STX4 EVOM™ Elektrode mit abnehmbaren Klingen für TEER in 6,5 mm Einsätzen

Eigenschaften

• Die Elektrodenblätter sind austauschbar. Nach längerer Nutzung (nach Monaten oder Jahren), wenn sich Ablagerungen aus Medium oder Proben gebildet haben und die Messwerte instabil werden, können Sie die Blätter wechseln, ohne die gesamte Elektrode ersetzen zu müssen.

  HINWEIS: Regelmäßige oder tägliche Reinigung nach der Benutzung verlängert die Lebensdauer der Elektrodenblätter.

• Die Elektrodenspitze ist speziell beschichtet und muss für eine ordnungsgemäße Funktion nicht mit Bleichmittel oder Natriumhypochlorit chloriert werden; sie wird auch durch Chlorieren nicht beeinträchtigt. Das Chlorieren war für das Vorgängermodell (STX2-PLUS-Elektroden) entscheidend, um die Funktionalität zu erhalten.

Die Elektrodenspitzen der STX4, der Messbereich, sind mit einer speziellen Beschichtung versehen, die kein Chlorieren erfordert.

• Die Elektrodenspitze (aktiver Messbereich) der STX4 ist kürzer als die der STX2-PLUS. Durch eine spezielle Beschichtung benötigt sie nicht so große Flächen wie die STX2-PLUS. Daher erfordert die STX4-Elektrode weniger apikale (oben im Insert) und basolaterale Flüssigkeitsvolumina (Medium), um die Elektrodenspitzen vollständig einzutauchen und stabile TEER-Messwerte zu liefern.

• Die STX4-Elektrode passt ideal auf 24-Well hängende Transwell-Zellkultur-Inserts (z. B. Corning 3470) und kann dort aufgehängt bleiben. Dies ermöglicht eine freihändige Bedienung, die die Messgenauigkeit weiter verbessert.

• Die STX4-Elektrode bietet eine verbesserte Messgenauigkeit, da das Elektrodendesign, das dem des STX2-PLUS ähnelt, Variabilitäten durch die Elektrodenpositionierung, wie sie bei der STX2 oder STX3 auftreten, eliminiert oder minimiert. Die STX2- oder STX3-Elektrode wird von Hand gehalten, und ihr flexibles Design ist anfällig für ein Kippen der Elektrode, was den Abstand zwischen den beiden Elektrodenblättern während der Messung verändert. Es ist schwierig, mit einer STX2- oder STX3-Elektrode innerhalb derselben Probenreihe einen stabilen und konsistenten Wert zu erfassen. Anwender der STX2 oder STX3 führen in der Regel mehrere Messungen derselben Probe durch und verwenden den Durchschnitt dieser Werte. Mit der STX4-Elektrode sind mehrere Messungen derselben Probe nicht erforderlich.

• Die STX4-Elektrode verfügt über ein abgeschirmtes Kabel, und sogar das Metallgehäuse der Elektrode ist mit dem Abschirmmechanismus verbunden. Durch die Minimierung oder Eliminierung von elektrischen und Mobilfunkstörungen sorgt die Abschirmung dafür, dass die TEER-Messung und die Ausgaben stabil sind (nicht schwanken) und von Störungen unbeeinflusst bleiben.

Vorteile

• Austauschbare Klingen – Diese neue STX4-Elektrode verfügt über austauschbare Elektrodenklingen.

• Kein Chlorieren notwendig – Die Elektrodenspitzen sind speziell beschichtet und benötigen kein Chlorieren (Wartungsschritt), um die ordnungsgemäße Funktion der Elektrode bei der Messung des TEER von Zellschichten wie epithelialen Kulturen sicherzustellen. Chlorieren war für den STX2-PLUS erforderlich.

• Weniger Flüssigkeitsvolumen erforderlich – Diese Elektrode benötigt weniger Flüssigkeitsvolumen als die STX2-PLUS-Elektrode, um die Spitzen eingetaucht zu halten und stabile Messwerte zu gewährleisten.

• Freihändige Bedienung – Die STX4-Elektrode passt perfekt in 24-Well-Hänge-Transwells-Zellkultur-Wellplatten und kann an diesen Transwells aufgehängt bleiben, was eine freihändige Bedienung ermöglicht.

• Höhere Präzision – Die STX4-Elektrode bietet eine bessere TEER-Messgenauigkeit, da sie die Variabilitätsfaktoren durch Änderungen im Elektrodenabstand und der Positionierung eliminiert, wie sie bei der STX2-Elektrode auftreten.

