MICRO-ePUMP Injektionssequenz erklärt
Übersicht über die MICRO-ePUMP
Die MICRO-ePUMP wurde entwickelt, um die intrazelluläre Injektion und eine Vielzahl anderer Mikoinjektionsaufgaben zu vereinfachen. Sie verwendet sorgfältig regulierten Luftdruck, um Zellen mit Flüssigkeit zu injizieren. Die injizierten Volumina reichen von Pikoliter bis Nanoliter. Zeit, Injektionsdruck und Kompensationsdruck werden unabhängig über die Touchscreen-Oberfläche eingestellt. Die Zeitintervalle können je nach eingestelltem Injektionsdruck von 2 Sekunden bis zu 10 ms oder weniger reichen. Das Intervall des Injektionsdrucks wird über den Fußschalter ausgelöst.
Die MICRO-ePUMP ist darauf ausgelegt, sehr kleine Flüssigkeitsmengen, wie z. B. Medikamente, in Zellen oder kleine Organellen zu injizieren. Zwei verschiedene positive Drücke können mit einer präzisen Zeitschaltung angewendet werden, die automatisch zwischen den beiden Drücken wechselt.
- Der Anschluss liefert positiven Druck für die Hochdruckausstoßung.
- Der Druckanschluss hält einen niedrigen positiven „Kompensations“-Druck an der injizierenden Pipette zwischen den Injektionsimpulsen aufrecht, um die Flüssigkeitsaufnahme durch Kapillarwirkung zu verhindern.
Integrierte MICRO-ePORE zur Erleichterung der Penetration
Die MICRO-ePORE™ Pinpoint Cell Penetrator-Technologie von WPI ist in die MICRO-ePUMP eingebettet. Wenn der Forscher die MICRO-ePORE™ aktiviert, liefert sie ein hochlokalisiertes Spannungssignal an die gezielte Injektionsstelle, um die Penetration mit minimalem Trauma zu erleichtern. Der Forscher bestimmt Amplitude und Frequenz des Signals, die am besten zur Anwendung passen. Das Signal stammt aus der Steuereinheit und wird über das Elektroden-Interfacekabel zum Mikroelektrodenhalter übertragen. Ein Silberdraht wird verwendet, um das Signal in die elektrisch leitfähige Substanz, die injiziert wird, zu übertragen. Eine Referenzelektrode wird verwendet, um das Medium auf 0,0 V Potential in Bezug auf die erzeugte Spannung zu setzen.
Verständnis der MICRO-ePUMP Injektionssequenz
Hier ist eine praktische Infografik, die die Abfolge der Ereignisse während einer MICRO-ePUMP-Injektion definiert. Mehrere Ereignisse passieren fast gleichzeitig. Diese Infografik zeigt die verschiedenen Auslösezeitpunkte und demonstriert, was bei jedem Meilenstein passiert. Die Auslösevorgänge sind chronologisch unten dargestellt, und die Grafik zeigt den Zustand dieser interessanten Punkte während der Ereignisse:
- Die Art des angewendeten Drucks (Kompensationsdruck oder Injektionsdruck)
- Die Position des Fußschalters (nicht gedrückt, halb gedrückt, vollständig gedrückt)
- Die Position der Pipette (in Pufferlösung, innerhalb der Zelle)
- Akustische Rückmeldetöne (kein Ton, Bestanden- oder Fehlerton, Injektionston)
- Die Spannungsausgabe (keine Spannung, Messspannung für Kontinuität, Injektionsspannung)
Ablauf der Ereignisse bei der Durchführung einer Injektion
1. Um eine Injektion durchzuführen, positionieren Sie zuerst die Pipette in der Pufferlösung. Dann drücken Sie den Fußschalter halb herunter bis zur ersten Position. Der Fußschalter startet den Kontinuitätstest des Kreises, der 400 ms dauert. Während dieser 400 ms:
- Hält die MICRO-ePUMP den Kompensationsdruck aufrecht, um die Flüssigkeitsaufnahme durch Kapillarwirkung zu verhindern.
- Ist während des Kontinuitätstests kein Ton zu hören.
- Steigt der Strom auf die Messspannung für die Kontinuität und fällt nach dem 400 ms Test auf die programmierte Injektionsspannung ab.
2. Unmittelbar nach Abschluss des Kontinuitätstests ist einer von zwei Tönen zu hören.
- Ein tiefer Ton zeigt an, dass die Kontinuität des Kreises nicht hergestellt werden konnte, und Sie sollten Ihre Einrichtung vor der Injektion neu überprüfen.
- Ein hoher Ton signalisiert, dass die Kontinuität des Kreises bestätigt wurde und Sie fortfahren können.
Die Spannung fällt sofort nach Abschluss des Tests auf die programmierte Injektionsspannung ab. Die MICRO-ePORE ist aktiviert und bereit für die Zellpenetration, abhängig vom Ergebnis des Kontinuitätstests.
3. Wenn der Kontinuitätstest bestanden wurde, können Sie die Pipette in die Zelle bewegen. Zum Zeitpunkt der Penetration:
- Wird der Kompensationsdruck aufrechterhalten.
- Ist das Pedal noch halb gedrückt.
- Erklingt weiterhin der Ton des Kontinuitätstests.
- Wird die Injektionsspannung gehalten, was bedeutet, dass die MICRO-ePORE aktiviert ist.
4. Sobald die Pipette die Zelle durchdringt, können Sie den Fußschalter ganz durchdrücken (zweite Position). Zu diesem Zeitpunkt:
- Erhöht die MICRO-ePUMP den Druck auf den Injektionsdruck und hält diesen für die programmierte Injektionszeit.
- Ist während der Injektion kein Ton zu hören.
- Fällt die MICRO-ePORE-Spannung auf null und bleibt dort bis zum Beginn des nächsten Injektionszyklus.
5. Wenn die Injektion abgeschlossen ist:
- Fällt der Druck der MICRO-ePUMP auf den Kompensationsdruck ab.
- Bleibt der Fußschalter vollständig gedrückt.
- Bleibt die Pipette in der Probe.
- Erklingt ein kurzer, deutlicher Ton, der anzeigt, dass die Injektion erfolgt ist.
6. An diesem Punkt können Sie die Pipette aus der Probe entfernen, und alle anderen interessanten Punkte bleiben unverändert.
7. Schließlich können Sie den Fußschalter loslassen. Sie sind nun bereit, den Injektionszyklus mit einer neuen Probe zu wiederholen.
Infografik herunterladen
Der Injektionszyklus dauert nur wenige Sekunden, aber die Infografik zeigt klar, wie alle Auslösevorgänge und interessanten Punkte zusammenkommen. Die grafische Darstellung kann Ihnen helfen, sich mit dem Ablauf vertraut zu machen, während Sie diese Schritte bei jeder Injektion durchlaufen. Sie können die druckfertige Infografik herunterladen, um sie in Ihrem Labor auszuhängen.
Wenn Sie Fragen haben, rufen Sie uns an unter (866) 606-1974 (gebührenfrei in den USA) oder senden Sie eine E-Mail an wpi@wpiinc.com.
