Wie man Elektroden für TEER-Messungen auswählt

Transepitheliale elektrische Resistenz (TEER), auch als transepitheliale Resistenz (TER) bezeichnet, wird verwendet, um die Zellgesundheit zu überwachen. TEER besteht aus Messungen des transzellulären Weges (d. h. Widerstand durch eine einzelne Zelle) und des parazellulären Weges (d. h. Widerstand durch die Bildung der Zellverbindungen). TEER wird häufig verwendet, um die Zellkonfluenz zu überwachen. TEER-Werte können Veränderungen der Permeabilität der Zellmonolage anzeigen und zeigen die Barrierefunktion von Zellen wie Endothelzellen (Hirn-Mikrogefäße) und Epithelzellen (alveolär, Nieren- und Darmzellen). Hohe TEER-Werte spiegeln im Allgemeinen dichtere Zellmonolagen oder Zellverbindungen wider (Lewis 1996, Matter und Balda 2003, Denker und Sabath 2011). Einige wesentliche Vorteile der WPI TEER-Messsysteme werden im Folgenden beschrieben. Die TEER-Werte (elektrophysiologische Analyse) können mit anderen Analysemethoden kombiniert werden, um ein biologisches Phänomen besser zu verstehen. Zum Beispiel kann ein Abfall des TEER-Werts auf eine erhöhte Monolagenpermeabilität hinweisen, was durch einen Test mit einem Tracermolekül (Fluorescein-Dextran) weiter bestätigt werden kann. Wenn ein Wissenschaftler verstehen möchte, ob ein Medikament Auswirkungen auf Zellen hat, kann die TEER-Messung im Primärscreening verwendet werden, um zu überprüfen, ob ein Medikament die Zellgesundheit oder die Permeabilität der Zellmonolage beeinflussen kann. Die TEER-Messsysteme von WPI verwenden einen sehr niedrigen Strom (10 µA), und wir empfehlen, diesen Strom für eine kurze Dauer (maximal etwa 1-2 Minuten) während jeder Messung anzuwenden. Bei einem solchen Aufbau, da während der Datenerfassung keine (oder vernachlässigbare) physiologische Veränderung zu erwarten ist, können unsere TEER-Messsysteme als nicht-invasiv betrachtet werden. Eine spezifische Probe, die für die TEER-Messung analysiert wurde, kann für weitere Experimente verwendet werden, wie z. B. den Nachweis des Proteingehalts oder die Bestimmung der Zellvitalität. Die TEER-Messmethode wurde von vielen Wissenschaftlern übernommen, da TEER-Werte verschiedene biologische Phänomene anzeigen können, die mit anderen Techniken weiter erforscht oder bestätigt werden können. Die TEER-Messung erfordert einen einfachen experimentellen Ansatz.

Denker, B. M. und E. Sabath (2011). "Die Biologie der Tight Junctions von Epithelzellen in der Niere." Journal of the American Society of Nephrology 22(4): 622-625. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21415157

Matter, K. und M. S. Balda (2003). "Funktionelle Analyse von Tight Junctions." Methods 30(3): 228-234. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12798137

Lewis, S. A. (1996). Epitheliale Elektrophysiologie. Epithelial Transport, Springer: 93-117. https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-94-009-1495-7_5

In diesen zwei Videos besprechen wir die Elektrodenoptionen, die wir bei WPI anbieten. Die Wahl der Elektrode hängt hauptsächlich von Ihrem System ab (z. B. Zellkultur-Insert-/Wellplattenabmessungen). Im Laufe der Jahre haben wir verschiedene Elektroden entwickelt, um die Kompatibilität mit unterschiedlichen Systemen zu gewährleisten und die Erfassung konsistenter Daten zu verbessern, indem menschliche Fehler bei Laborversuchen minimiert werden.