• Abgeschirmt gegen Hochfrequenzstörungen (RFI) – Diese STX4-Elektrode verfügt über ein abgeschirmtes Kabel und eliminiert oder minimiert jegliche Störungen (durch elektrische Quellen oder Mobiltelefone), die die TEER-Messwerte beeinflussen könnten.

Die STX4-Elektrode sitzt auf dem Well für freihändige Bedienung, und der Einstellring ermöglicht es, die Elektrodenklingen genau dort im Well zu platzieren, wo sie sein müssen, in der Lösung schwebend, ohne die Membran oder den Boden der Zellkultur-Wellplatte zu berühren.

HINWEIS: Verbessern Sie Ihre TEER-Messgenauigkeit mit dem älteren EVOM2, indem Sie den STX2 oder STX3 durch den neuen STX4 ersetzen. Der STX4 kann mit dem EVOM2 (Vorläufermodell) unter Verwendung des separat erhältlichen EVM-AC-02-01-01 Adapters verwendet werden.

Wesentliche Verbesserungen des STX4 gegenüber dem STX2-PLUS

• Sparen Sie Ressourcen, da der STX4 weniger Flüssigkeitsvolumen benötigt.

• Sparen Sie Zeit, da der STX4 weniger Wartung benötigt. Kein Chlorieren erforderlich.

• Der STX4 ist auf lange Sicht kosteneffizienter, da die Elektrodenklingen vom Benutzer austauschbar sind.

 

Siehe die Tabelle unten für Details (Unterschiede und Gemeinsamkeiten zwischen STX4 und STX2-PLUS)

Typ	STX2-Plus	STX4
Flüssigkeitsvolumen erforderlich für stabile Messungen	Für die STX2-PLUS werden größere Flüssigkeitsvolumen (Medium) pro Probe benötigt, um die längeren Sensorbereiche vollständig einzutauchen und stabile Messwerte zu erhalten. Beispielvolumen: Für Corning 3470, 24-Well-Transwell, werden für die STX2-PLUS mindestens 300 µL oben (apikal) und 850 µL unten (basolateral) benötigt.	Für die STX4 werden weniger Flüssigkeitsvolumen (Medium) pro Probe benötigt, um stabile und genaue Messwerte zu erhalten. Da die Sensorbereiche der STX4 kürzer und speziell beschichtet sind, benötigt die STX4 weniger Flüssigkeitsvolumen als die STX2-PLUS. Die Verwendung von weniger Medium mit der STX4 spart Ihre Ressourcen. Beispielvolumen: Für Corning 3470, 24-Well-Transwell, werden für die STX4 mindestens 150 µl apikal und 500 µl basolateral benötigt.
Chlorierung (Benutzerwartung) erforderlich	Ja, das ist wichtig. Bei täglicher Nutzung muss die Elektrode durch Eintauchen der Elektrodenenden in 3-6% Natriumhypochlorit für 10 Minuten chloriert werden (gefolgt von einer Spülung mit DI-Wasser), um die ordnungsgemäße Funktion der Elektrode sicherzustellen.	Nein, das ist nicht erforderlich. Die Elektrode muss nicht chloriert werden. (Die Funktion wird durch Chlorierung ebenfalls nicht beeinträchtigt.) Eine spezielle Beschichtung der Sensorbereiche der Elektrode gewährleistet die ordnungsgemäße Funktion. Weniger Wartung durch den Benutzer ist erforderlich, was Ihnen Zeit spart.
Vom Benutzer austauschbare Klingen (Diese Klingen kommen direkt mit den Proben in Kontakt und enthalten den Sensorbereich.)	Nein. Die Klingen sind nicht abnehmbar.	Ja. Sie haben die Möglichkeit, die Klingen zu wechseln, was die STX4 auf lange Sicht kosteneffizienter macht.
Anwendung	• Ideal für 24-Well-Transwell-Zellkulturplatten. • Wird für Widerstands- und Millivolt-Messungen verwendet.	Wie bei STX2-PLUS
Direkte Verbindung mit EVOM Manual oder älterer Version EVOM3	Ja	Ja
Kompatibilität mit EVOM2, EVOM, Millicell ERS-2 und ERS (unter Verwendung des EVM-AC-02-01-01 Adapters)	Ja	Ja

 

 

Dokumente

Bedienungsanleitung für STX4-Elektrode mit austauschbaren Klingen

Kompatibilitätsdiagramme für Inserts/Well-Platten

Video

7 Gründe, Ihre EVOM-Elektroden aufzurüsten – Vorstellung der neuen STX4

 

 

Wie man die STX4-Elektrodenklingen für die Verwendung mit dem EVOM3 austauscht

 

Häufig gestellte Fragen

Neigen die Elektrodenspitzen der STX4-Elektrodenklingen dazu, sich im Laufe der Nutzung oder während der Lagerung zu verfärben?

