobjetos, diseccionando un animal pequeño o realizando una cirugía? (La aplicación determina la distancia de trabajo necesaria y el poder de aumento.) ¿Qué tipo de soporte utilizará? (Soporte de brazo, brazo articulado o soporte de poste) ¿Se usará el microscopio en un aula? (Un microscopio trinocular ofrece la opción de incluir una cámara.) ¿Necesitará una cámara? (Una cámara le permite proyectar la imagen del microscopio en una PC o TV o tomar imágenes fijas.) Las respuestas a estas preguntas le ayudarán a determinar la distancia de trabajo requerida, el nivel de aumento, el tipo de soporte y el hardware necesario.
Partes de un Microscopio
Ocular–Dos o más lentes están contenidas en el ocular, y se pueden usar varios tipos de oculares en un microscopio. Los aumentos típicos del ocular son 10X, 15X y 20X. El ocular generalmente tiene un ajuste de dioptrías para un enfoque más nítido. Para información sobre la distancia interpupilar y el ajuste de las dioptrías, consulte http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/kohler/diopter/index.html.
Objetivos–Los objetivos enfocan la luz proveniente de la muestra. Usualmente, de tres a cinco objetivos están enroscados en la torreta (portobjetivos). Los objetivos vienen en una variedad de aumentos y tipos. Para más detalles sobre los tipos de objetivos, vea "Objetivos de Microscopio."
Platina–La platina es una plataforma que sostiene la muestra. Usualmente tiene un agujero en el centro que permite el paso de la luz. La muestra se posiciona sobre el agujero.
Condensador–El condensador es una lente que enfoca la luz de la fuente luminosa sobre la muestra.
Fuente de luz–Aunque la fuente de luz podría ser luz ambiental reflejada con un espejo, usualmente es una lámpara halógena, luz LED o láser.
Perillas de enfoque–Use las perillas de enfoque grueso y fino para mover la platina hacia arriba y abajo para enfocar la muestra en los oculares.
Definiciones
Los siguientes términos pueden ser útiles al hablar de microscopios:
Campo de visión (FOV)–Este es el diámetro del círculo de luz que se ve al mirar a través de los oculares del microscopio. Cuanto mayor es el aumento, menor es el campo de visión.
CONSEJO TÉCNICO: El campo de visión se puede calcular en la mayoría de los microscopios compuestos usando el número de campo y el aumento del objetivo. El FOV = número de campo / aumento del objetivo. Por ejemplo:
número de campo 18 mm con un objetivo 10X --> 18/10=1.8 mm=1800 µm FOV.
número de campo 20 mm con un objetivo 40X --> 20/40=0.5 mm=500 µm FOV.
Distancia de trabajo–La distancia entre la parte superior de la muestra y la parte inferior del objetivo es la distancia de trabajo. Al diseccionar un animal pequeño, se necesita una mayor distancia de trabajo que al observar portaobjetos.
Aumento–Es la cantidad en que se amplía una imagen. Por ejemplo, un aumento de 10X hace que una muestra se vea diez veces más grande. Cuanto mayor es el aumento, menor es el campo de visión. El aumento total de un microscopio es igual al aumento del ocular multiplicado por el aumento del objetivo.
Dioptría–Técnicamente, la dioptría es una medida del valor de corrección de una lente. Es el recíproco de la distancia focal en metros. Si una lente puede enfocar a 1 metro, tiene una dioptría de 1. Si enfoca a 2 metros, tiene una dioptría de 1/2. Cada ocular de microscopio tiene un ajuste de dioptrías para permitir hacer correcciones menores en la imagen, compensando la diferencia de visión entre ambos ojos.
Apertura numérica (N.A.)–Este número está directamente relacionado con el medio de refracción (aire (objetivo seco) = índice de refracción 1.00; aceite = 1.515) y el ángulo de refracción. Un objetivo de aceite tiene una N.A. más alta que un objetivo seco. El ángulo de refracción está determinado por qué tan cerca está el objetivo de la muestra. Cuanto mayor es la N.A., mayor es la resolución del objetivo o lente.
Resolución–La resolución describe la claridad de la vista. La resolución determina qué tan cerca pueden estar dos puntos en el campo de visión y aún verse como distintos.
Distancia interpupilar–Es la distancia entre los ojos del observador. Para microscopios binoculares, puede ajustar la distancia entre los oculares para que el observador vea un solo círculo de luz en lugar de dos al mirar por ambos oculares.