Ja, das ist ein normaler Vorgang. Die STX4-Elektrodenspitzen neigen dazu, sich zu verdunkeln (kosmetisch), aber die Elektrode oder die Elektrodenklinge bleibt funktional unbeeinträchtigt.

Kann die Farbe der STX4-Elektroden-Spitze an der Außenseite deutlich anders sein als an der Innenseite?

Ja, das ist normal (kosmetisch) und kann auf den Stromflussweg zwischen den beiden Elektrodenklingen zurückgeführt werden. Im Allgemeinen neigt die Außenseite der Elektrodenklingen-Spitzen dazu, stärker zu verdunkeln, da die äußeren Elektroden am Anlegen des elektrischen Stroms vom EVOM beteiligt sind (Abb. 29). Die Innenseite der Elektrodenklingen-Spitzen bleibt relativ weißlich (Spitzenfarbe), da durch diese Seite kein elektrischer Strom fließt. Diese inneren Elektroden (die Innenseite der Elektrodenklingen-Spitzen) sind an der Erkennung der Änderung (Spannung) als Reaktion auf den angelegten Strom beteiligt. Dieser beobachtete Unterschied oder die Inkonsistenz der Spitzenfarbe (Innenseite versus Außenseite) beeinträchtigt die tatsächliche Funktion der Elektrodenklinge oder der Elektrode nicht.   

Die Verdunkelung der STX4-Elektroden-Spitze und ein deutlicher Farbunterschied zwischen der inneren und äußeren Seite der Elektrodenklingen (während der Lagerung oder nach einer Nutzungsdauer) gelten als normal.

HINWEIS: WPI führt eine spezielle Konditionierung aller Elektrodenklingen einzeln durch (insbesondere der Spitzen) und überprüft die ordnungsgemäße Funktion jeder hergestellten Elektrodenklinge und der STX4-Elektrode.

Warum erhalte ich beim EVOM Manual Striche oder instabile Messwerte, obwohl ich die STX4-Elektrode in der Probe habe?

Eine Elektrode in der Luft oder nur teilweise in der Flüssigkeit eingetaucht kann Striche anzeigen, da sie instabile Messwerte aufzeichnet. Der Elektroden-Spitzenbereich (Sensorgebiet) muss vollständig eingetaucht bleiben. Sie können auch instabile Messwerte bemerken, wenn die Elektroden-Spitze nicht vollständig eingetaucht ist. Stellen Sie sicher, dass Sie apikale und basolaterale Volumina wählen, sodass die Elektroden-Spitzen beider Elektrodenklingen vollständig eingetaucht bleiben. 

Drehen Sie den Längen-Einstellring im Uhrzeigersinn, damit die Elektrodenklingen tiefer in eine Probe eindringen können und die Elektroden-Spitzen möglicherweise vollständig in den Flüssigkeitsvolumina eingetaucht bleiben. 

Die freiliegende Länge kann bei den STX4-Elektrodenklingen durch Drehen des Einstellrings angepasst werden.

Stellen Sie sicher, dass die Elektroden-Sensitivspitzen beider Klingen während der Messung vollständig in einer leitfähigen Flüssigkeit (Zellkulturmedium oder Puffer) eingetaucht bleiben. Sie benötigen ausreichende apikale und basolaterale Volumina, um eine stabile Messung zu erhalten.

Muss die Elektrode täglich gereinigt werden?

Ja, es ist entscheidend, dass die Elektrode nach täglichem Gebrauch gereinigt und an der Luft getrocknet wird und trocken gelagert wird. Dies ist für die funktionale Langlebigkeit der Elektrodenblätter erforderlich. Details finden Sie im Abschnitt WARTUNG des STX4-Benutzerhandbuchs.

Gibt es weitere Handhabungshinweise für die Elektrode, die WPI empfiehlt?

1. Heben Sie die Elektrode immer am Gehäuse an, niemals am Kabel. Dies kann die internen Verbindungen allmählich beschädigen.

   	A. Halten Sie die Elektrode NICHT am Kabel. (Falsche Handhabung)
   	B. Halten Sie die Elektrode am Kunststoffbereich, der durch den roten Pfeil angezeigt wird. (Richtige Handhabung)

2. Begrenzen Sie das Eintauchen oder die Flüssigkeitssprühhöhe irgendwo unterhalb des maximalen Niveaus, das durch die Pfeile im Bild unten angezeigt wird. Die Flüssigkeit sollte nicht ins Innere gelangen und bis zu den Kabeln oder Steckverbindern reichen. Den Rest der Elektrode können Sie mit einem mit Isopropanol oder Ethanol besprühten Papiertuch abwischen. (Nicht direkt aufsprühen.)

   Das Eintauchen in Flüssigkeit sollte nur bis zu dieser Linie an der Spitze (maximal) erfolgen. Der Rest der Elektrode kann mit einem feuchten Papiertuch abgewischt werden.

Sind meine Inserts oder Transwells mit der STX4-Elektrode kompatibel?

Die STX4-Elektrode funktioniert ideal mit den häufig verwendeten 24-Well-Hängeinserts (wie Corning, Millipore und Greiner). Die Elektrode kann mit den meisten anderen 24-Well- und 12-Well-Inserts verwendet werden. Bei 12-Well-Inserts muss die Elektrode während der Messung von Hand gehalten oder gestützt werden. Die Liste der kompatiblen Inserts finden Sie hier oder im „ANHANG B: KOMPATIBLE INSERTS UND PLATTEN“ des STX4-Benutzerhandbuchs.

Kann das Erhöhen oder Ändern der Probenflüssigkeitsvolumina meine Widerstandswerte verändern?

Ja. Sie können eine Änderung der Rohwiderstandswerte erwarten. Allerdings sollten Sie die Leerwerte (leeres Transwell ohne Zellen) von den Probenwerten (Transwell mit Zellen) subtrahieren. So subtrahieren Sie den Leerwert mit erhöhtem Volumen von Proben mit erhöhtem Volumen. Dadurch wird jede Widerstandsänderung, die durch das erhöhte Volumen verursacht wird, ausgeschlossen. Verwenden Sie konsequent die gleichen Volumina für alle Ihre Proben in einem experimentellen Aufbau.

Sind der elektrische Widerstand und der transepitheliale elektrische Widerstand (TEER) dasselbe?

Nein. Multiplizieren Sie den gemessenen Widerstand mit der entsprechenden Membranfläche, um die TEER zu berechnen. Wenn beispielsweise ein 6,5 mm (24-Well-Platte) insert 565 Ω misst, beträgt die TEER:

 565 Ω × 0,33 cm² = 186,45 Ω-cm²

[Für eine 24-Well-Platte (6,5 mm insert) beträgt die Fläche 0,33 cm² und für eine 12-Well-Platte (12 mm insert) beträgt die Fläche 1,13 cm². Bitte beachten Sie die technischen Details des Herstellers des spezifischen insert/transwell (z. B. Millipore, Corning usw.), um genaue Informationen über die Membranfläche zu erhalten, die für eine bestimmte insert-Teilenummer gilt.] 

Können Sie einige experimentelle Parameter vorschlagen, die kontrolliert werden können, um konsistentere TEER-Ergebnisse zu erzielen?

• Die Temperatur beeinflusst bekanntermaßen die TEER-Werte. Wir empfehlen, eine konstante Probentemperatur einzuhalten, um konsistente Werte zu erhalten. Wir schlagen vor, die Wellplatte mit inserts, die Zellen enthalten, aus dem Inkubator zu nehmen und die Platte 15-20 Minuten bei Raumtemperatur im Laminar-Flow-Schrank stabilisieren zu lassen, bevor Sie Messungen durchführen. Zu diesem Zeitpunkt haben alle Proben ungefähr dieselbe Raumtemperatur.

• Nach dem Hinzufügen von Flüssigkeiten zu transwells warten Sie 15 Minuten, bevor Sie Messungen vornehmen. Die Flüssigkeitsstände innerhalb und außerhalb des insert gleichen sich in der Regel an und sorgen für eine stabilere Messung. 

• Wir empfehlen, dieselbe leitfähige Flüssigkeit mit derselben Ionen-Konzentration sowohl auf der apikalen (Oberseite der Zellkultur-insert) als auch auf der basolateralen (Unterseite des insert) Seite zu verwenden. Zum Beispiel dasselbe Medium sowohl innerhalb als auch außerhalb des insert zu verwenden. 

• Die Anwendung konsistenter Volumina der Flüssigkeit (Medium/Puffer) während aller Experimente reduziert die Variabilität.